慢病毒介导KCNMA1体外转染大鼠间充质干细胞及功能测定

间充质干细胞具有高度增殖、自我更新和多向分化的潜能。大电导钙离子激活的钾通道M亚族α亚基（potassium large conductance calcium-activated channel,subfamily M,alpha member 1,KCNMA1）介导细胞内K＋的外流,使细胞膜超极化,降低细胞的兴奋性。该研究通过制备KCNMA1重组慢病毒载体和空白对照慢病毒载体,将其转染至间充质干细胞内,测定转染复数值（MOI）,并通过RT-PCR和Western blot比较转染前后KCNMA1的表达变化情况,检测转染前后细胞微环境中电解质浓度变化。结果成功包装了KCNMA1慢病毒载体和空白病毒载体并转染入干细胞内;含有目的基因的慢病毒转染间充质干细胞后,RT-PCR和Western blot提示KCNMA1过表达,且细胞微环境中K＋浓度升高。证实成功地将含KCNMA1的慢病毒载体转染进入大鼠间充质干细胞内,并在细胞内过表达且发挥功能,为体内研究KCNMA1结合干细胞治疗相关疾病奠定了基础。     

P.chrysosporium分批发酵木素过氧化物酶动力学模型

目的:为研究黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium AS5.776)液态分批发酵产木素过氧化物酶(LiP)发酵动力学规律,实现其发酵过程的优化,达到进一步提高酶产量.方法:对P.chrysosporium AS5.776进行5L液态分批发酵,根据发酵过程中菌体生长、基质消耗及LiP形成规律,基于Logistic方程和Luedeking-Piret方程建立了P.chrysosporium AS5.776液态分批发酵的过程动力学模型,并对模型进行了参数拟合、方差分析及验证比较.结果:模型模拟计算结果与实验值能较好地吻合,R2分别为0.9891、0.995 6和0.9925,模型显著性极高.验证实验显示所构建模型平均相对误差分别为2.9％、3.6％和12.5％.结论:该模型能较好揭示木素过氧化物酶发酵代谢过程的特征,可为工业化应用提供理论依据.     

2005年第16届国际生物学奥林匹克竞赛实验考试(3)

第4部分植物生物学实验1植物解剖学与生理学(20分)材料及用具提供给你相关的1套用具和实验材料及一些工具和仪器,如解剖镜、显微镜、培养皿、镊子、载玻片、盖玻片和滤纸。装有1种水生植物的培养皿。完成下列实验: 1)先在解剖镜下观察植物,回答问题1-3。     

苜蓿青贮用乳酸菌复合系Al2的组成多样性

苜蓿是高蛋白的饲料作物,青贮是保存青草过冬的主要手段,但苜蓿是难青贮的作物,添加乳酸菌制剂是解决苜蓿青贮难的有效措施。本研究室通过连续的限制性培养筛选到苜蓿青贮用乳酸菌复合系Al2,用变性梯度凝胶电泳(DGGE)、平板分离及建立16S rDNA克隆文库3种手段相结合分析Al2的组成多样性,确认Al2复合菌系由7株菌组成,全部属于Lactobacillus。其中3株菌Al2-1i,Al2-2i,Al2-3i通过平板分离得到,分别属于L.plantarum(99.9%)、L.kimchii(99.4%)、L.farciminis(100%)。在Al2复合菌系的16S rDNA克隆文库中,上述7种菌的组成比例分别为55.21%、19.79%、14.58%、3.13%、3.13%、3.13%、1.03%。     

用海棠苗饲养苹果绵蚜的方法

报道了用1年生海棠苗作为寄主植物饲养苹果绵蚜Eriosomalanigerum(Hausmann)的方法,包括寄主植物的选取、栽培管理、接虫方法及试验结果。该方法既能为苹果绵蚜提供长期新鲜的寄主植物,又能使仔蚜很快定殖成活,十分有利于试验的连续进行,且简单经济。     

化学防治对绿化带中红火蚁及本地蚂蚁的影响

研究了饵剂、粉剂和灌巢3种不同施药方法对红火蚁的防治效果及对绿化带本地蚂蚁的影响.结果表明:从活动蚁巢和工蚁减退率两项指标来看,粉剂防治绿化带中红火蚁效果快速稳定,可以推广使用;饵剂防治作用较缓慢,处理35d后达到最好的防治效果;而灌巢虽然能在短期内有效地减少活动蚁巢数量,但对工蚁的防效较差,总体上不如粉剂和饵剂.此外,饵剂和粉剂都能显著降低绿化带本地蚂蚁的种类和数量,灌巢则对本地蚂蚁的影响较小.通过分析施药前后各处理区的蚂蚁类群多样性指数、均匀度指数和优势度指数的变化,可以看出各处理区的蚂蚁类群多样性指数,均匀度指数和优势度指数与CK相比,都呈下降趋势,说明化学防治能有效压制红火蚁的数量,但同时也严重影响着本地蚂蚁.     

大肠杆菌外膜蛋白的分离及其双向电泳图谱的建立

本文利用温度诱导的两相分离萃取技术选择性分离未经机械破碎的大肠杆菌细胞外膜蛋白,研究TritonX.114的浓度及处理时间对提取外膜蛋白的影响.实验结果表明,Triton X-114的使用浓度和作用时间均显著影响外膜蛋白的提取效率.SDS-PAGE结果表明不同Triton X-114的使用浓度和作用时间只是影响了外膜蛋白的提取效率而对外膜蛋白提取的种类没有影响.实验发现8%的Triton X-114处理3小时为最佳分离条件,分离得到的样品可用于双向电泳分析.通过对比实验发现样品裂解液中包含低浓度的Tris是外膜蛋白双向电泳成功的关键因素,CHAPS与ASB-14或NP-40结合使用可显著提高外膜蛋白的溶解能力,缩短聚焦时间,从而优化了大肠杆茵外膜蛋白双向电泳技术体系,建立了其双向电泳图谱.     

新型可透X线骨外固定器的研制

目的治疗近关节骨折、复杂骨折、骨缺损及骨不连等的一种新型可透x线骨外固定器。方法由固定部件、连接杆、万向头、连接杆锁紧螺帽、骨折固定螺钉、固定螺钉锁紧螺帽构成,通过x线能够全方位地观察骨折情况,调整骨外固定器使骨折对位对线。结果可避免因传统金属骨外固定器对术后骨折愈合情况观察,固定安全可靠,特别适用于战时、紧急情况下对骨折的固定,固定不超关节,故可以术后即刻关节功能锻炼。结论固定器设计合理,构思新颖,值得推广应用。     

红河流域的外来入侵植物

红河流域是中国生物多样性最为丰富的地区,植物区系起源古老,生态系统类型复杂多样.本文论述了红河流域外来入侵植物的现状,列举了73种红河流域外来入侵物的种类,对危害比较严重的紫茎泽兰、飞机草、马樱丹、肿柄菊、凤眼莲和空心莲子草6种植物作了具体介绍.对外来入侵植物的控制对策,入侵植物本身的生物学特性的研究、保护生物多样性和退化生态系统的恢复以及路域生态系统管理等几方面作了论述.结果表明,减少人类对生态系统的干扰和破坏,恢复本地植被是防止外来入侵植物入侵的有效途径.