职业献血员中庚型肝炎病毒感染状况的分析

为了解职业献血员中庚型肝炎病毒（HGV）的感染状况,应用ELISA法和RT-PCR法进行检测,在10069名职业献血员中有516例抗-HGV阳性,总感染率为5.12%,其中男性感染率5.79%。女性感染率4.45%,甘肃省感染率4.96%,宁夏区感染率5.70%,青海感染率5.67%以及陕西感染率4.91%,年龄18-25岁的感染率4.48%,26-35岁感染率4.87%;36-45岁感染率6.90%;将抗-HGV阳性作RT-PCR,HBsAg,抗HCV检测,其中HGV-RNA阳性362例,HBsAg阳性25例,抗HCV阳性37例,HBsAg和抗-HCV阳性8例,以上说明,在职业献血员中,HGV的感染与性别,地域及年龄无关,与HBV,HCV有重叠感染现象。     

农村养老院老人感染性标志物的检测

目的 了解雅安地区农村养老院老人感染性标志物检测状况,为农村养老机构传染病的预防、治疗及控制提供参考依据。方法 随机选取雅安地区农村养老院在院老人596例,其中男性539例,女性57例。采集其空腹静脉血,用时间分辨荧光免疫测定法检测乙肝表面抗原（HBsAg）、丙肝抗体（anti-HCV）、梅毒螺旋抗体（anti-TP）、人类免疫缺陷病毒HIV（1+2型）抗体。结果 596例血样中共检出HBsAg阳性22例（男性18例,女性4例）;anti-TP阳性20例（男性17例,女性3例）;HIV（1+2型）阳性3例（男性2例,女性1例）。检测结果表明女性的总感染率高于男性（14.0% vs 6.9%）,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论 雅安地区农村养老院老人存在一定的病原体感染情况,加强养老院老人感染性标志物的检测对有效预防养老院院内感染和护理人员的职业暴露具有重要意义。     

孕康口服液对胚胎着床障碍大鼠的安胎作用

目的：通过建立胚胎着床障碍致流产模型,探讨已上市中成药孕康口服液的安胎作用。方法：将妊娠大鼠分为6组：正常对照组（NC）,模型组（MG）,地屈孕酮组（DT）,孕康口服液低、中、高3个剂量组（YK-L、YK-M、YK-H）,每组11只。自妊娠第1日起,每天灌胃给药,DT组灌胃剂量为3.02 mg/kg,孕康口服液各组灌胃剂量分别为4、6、9 ml/kg,NC组、MG组给予等体积的纯化水,连续10 d。妊娠第3日,除NC组外,其余各组按5 mg/kg体质量颈背部皮下注射米非司酮造成胚胎着床障碍模型。妊娠第10日,各组腹主动脉采血,酶联免疫法测定血清卵泡刺激素（FSH）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素（IL-4）;取连胎子宫观察胚胎着床数目,HE染色观察子宫病理变化。结果：与NC组相比,MG组胚胎着床数目和血清FSH、IL-4水平均显著降低（P<0.05,0.01）,并出现子宫腺上皮增生、腺腔内炎性细胞浸润等病理变化。与MG组相比,YK-M、YK-H组均能显著性升高胚胎着床数目和血清FSH、IL-4水平（P<0.05,0.01）;孕康口服液各剂量组均能明显改善模型大鼠子宫腺上皮增生、腺腔内炎性细胞浸润等病理变化。各组间血清IFN-γ水平无明显差异。结论：孕康口服液可能通过升高胚胎着床障碍大鼠血清性激素FSH和免疫细胞因子IL-4水平,改善子宫内膜病理变化,提高胚胎着床数目,从而发挥安胎作用。     

AccQ·Tag法测定绿豆蛋白酶解液中氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法(AccQ·Tag法)同时测定17种氨基酸,氨基酸浓度在10～100μmol·L-1(胱氨酸浓度在5～50μmol·L-1)时,其峰面积和氨基酸浓度的线性相关系数均在0.99以上,17种氨基酸的加标回收率在92.1%～103.7%之间,用此法测定了绿豆蛋白酶解液氨基酸的含量,取得了满意的结果。     

汉滩病毒包膜糖蛋白糖基化位点突变体重组假病毒的构建及初步鉴定

目的：为进一步研究汉坦病毒包膜糖蛋白的糖基化与病毒的感染性和免疫原性等的关系,构建含有汉滩病毒（HTNV）囊膜糖蛋白（GP）糖基化位点突变体的重组假病毒。方法：利用定点突变的方法,分别突变了HTNV 76-118株的5个N-糖基化位点并克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染293T细胞,构建5株重组假病毒。感染HEK293细胞后,进行RT-PCR鉴定及免疫荧光检测。结果：经测序显示构建的含有N-糖基化位点突变体的5个重组假病毒原序列中的天冬酰胺（N）均被置换为谷氨酰胺（Q）。RT-PCR结果显示5个重组假病毒均有HTNV GP基因的表达。免疫荧光检测5个重组假病毒均可表达HTNV的Gn和Gc蛋白。结论：成功构建了含有HTNV包膜糖蛋白糖基化位点突变体的5个重组假病毒,分别命名为rLV-M1、rLV-M2、rLV-M3、rLV-M4和rLV-M5。本研究为明确N-糖基化对汉坦病毒生物学活性的影响提供了有利的研究工具,并为汉坦病毒疫苗及致病机理的进一步研究打下了一定的基础。     

人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的ELISA及用于肝癌的诊断

从人体胎盘提纯GST-π,制备兔抗GST-π血清,纯化其IgG,并降解成Fab′片断,通过SMCC与HRP交联成Fab′-HRP,用于夹心ELISA以测定GST-π,灵敏度可达11pg,超过国外的放射免疫法。用此法测定正常人血清GST-π为1.06±0.94ng/ml,原发性肝癌血清较正常高20倍以上。阳性率达90％左右。