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将编码扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)的cDNA克隆到酵母整合型质粒pPIC3.5K,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,通过橄榄油MM平板及PCR方法筛选和鉴定重组子。重组子发酵液经SDSPAGE分析、橄榄油检验板鉴定,表明扩展青霉碱性脂肪酶基因在巴斯德毕赤酵母中获得了高效表达。表达蛋白分泌至培养基中,分子量约28kD,与扩展青霉碱性脂肪酶大小一致,占分泌蛋白的95%。橄榄油检验板检验表明该表达蛋白可分解橄榄油,通过优化该表达菌的发酵条件,以橄榄油为底物进行酶活测定,其发酵液酶活可达260 u/mL。 相似文献
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目的探讨改良式体温探头联合心电监护仪在人工气道温度管理中的应用价值。方法选取2017年2~5月我院收治的80例建立人工气道并使用机械通气患者,按随机数字表法分为实验组和对照组各40例,实验组在"Y"管吸入气体端应用改良式体温探头将吸入气体温度导入心电监护仪后行气道温度监控,对照组在"Y"管吸入气体端采用水银式水温计进行气道温度监控,比较护士对气道温度监控的依从性及气道加温湿化不足的情况。结果实验组护士监控吸入气体温度的依从率高于对照组(χ~2=562.65,P0.001)。两组气道加温湿化情况比较差异有统计学意义(χ~2=24.91,P0.001)。结论采用改良式体温探头联合心电监护仪监控气道温度后,护士对气道温度监控依从性明显提高。实现实时监控,并可动态调节报警界限及报警音量,同时通过对气道温度的实时监控及时预测吸入气体存在加温加湿不足的可能性,有利于人工气道的管理。 相似文献
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以绿荧光蛋白基因为报告基因的广宿主启动子探针载体的构建和应用 总被引:4,自引:0,他引:4
将以绿荧光蛋白基因(gfp)的 cDNA为模板,用人工合成引物经PCR扩增获得的09kbDNA片段克隆到表达载体pET11C上构建成gfp表达载体pHN115。从pHN115上切下的不含启动子,但保留了SD序列的gfp基因经克隆载体SK(+)和pIJ2925亚克隆后再克隆到广谱稳定性质粒pTR102上构建成广谱、稳定、可视的启动子探针载体pHN127。并用它从费氏中华根瘤菌HN01的总DNA中成功地钓出组成型和诱导型表达的启动子。 相似文献
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The binding condition between flavin mononucleotide (FMN) and protein moiety of glycollate oxidase (GO) was investigated in 11 species of higher plants from 7 families. A loose binding of FMN with GO was universally observed in all the plants. According to this character, a new efficient but mild method was established for preparation of FMN-free GO, which could produce 87.5% recovery of activity . FMN-free GO could be reactivated by adding FMN. For half reactivation 8×10 mol/L FMN was needed, and more than 5×10 mol/L for 100%. The result indicates that there exists a reversible dissociation balance between FMN and protein moiety of GO. Therefore, the concentration of FMN may act as a factor to regulate GO activity in higher plants. 相似文献
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山西关帝山神尾沟植物群落多样性研究 总被引:26,自引:6,他引:20
TWINSPA将山西关帝山神尾沟89个群落样方划分为23组,即23个群系。DCA结果表明,第一轴、第二轴及排序图对角线分别反映各植物群落所在环境的温度、温度和海拔梯度变化。DCA二维排序图分布格局表明,活土最度、枯枝落叶层厚度与海拔之间有极明显的正相关性。不同中样地指数散点图表明:群落多样笥和均匀度指数随海同呈下降趋势,丰富度指数基本保护不变。 相似文献
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普查了 7个科 11种植物的乙醇酸氧化酶 (GO) ,发现其酶蛋白与黄素单核苷酸 (FMN)的结合均是松弛的 ;并据此特征找到了一种温和的制备完全脱FMNGO的新方法 ,酶液总活性回收可达 87.5 % ;外加FMN可使脱辅因子GO不同程度地恢复活性 ,恢复 5 0 %活性所需FMN的浓度为 8× 10 -7mol/L ,而当浓度大于 5× 10 -6mol/L时其复活作用达到 10 0 % ,表明两者间存在一个可逆的解离平衡。推测植物体内的FMN浓度可能是乙醇酸氧化酶活性的一个调节因子。 相似文献
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氮沉降会影响细根的形态功能性状,进而影响细根对养分的吸收,导致陆地生态系统养分循环发生变化.为了解氮沉降对细根形态功能性状的影响,利用根袋法进行原位试验,研究中亚热带常绿阔叶林外生菌根树种罗浮栲和米槠细根形态对短期氮添加的可塑性响应.结果表明: 低序级根(1~3序级)的比根长和比表面积对氮添加的可塑性响应高于高序级根(4序级),细根组织密度对氮添加的可塑性响应从1序级到4序级逐渐加强,而各序级细根直径对氮添加则无显著的可塑性响应;低序级细根比根长、比表面积的可塑性响应与高序级细根组织密度的可塑性响应之间存在一定的协同变化.罗浮栲和米槠细根的比根长、比表面积、组织密度对氮添加表现出相反方向的可塑性响应,表明施氮后不同外生菌根树种采取了不同的养分觅食策略:施氮后罗浮栲在养分获取上采取的是增加比根长、比表面积和根长增殖速率的资源快速获取策略,而米槠则采取了增大细根组织密度的相对保守的资源获取策略. 相似文献
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全球气候变暖与氮沉降是两个同时存在的全球变化主要因素,但目前关于二者的研究多以单因子为主。细根碳(C)、氮(N)、磷(P)浓度影响着森林生态系统生产力与碳汇,然而目前关于气候变暖与N沉降对细根化学组成元素的影响尚不清楚。本研究在福建三明森林生态系统与全球变化研究站陈大观测点开展增温(W,+4℃)与N添加(N,+40 kg N·hm^-2·a^-1)双因子试验,探讨增温与N添加对杉木细根C、N、P化学计量学的影响。结果表明:(1)增温提高了春季细根N浓度,对细根C与P浓度则无显著影响;增温降低了春季细根C∶N,对细根N∶P无显著影响。(2)N添加提高了细根C浓度与春季细根N浓度,对细根P浓度则无显著影响;N添加降低了春季细根C∶N,提高了春季细根N∶P。(3)增温与N添加的交互作用对春季1~2 mm径级细根C浓度有显著影响,但对0~1 mm径级细根C浓度无显著影响,并且增温与N添加的交互作用对细根N与P浓度均无显著影响。本研究表明,增温与N添加会促进亚热带森林生态系统养分循环,N添加并未改变亚热带杉木人工林N限制现状;增温与N添加的交互作用对细根C、N、P元素的影响并不一致,受苗木C投资权衡与生长稀释效应所调节。 相似文献
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目的比较主动脉弓缩窄和腹主动脉缩窄复制心力衰竭衰模型的异同,探索快速有效的心衰动物模型。方法将大鼠分为主动脉缩窄手术组,腹主动脉缩窄手术组和对照组(C组)。主动脉缩窄手术组实施颈部手术,在主动脉弓处缩窄动脉直径;腹主动脉缩窄手术组实施腹部手术,在腹主动脉处缩窄动脉直径;C组实施颈部手术但不实施动脉缩窄手术。各组实验动物均正常喂养4~6周后进行心脏的超声检测和心脏血流动力学检测。结果心脏超声结果显示:主动脉弓缩窄手术组左心室壁厚度和左心室腔内径在术后4周明显高于正常组;而腹主动脉缩窄手术组左心室壁厚度和左心室腔内径在术后4周较正常组没有明显增加。术后6周,腹主动脉缩窄手术组左心室壁厚度和左心室腔内径都明显增加,而主动脉弓缩窄手术组左心室壁厚度没有明显改变,左心室腔内经明显增加。血流动力学指标显示:主动脉弓缩窄手术组LVESP、LVEDP、LVDP、±dp/dtmax都明显低于腹主动脉缩窄手术组。结论主动脉弓缩窄手术复制心肌肥大导致心功能衰竭模型效果明显快于腹主动脉缩窄手术复制的心肌肥大导致心功能衰竭模型。 相似文献