肺炎支原体感染鼠T淋巴细胞活化的动态变化

动态观察肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)感染鼠T淋巴细胞的数量及其亚群的变化,为正确评价T淋巴细胞在Mp感染中的作用提供理论依据。Mp滴鼻感染小鼠,在感染后不同时间点采集标本,流式细胞术检测感染鼠外周血中T淋巴细胞数量变化,ELISA测定脾细胞上清中TGF-β1、IL-10含量。结果表明,Mp感染不同时间点外周血中CD4+T淋巴细胞数量变化不明显或呈下降趋势。CD4+/CD8+比值下降。初次感染和再次感染的第3天、第7天,TGF-β1、IL-10表达水平升高。肺炎支原体感染对CD4+T淋巴细胞有一定抑制作用,外周血TGF-β1、IL-10的表达与脾细胞中CD4+T淋巴细胞数量变化成反比。提示TGF-β1可能参与了对Th1细胞的负调控作用。     

放线菌次生代谢产物合成基因组研究

简述放线菌全基因组研究概况,次生代谢产物合成基因组研究涉及的问题;重点介绍聚酮类化合物合成基因组的结构和功能;如何利用基因组筛选程序,筛选具有生物活性次生代谢产物合成基因簇的产生菌,作为新药发现的一种手段。     

产抑菌物质乳杆菌的筛选及性质的研究

从健康成年人的口腔中筛选出一株产抑菌物质的菌株HO-69,经API系统鉴定为植物乳杆菌。排除酸性末端产物与过氧化氢的影响后,HO-69的发酵上清液对变形链球菌等革兰氏阳性菌、大肠杆菌等革兰氏阴性菌具有抑制作用。抑菌物质经初步提取,推测其分子量在10kDa以下,胰蛋白酶处理后抑菌活性部分损失,100℃水浴加热20min依然保持较高的抑菌活力,显示活性的pH范围是3.0~7.0,活力随pH的降低而增强。     

重组真核质粒pCMV4-rZP3′构建及在小鼠体内的表达

选取兔透明带ZPC基因序列的部分片段（编码263－415位的氨基酸,rZP3′）作为靶抗原,构建兔ZP3′基因疫苗,研究其阻断受精的效果。提取成熟雌兔卵巢的总RNA,RT－PCR克隆兔透明带ZPC的cDNA,直接插入到克隆质粒PCRR2．1中,构建克隆质粒PCRR2．1－rZP3′,再将靶片段用HindⅢ、X-bal双酶切从克隆质粒PCRR2．1－rZP3′切下,1％的低熔点琼脂糖电泳回收,亚克隆到真核表达质粒pCMV4中,构建真核表达质粒pCMV4-rZP3′。将质粒直接注射到活体小鼠的大腿内侧肌肉中,在mRNA水平上观察到质粒能在肌肉细胞中正确表达,并且其表达可以维持12周以上。     

蒲公英糖蛋白体内外抗氧化作用研究

为了探讨蒲公英糖蛋白(TMGP)体内外抗氧化活性,采用H2O2、Fe2+、DPPH.和总抗氧化能力反应体系,检测蒲公英糖蛋白体外抗氧化活性,并与VC进行比较;同时建立D-半乳糖所致衰老小鼠模型,测定并比较TMGP组与模型组的血清、肝脏和脑内MDA含量和SOD、CAT、GSH-Px活性。结果显示:(1)随着TMGP浓度增加,其Fe2+、H2O2和DPPH.清除率均有所增加,当TMGP浓度为1.72mg/mL时,对H2O2、Fe2+清除率分别达到76.8%和55%,接近VC水平;当TMGP浓度为1.5mg/mL时,对DPPH.的清除率达到77%,也与VC水平相当,说明TMGP具有一定的体外总体抗氧化能力。(2)将TMGP按低、中、高剂量分别给小白鼠灌胃,可显著增强小鼠体内血清、肝脏、脑组织中SOD、CAT、GSH-Px活性,降低MDA含量,从而提高衰老小白鼠体内的抗氧化能力。研究表明,TMGP具有明显的体内外抗氧化作用。     

植物内生菌资源

植物内生菌是一类重要的微生物资源,近年来成为微生物资源研究的热点之一。对内生菌的多样性和开发利用的研究进展以及值得研究的问题等方面进行评述。     

贪铜杆菌Cupriavidus sp. SHE细胞上清液合成纳米硒

近年来,纳米硒凭借其良好的导电、光热以及抗癌等特性,在纳米技术、生物医学以及环境修复等诸多领域得到广泛应用。实验选择前期筛选得到的贪铜杆菌Cupriavidus sp. SHE,文中探究了该菌株的细胞上清液、全细胞以及胞内提取物合成纳米硒的能力,并对细胞上清液合成的纳米硒进行形貌表征与官能团分析,最后选取革兰氏阳性菌假单胞菌Pseudomonas sp. PI1和革兰氏阴性菌大肠杆菌Escherichia coli BL21进行抗菌实验。结果表明,菌株Cupriavidussp.SHE的细胞上清液、全细胞以及胞内提取物均具有合成纳米硒的能力。对于菌株Cupriavidus sp. SHE细胞上清液而言,在该实验中,研究范围内其合成纳米硒的最佳条件是SeO2浓度为5 mmol/L,pH为7。透射电子显微镜结果表明合成的纳米硒颗粒主要为球形,平均直径为196nm。X射线衍射结果表明合成的纳米硒晶体类型为六方形结构。傅立叶转换红外光谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明纳米硒表面有小分子蛋白结合,可能参与了纳米硒的合成和稳定过程。此外,抗菌实验表明菌株Cupriavidus sp. SHE细胞上清液合成的纳米硒颗粒对菌株E.coli BL21和Pseudomonas sp. PI1均无明显的抗菌活性。综上,该研究表明菌株Cupriavidus sp.SHE在细胞上清液中产生的蛋白类物质在其合成纳米硒的过程中发挥了重要作用,合成的生物纳米硒颗粒无毒且生物相容性良好,未来在生物医学等领域具有较好的应用潜力。     

妊娠兔胎盘细胞凋亡及其相关基因Bcl-2和Bax表达的动态变化

妊娠兔胎盘细胞凋亡及其相关基因Bcl-2和Bax表达的动态变化@刘喆$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @杨颖$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @彭景楩$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080     

妊娠大鼠子宫和胎盘中 TGF-β1 的表达及 IFNγ 对其表达的影响

采用半定量 RT-PCR、蛋白质印迹和免疫组化等方法,对大鼠妊娠过程中子宫和胎盘转化生长因子β1(TGF-β1) 的动态表达和表达定位,及体内注射超生理剂量的γ干扰素 (interferen-gamma, IFNγ) 后 TGF-β1 的表达进行检测,探讨了妊娠子宫和胎盘中 TGF-β1 的表达规律、定位及与 IFNγ的关系 . 正常妊娠各个时期大鼠子宫和胎盘中均能检测到 TGF-β1 mRNA 和蛋白质的表达 . 半定量 RT-PCR 结果表明：妊娠早期 (D1~D9) 子宫 TGF-β1 mRNA 的表达呈递增趋势,胚泡植入前 (D4) ,子宫 TGF-β1 mRNA 的表达较低,胚泡植入早期 (D6) TGF-β1 mRNA 的表达显著升高,植入后期 (D9) TGF-β1 mRNA 的表达达高峰,妊娠中期 (D15) 和妊娠晚期 (D19) TGF-β1 mRNA 的表达逐渐降低;妊娠早 (D9) 、中 (D15) 、晚期 (D19) 胎盘中 TGF-β1 mRNA 的表达呈时效递增, D15 胎盘中 TGF-β1 mRNA 的表达高于 D9 (P<0.01) , D19 胎盘中 TGF-β1 mRNA 的表达高于 D15 (P<0.01). 免疫组化结果显示,妊娠早期 TGF-β1 主要在子宫蜕膜中表达,中晚期主要在滋养层表达 . 生殖道肌肉注射超生理剂量的 IFNγ能下调 TGF-β1 的表达,且呈一定的剂量依赖关系 . 提示：在妊娠不同时期子宫和胎盘中 TGF-β1 的表达呈显著的时空动态变化, IFNγ酌对 TGF-β1 mRNA 的表达有调节作用 .     

江浙沪地区汉族人群HLA单体型研究

利用HLA血清学和分子生物学分型方法对江浙沪地区汉族人群166对夫妻进行HLA-A,B和DR B1单体型调查,并分析HLA单体型的分布特征.结果显示,江浙沪地区汉族人群HLA-A2,A11,A24,B13,B46,B60,DRB104,DRB108,DRB109,DRB112和DRB115有较高的频率分布(＞10%).研究中发现HLA-A-B,B-DRB1单体型分别有128条和182条,占理论单体型总数的19.28%(128/664)和27.41%(182/664).其中有18种A-B单体型频率大于0.5%(连锁不平衡参数△＞0),有23种B-DRB1单体型频率大于0.5%(△＞0).A-B-DRB1单体型有351条,占理论单体型总数的52.86%(351/664),其中8种单体型频率大于0.5%(△＞0),A 30-B13-DRB107(4.22 %),A2-B46-DRB109(3.77%),A33-B58-DRB117(3.01%),A33-B58-DRB113.1(1.81%)和A11-B75-DRB112(1.51%)是最常见单体型.江浙沪地区汉族人群HLA单体型有其自身分布特点,遗传特征介于南北汉族之间,在东亚人群中中国汉族群体HLA多态性较为丰富.