miR-135b-5p抑制脓毒症引起的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制*

目的: 探究miR-135b-5p在小鼠脓毒症(sepsis)引起的急性肺损伤(ALI)模型中的表达水平及其对小鼠肺部炎症反应和细胞焦亡的影响。方法: 将C57BL/6小鼠随机分为6组,每组8只,通过盲肠结扎穿刺法(CLP)手术构建CLP诱导的脓毒症小鼠模型:腹腔注射0.1 mg/kg的巴比妥麻醉,腹部纵向切开暴露盲肠,结扎盲肠并用注射器针头进行穿孔,挤出部分肠道内容物后缝合伤口。假手术组(Sham组)开腹后不做任何处理缝合伤口,无CLP手术处理。治疗组分为CLP+NC mimic组,CLP+miR-135b-5p mimic组,CLP+NC mimic+empty vector组,CLP+消皮素D (GSDMD)组,CLP+miR-135b-5p mimic+GSDMD组。治疗组小鼠在CLP手术前一周皮下注射200 μl溶解于生理盐水的NC mimic(200 nmol/L),miR-135b-5p mimic(200 nmol/L),empty vector(100 nmol/L),GSDMD vector(100 nmol/L),每天注射1次,连续一周。术后24 h采用二氧化碳窒息法实施安乐死。采用qRT-PCR检测小鼠肺组织样本中miR-135b-5p和GSDMD mRNA的表达水平;苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠肺组织形态和损伤状态;采用5 ml生理盐水冲洗小鼠右肺3次,每次持续约3~5 min,收集肺泡灌洗液(BALF),酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中GSDMD、白介素1β(IL-1β)和白介素18(IL-18)的表达水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠肺组织内含NLR家族PYRIN域蛋白3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase 1)以及切割后的N-端GSDMD端蛋白结构域(cleaved-GSDMD-N)的表达水平。双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-135b-5p与GSDMD的靶向结合关系。结果: 与对照组相比,CLP组小鼠肺组织中有大量的炎症细胞浸润,肺泡损伤,细胞间质水肿及肺泡塌陷等病理特征,小鼠肺组织内细胞焦亡相关蛋白(NLRP3,caspase-1和GSDMD)的表达水平明显增加(P<0.01),但miR-135b-5p的表达水平明显下调(P<0.01);与CLP组相比,超表达miR-135b-5p能够明显抑制CLP诱导的小鼠肺组织内细胞焦亡(P<0.01),靶向抑制GSDMD的表达水平(P<0.01);超表达GSDMD能够逆转超表达miR-135b-5p对肺组织细胞焦亡的抑制作用(P<0.01),超表达miR-135b-5p能够通过靶向GSDMD抑制小鼠BALF中IL-1β及IL-18的表达水平(P<0.01)。结论: miR-135b-5p靶向下调GSDMD抑制细胞焦亡,改善脓毒症引起的ALI,为脓毒症诱导的ALI治疗提供了潜在的治疗靶点和理论依据。     

水分胁迫下小麦类脱水素基因表达的半定量RT-PCR分析

以‘郑引1号’小麦为材料,经水分胁迫后进行RT-PCR扩增,结果在胁迫条件下获得500bp的脱水素基因(wzy1-1)。利用半定量RT-PCR方法,分析‘陕合6号’和‘郑引1号’小麦在正常供水条件下及PEG6000胁迫后18、24和42h,以及复水6和12h时wzy1-1在叶片中的表达。结果表明:2个小麦品种中wzy1-1在水分胁迫后18h均有表达,至胁迫24、48h时表达量较18h均有所增多;复水6h后该基因表达迅速降低,至复水后12h表达消失。且该基因在‘陕合6号’(抗旱性较强)叶片中表达量较‘郑引1号’(抗旱性较弱)高,表明该基因的表达与小麦的抗旱性密切相关。     

IL-1β对不同妊娠时期大鼠子宫与胎盘 TGF-β1表达的影响

为探讨妊娠过程中白介素-1β(IL-1β)对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,以妊娠Spreqne-Dawley大鼠为模型,采用宫角注射、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹方法。检测了妊娠不同时期大鼠子宫和胎盘中IL-1β对TGF-β1 mRNA水平及蛋白水平表达变化的影响。结果显示,植入期和妊娠晚期IL-1β能降低子宫TGF-β1的表达水平,植入后期和妊娠中期能提高TGF-β1的表达水平,对植入前期TGF-β1的表达无显著性影响;IL-1β能抑制妊娠早期胎盘TGF-β1的表达,妊娠晚期能促进其表达。结果提示,在妊娠过程中,IL-1β能够调节TGF-β1的表达,并且这种作用具有阶段特异性和组织特异性。     

菜心下胚轴气孔的特征及其动态变化

以"油青60天"和"四九-19"2个菜心品种为材料,研究了菜心下胚轴气孔特征、气孔密度和气孔指数在2年内随不同发育时间的变化情况.结果显示:菜心种子萌发后第3天,下胚轴表皮上已有椭圆形或狭长形的气孔分布;菜心下胚轴普通表皮细胞为长条形,排列紧密."油青60天"和"四九-19"下胚轴的平均气孔密度均先下降后上升,分别在第...     

健康与龋病口腔唾液中乳杆菌的发酵类群与表面性质

目的 研究口腔健康的成年人和龋病患者唾液中乳杆菌的发酵类群和表面性质。方法 糖酸以口腔健康的成年人和龋病患者为对象,取其早餐后2 h的无刺激全唾液分离乳杆菌,检验其对葡萄糖和葡萄糖酸钠发酵的情况;应用MATH（Microbiol Adhesion to Hydrocarbons）法测定菌体表面疏水性和电荷。结果 口腔健康的成年人与龋病患者唾液中乳杆菌各发酵类群的比例不同,前者表面疏水性和电荷比较高,后者比较低。结论 口腔健康的成年人和龋病患者唾液中乳杆菌的组成不同,表面性质也不同,特定种类的乳杆菌与龋病的发展相关。     

人重组γ-干扰素对兔妊娠的影响

ao et al. (1999) reported that human recombinet interferon gamma (hrIFN γ) exerted a certain anti contraceptive effect on the pregnant rabbit. In order to investigate the possible mechanisms by which interferon gamma (IFN γ) exerts its deleterious effect on pregnancy, 12 New Zealand breed rabbits were used as an animal model. One day (Day 1) after the females were mated with male animals, They were randomly divided into 3 groups. There were control, hrIFN γ 50 000 IU and hrIFN γ 100 000 IU groups. Saline and hrIFN γ of different doses were administered respectively to control and experimental rabbits via vaginal muscular injection on Day 6 and were killed on Day 12 of pregnancy. The fetus and placenta were weighed. The blood was collected before injection and at various intervals(6, 12, 24, 48 and 96 h) after injection. The concentration of serum progesterone were measured by radioimmunoassay. The apoptosis in placenta were examined by DNA fragmentation analysis. The results were as folloows: 1) In control, 50 000 IU and 100 000 IU hrIFN γ groups, progesterone level in serum were 26 20±0 74 ng/ml,17 81±0 55 ng/ml and 10 97±0 84 ng/ml respectively at 96 h after injection. In contrast with control group, progesterone production dropped significantly in rabbits treated with hrIFN γ, especially 100 000 IU hrIFN γ. 2) Apoptotic fragmentation of DNA(180 bp units) in placenta were detected both in control and experimental groups. The scan density of degraded DNA fragmentation in experimental group was higher than that in control, which suggested that apoptosis in placenta was further induced by hrIFN γ, especially by high dose hrIFN γ. In addition, the weight of placenta in rabbits treated with hrIFN γ reduced significantly as compared with that in control group( P <0 01). We suggest that hrIFN γ inhibits the secretion of progesterone, as a result of inducing apoptosis in placenta.     

乳菇属真菌化学成分及其生物活性研究进展

对近12年来乳菇属真菌的化学成分及其生物活性方面的研究进行了综合分析和论述.该属真菌含有倍半萜、甾醇、含氮化合物等多种结构类型的化合物,具有明显的抗癌和抗病毒等生物活性.但目前对该属真菌活性成分和其作用机制研究还不够深入,食用乳菇的安全性也缺乏系统评价.因此,进一步明确乳菇属真菌子实体或发酵产物中的活性成分,并阐明其构效关系和作用机制,将为食用菌营养保健品的开发提供理论依据,同时也为新天然药物或农药先导化合物的发现奠定基础.     

植物内生放线菌的分离方法*

植物内生放线菌是一类大有开发潜力的微生物资源。目前使用的分离条件和技术尚不完善,容易被外源菌和内生真菌、细菌污染,因此内生放线菌尤其是稀有内生放线菌的选择性分离技术至少是今后一段时间研究的重点。介绍了植物内生放线菌选择性分离方法并提出值得研究的问题。     

农户对气候变化的感知与生计适应——基于中部与东部村庄的调查对比

相对于城市居民,气候变化对农户的影响更为直接与强烈,而农户对气候变化的感知是其采取适应策略的重要前提。目前,相关领域的宏观研究成果比较丰富,以家庭为单位的典型调查分析相对缺乏,基于不同地域农户对比的微观实证研究则更未见于报道。选择中部内陆河南省与东部沿海福建省典型农区的一个村庄作为研究样地,采用参与式农村评估法(Participatory Rural Appraisal,PRA),基于中部和东部村庄144份与153份有效问卷数据,从家庭尺度探讨内陆与沿海农户对气候变化及其影响的感知与生计适应的结构性差异。结果显示:农户对气温与降水的变化感知直接且强烈,能较一致地回顾气候变暖的强度与时期,中部农户对降水变化的感知度较强;接近一半的农户将气候变暖归因于人类因素,至于人类活动内容(如工业排放、汽车增加、个人与家庭、农业污染、农村建设等)对气候变化变暖影响的认知,中部与东部农户则存在显著性差异;农户对气候变化影响的感知不如预期深刻;农户对气候变化的生计适应趋于多样化,包括外出打工、改变种植方式、修建基础设施与多样化经营等。