磷离子对BM-hMSCs增殖及成骨分化的影响

目的:探讨磷离子对人骨髓来源的间充质干细胞(Human bone marrow mesenchymal stem cells,BM-h MSCs)增殖及成骨分化的影响。方法:从Scien Cell实验室购买的BM-hMSCs分别在无血清生长培养基(对照组)和添加4mmol(4P组)、8mmol(8P组)磷离子的无血清生长培养基中培养21天,通过CCK8比色法评估细胞的增殖情况;RT-PCR检测成骨分化标记性基因胶原蛋白Ⅰ、骨钙素、碱性磷酸酶的表达水平;茜素红染色检测BM-hMSCs成骨分化产生的矿化结节。结果:在培养4、7、14天时,4P和8P组中BM-hMSCs的增殖都明显高于对照组,且8P组中BM-h MSCs的增殖高于4P组;培养21天时,4P和8P组中BM-hMSCs的增殖明显低于对照组。与对照组相比,在培养7天时,4P和8P组OC的表达下调,而14、21天时,OC的表达上调。4P和8P组中ALP的表达水平与对照组无明显差异。7天时,4P、8P组ColⅠ的表达水平均明显高与对照组;14天时,8P组ColⅠ的表达水平与对照组表达无明显差异;21天时,4P、8P组中ColⅠ的表达水平都均与对照组表达无明显差异。培养21天时,4P、8P组矿化结节的形成明显增加。结论:磷离子在早期可以促进BM-hMSCs的增殖,晚期诱导其成骨分化。     

灰色大角间座壳菌(稻瘟病菌)蛋白激酶编码基因中SSR变异及其对蛋白结构的潜在影响

病原菌可以利用多种方式激活或者抑制蛋白激酶信号通路来增强其自身侵染力,在病原物与植物互作初期的信号识别和转导中蛋白激酶扮演着重要的角色。已有研究结果表明灰色大角间座壳菌(稻瘟病菌)蛋白激酶基因中含有丰富的SSR。作者通过对灰色大角间座壳菌(稻瘟病菌)基因组中的89个蛋白激酶基因的外显子区、内含子区、5′-UTR和3′-UTR区中的SSR进行了查找和分析,并对编码区中SSR的扩张或收缩对蛋白结构的影响进行了预测。结果表明,SSR在基因的调控区和编码区中的分布是不均一的,且这些基因的外显子区、内含子区、5′-UTR和3′-UTR区中SSR的组成和分布也均不相同;基因的编码区中三碱基和六碱基SSR相对较多,且SSR基序大都表现为GC含量较高,编码的亲水性氨基酸出现的频率也远远高于疏水性氨基酸。通过病菌群体中变异幅度的检测表明,几乎所有的SSR序列都存在多态性。根据灰色大角间座壳菌(稻瘟病菌)自然群体中SSR的变化幅度,对SSR的扩张或收缩对蛋白二级结构的影响进行预测,发现SSR的扩张或收缩都可能对蛋白的结构产生影响。这暗示着SSR的变异在致病相关基因的变异中可能起着十分重要的作用。     

美国医学院校组织学教学的研究与思考

现代医学教育无论在课程设置还是教育理念和方法上中国与西方发达国家之间都存在着很多差异.选择重要的医学基础课程组织学作为切入点,深入探讨美国医学院校在基础课程教学中的特点和优势,以期为我国医学基础教育尤其是组织学教学改革提供参考.     

少突胶质前体细胞移植对新生儿缺氧缺血性脑病炎性反应的影响

目的研究少突胶质细胞-Ⅱ型-星形胶质祖细胞(oligodendrocyte-type II astrocyte progenitor,O2A)移植对新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)炎性反应的影响,探讨O2A细胞移植对HIE的修复机制。方法采用C57小鼠制成HIE模型。①对照组:即假手术组,尾静脉注入生理盐水2 mL;②HIE非移植组:于成模后48h行尾静脉注入生理盐水2 mL,7、14、28 d脱颈处死动物,甲醛灌注后分离全脑组织、甘油梯度脱水后置冰冻切片机上切20μm脑片,行F4/80及BrdU免疫荧光染色;③HIE移植组:将提取、分离并PKH-26荧光染色的O2A细胞于HIE成模后48 h行尾静脉注入,7、14、28 d脱颈处死动物,甲醛灌注后分离全脑组织、甘油梯度脱水后置冰冻切片机上切20μm脑片,行F4/80,BrdU及DAPI免疫荧光染色。结果 O2A细胞移植后7、14、28 d在HIE小鼠脑内均未见PKH-26阳性的O2A细胞存留;而移植组侧脑室膜下区的内源性神经干细胞较对照组明显增殖旺盛。HIE损伤后在海马及丘脑内可见较多F4/80阳性的小胶质细胞,以第14天为著;O2A细胞移植后上述F4/80阳性的小胶质细胞明显减少。结论细胞移植激活和促进HIE小鼠脑内源性神经干细胞增殖;O2A细胞移植对HIE脑组织的炎性损伤具有抑制作用。提示O2A细胞移植具有促进HIE病变修复、阻止HIE的病情进展的作用。     

颗粒蛋白前体通过抑制IL-6表达减轻哮喘气道炎症

目的: 探究颗粒蛋白前体(PGRN)在过敏性哮喘中的作用及机制。方法: 分别在野生鼠和IL-6 缺陷鼠中设置对照组和哮喘模型组,每组8只。模型组中,在第0日和第7日致敏小鼠(腹腔注射OVA 100 μg),从第14日起连续激发8 d(5％OVA雾化吸入,30 min/d,每日1次),末次激发24 h后取标本;对照组用PBS代替OVA做相同处理。采集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞计数和分类计数;HE染色观察肺组织病理情况;Q-PCR及ELISA检测小鼠肺匀浆、血清和BALF中细胞因子水平。用IL-13刺激A549或BEAS-2B细胞建立体外哮喘炎症模型,每组3个复孔,共4组:PBS处理组、IL-13处理组、IL-13与重组人PGRN蛋白(rhPGRN)共同处理组及p38磷酸化抑制剂(SB203508)处理组。0 min~48 h后收集细胞及上清,用Q-PCR及ELISA检测PGRN和IL-6的表达;Western blot检测p38的磷酸化。结果: 与对照组相比,哮喘组小鼠肺匀浆和BALF中PGRN均显著降低(P＜ 0.01),血清PGRN有降低的趋势,然而哮喘小鼠BALF中IL-6显著升高(P＜0.05)。与野生鼠哮喘组相比,IL-6缺陷鼠哮喘组BALF中白细胞总数降低(P＜0.05),中性粒细胞数降低(P＜0.05),PGRN显著升高(P＜0.05),肺部病理损伤也减轻。体外实验中,IL-13处理组与PBS处理组相比,PGRN显著降低(P＜0.05),IL-6显著增高(P＜ 0.05),p38的磷酸化增加;p38抑制剂处理组比未处理组中IL-6水平降低(P＜0.05)。IL-13与rhPGRN共同处理组的IL-6显著低于IL-13处理组(P＜0.05),p38的磷酸化降低(P＜0.05)。结论: PGRN通过抑制p38磷酸化降低IL-6水平从而减轻哮喘小鼠气道炎症。     

亚热带同质园11个树种新老叶非结构性碳水化合物含量比较

叶片中非结构性碳水化合物(NSC)不仅是植物维持代谢活动的重要物质基础, 也随凋落物归还土壤并为土壤微生物提供碳源, 对凋落物分解和土壤有机质形成具有重要意义。该研究比较了同质园中11个亚热带代表性树种新鲜叶与凋落叶NSC (可溶性糖、淀粉)含量。结果表明, 所有树种新鲜叶NSC含量均显著高于凋落叶, 新鲜叶中NSC含量为68.7-126.3 mg∙g^-1, 而凋落叶中NSC含量为31.4-79.5 mg∙g^-1。同时, 可溶性糖含量在新鲜叶和凋落叶中的变化幅度均远大于淀粉: 可溶性糖在新鲜叶中的平均含量是凋落叶的3.3倍; 而淀粉在新鲜叶中的平均含量仅为凋落叶的1.2倍。另外, 对不同功能类群的比较发现, 常绿阔叶树种与落叶阔叶树种NSC含量差异并不显著, 而针叶树种NSC含量明显低于阔叶树种。具体表现为: 在新鲜叶中, 常绿阔叶、落叶阔叶树种NSC含量平均为99.7和96.8 mg∙g^-1, 而常绿针叶树种平均为75.4 mg∙g^-1; 在凋落叶中, 常绿阔叶、落叶阔叶树种NSC含量平均为47.2和50.7 mg∙g^-1, 而常绿针叶树种平均为33.3 mg∙g^-1。这些结果表明, NSC作为林木碳代谢组分, 在叶片衰老前可能向新鲜叶转移, 反映了林木叶片碳存储策略。然而, 不管是新鲜叶还是凋落叶, 杉木(Cunninghamia lanceolata)、马尾松(Pinus massoniana)等针叶树种叶片NSC含量显著低于阔叶树种, 这可能降低这些针叶树种凋落叶初始基质质量。     

复方甘草酸苷片联合米诺地尔酊局部治疗斑秃的疗效及其对外周血IFN-γ、IL-10水平的影响

目的：探讨复方甘草酸苷片联合米诺地尔酊局部治疗斑秃的疗效及其对外周血IFN-γ、IL．10水平的影响。方法：选取斑秃患者120例,随机分为观察组与对照组,每组各60例。对照组口服灵丹片,于皮损处外涂米诺地尔酊;观察组在此基础上,再给予复方甘草酸苷片;两组疗程均为3个月,治疗前后观察SALT评分、血清IFN-γ和IL-10水平,评价临床疗效,记录不良反应。结果：治疗后,观察组与对照组总有效率分别为91．67％、71．67％（P〈0．05）,SALT评分均不同程度的降低,且观察组SALT评分低于对照组（P〈0．05）;观察组血清IFN-γ水平降低,IL-10升高（P〈0．05）,且与对照组相应指标比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）。观察组与对照组不良反应发生率分别为1．67％、3．33％（P〉0．05）。结论：复方甘草酸苷片联合米诺地尔酊局部治疗斑秃具有较高的临床总有效率,改善了斑秃的皮损状况,调节Th1／Th2细胞因子趋于平衡,且具有较高的安全性,对斑秃的临床治疗具有一定的指导借鉴意义,值得临床推广应用。     

结节性甲状腺肿合并甲状腺微小乳头状癌79例的临床分析

目的:探讨结节性甲状腺肿合并甲状腺微小乳头状癌(papillary thyroid microcarcinoma,PTMC)的临床特征及诊治方法.方法:回顾性分析79例结节性甲状腺肿合并PTMC病例的临床资料.结果:56例术前B超检查考虑PTMC可能,64例经术中冰冻病理诊断,15例经术后石蜡切片证实.55例行单侧腺叶+峡部切除,清扫同侧中央区淋巴结;全甲状腺切除9例,清扫双侧中央区淋巴结.18例单侧中央区淋巴结转移(22.8％),术后并发暂时性喉返神经麻痹5例,暂时性甲状旁腺功能减退6例,并发症发生率13.9％.结论:结节性甲状腺肿为临床常见病,术前B超检查、术中冰冻病检有利于提高伴发PTMC的诊断率,PTMC中央区淋巴结转移率高,预防性清扫中央区淋巴结是必要的.     

内蒙古荒漠沙柳AM真菌物种多样性

分别于2009年5月、8月和10月在内蒙古黑城子、正蓝旗和元上都3个样地采集沙柳(Salix psammophila)根围0-50 cm土层土样,研究了AM真菌群落组成及其生态分布特点.在分离的4属37种AM真菌中,球囊霉属(Glomus)23种,无梗囊霉属(Acaulospora)10种,这两属是3样地共同优势属;盾巨孢囊霉属(Scutellospora)3种,仅分布在黑城子和正蓝旗样地;巨孢囊霉属(Gigaspora)1种,仪分布在正蓝旗样地;网状球囊霉(G.reticulatum)是3样地共同优势种.AM真菌种丰度、均匀度指数、Shannon多样性指数、Simpson多样性指数大小依次是正蓝旗>黑城子>元上都;元上都样地的AM真菌组成与其他样地差异显著;8月和10月的AM真菌种丰度、Shannon多样性指数显著高于5月.随土壤碱解N含量提高,AM真菌种丰度、均匀度指数、物种多样性指数先升后降.结果提示,在评估荒漠环境沙柳和AM真菌共生关系时,AM真菌生态分布和丰富度是十分有用的指标.