小鼠胸腺巨噬细胞的免疫组织化学研究

目的研究小鼠胸腺巨噬细胞的形态、分布及其独特亚型。方法利用巨噬细胞的四种单克隆抗体（F4／80、Mac-2、CD32／16、I-A）,通过免疫组化双重染色来鉴定小鼠胸腺巨噬细胞表型、分布及形态学的多样性。结果形态学上,我们鉴定出三种类型巨噬细胞：树突状、圆形、扁平形,它们在胸腺具有不同的分布特征。树突状巨噬细胞被四种抗体标记;圆形巨噬细胞在皮髓交界至髓质为F4／80阴性,Mac-2阳性,CD32／16阴性,I-A阳性,与此相反,位于皮质的表达F4／80;扁平形巨噬细胞F4／80和CD32／16阳性,但是Mac-2阴性。结论在胸腺的不同位置,巨噬细胞具有形态学多样性,且具有不同的表型变化,提示在胸腺细胞的发育过程中,不同类型的巨噬细胞可能在胸腺的不同区域起着不同的作用。     

乌塌菜种质资源遗传多样性的ISSR分析

利用ISSR技术对48份乌塌菜种质资源进行遗传多样性分析。从60条随机引物中筛选出稳定性强、条带清晰且多态性丰富的9条引物进行PCR扩增,共扩增出103条谱带,平均每个引物扩增出11.4条带,其中多态性带85条,多态性位点百分率为82.68%。不同乌塌菜种质间遗传相似系数变幅为0.59~0.97,说明ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。利用UPGMA聚类分析,ISSR标记能将48份乌塌菜品种完全区分开,48份乌塌菜种质被划分为4个类群,聚类结果与叶片颜色相关,为乌塌菜品种资源的研究利用提供参考。     

重组质粒pcDNA3-dnaJ/蛋白DnaJ异源免疫诱导Th1和Th17细胞免疫应答抵抗肺炎链球菌感染 *

目的 探索更有效的肺炎链球菌DNA疫苗和疫苗免疫策略,并探究其中的保护机制。方法 构建重组质粒pcDNA3-dnaJ并表达DnaJ蛋白,实验分别设置重组质粒pcDNA3-dnaJ/蛋白DnaJ免疫小鼠组及单独质粒pcDNA3-dnaJ免疫小鼠组,分别比较肺炎链球菌菌株攻毒后小鼠鼻腔灌洗液细菌载量及生存率,采用ELISA检测免疫小鼠血清抗体效价及炎症因子,流式细胞术分析体外BMDCs激活情况及Th1和Th17细胞免疫应答。结果 质粒pcDNA3-dnaJ免疫3次可诱导血清中抗原特异性抗体的产生,并减少肺炎链球菌攻毒后鼻咽部的细菌载量,但在防止致死性感染方面效果较差。然而,与重复质粒DNA接种三次相比,pcDNA3-dnaJ 1次/ DnaJ蛋白加强1次的免疫策略可以显著减少鼻咽中的肺炎链球菌定植,并能够更好的预防致死性感染。此外,与DNA质粒加强免疫相比,DnaJ蛋白加强免疫后可产生更高水平的IFN-γ和IL-17A。结论 重组质粒pcDNA3-dnaJ/蛋白DnaJ异源免疫可能通过活化树突状细胞,进而诱导Th1和Th17细胞免疫应答,抵抗肺炎链球菌感染。     

亚热带不同树种土壤水源涵养功能

亚热带地区由于大面积的砍伐使天然林被人工林所代替,对森林土壤水源涵养功能造成了很大影响。树种可以通过自身特性来改变土壤物理结构进而影响土壤持水能力,因此合理选择树种对区域水源涵养具有重要意义。然而,立地条件的差异往往会对实验结果产生影响。为减少立地条件的差异,2012年2月在土壤发育和经营历史相同的林地上建立了中亚热带常见树种同质园。2019年8月测定了种植12个树种后不同土层(0—10、10—20、20—30、30—40 cm和40—50 cm)的土壤容重、含水量、总/毛管/非毛管孔隙度、最大/毛管/非毛管持水量和蓄水量。结果表明,种植不同树种7年后,土壤容重、含水量、总/毛管/非毛管孔隙度、最大/毛管/非毛管持水量和蓄水量均在表层(0—20 cm)土壤中差异显著,而在深层(20—50 cm)土壤中差异不显著。土壤孔隙度、持水量和蓄水量均与土壤容重呈显著负相关关系,而与土壤含水量呈显著正相关关系。与其他树种相比,种植鹅掌楸、枫香和全缘叶栾树等落叶阔叶树种可在较短时间内增加土壤孔隙度,提高土壤持水量和蓄水量。因此,在亚热带人工林经营管理中,可在杉木、马尾松纯林中适当引入鹅掌楸、枫香和全...     

体重差异双胎新生儿粪便样本DNA提取的优化及分析

目的 优化新生儿粪便样本DNA提取方法,提取及分析体重差异双胎新生儿粪便样本DNA。方法 从7种DNA提取试剂盒方法中选择对成人粪便样本DNA提取效果最佳的QIAamp DNA Stool Mini Kit法为基准方法,通过钢珠打断前处理、DNA吸附柱收集全部裂解液上清和洗脱液重复洗脱的优化,建立了用于新生儿粪便样本DNA的提取方法。结果 该优化方法用于婴儿（出生1个月）粪便样本,结果显示DNA提取浓度平均提高了2.4倍。用于48对双胞胎新生儿出生第1天和第3天粪便样本DNA的提取,经酶标仪及PCR扩增检测,结果显示出生第1天粪便样本DNA提取率为32%,出生3天提取率达83%。RT-PCR显示新生儿第1天到第3天肠道微生物量呈现增长趋势。结论 优化的QIAamp DNA Stool Mini Kit法适用于新生儿粪便样本DNA的快速提取,为后续扩增子高通量测序和研究体重差异双胎新生儿肠道菌群构成规律奠定基础。     

HIF-1α抑制剂对脓毒症相关性脑病大鼠认知功能及神经细胞自噬的影响

[目的]探讨HIF-1α抑制剂对脓毒症相关性脑病(SAE)大鼠认知功能及神经细胞自噬的影响。[方法] 48只SPF级健康Wistar大鼠，随机分为空白组、假手术组、脓毒症非SAE组、SAE组、脓毒症非SAE+HIF-1α特异性抑制剂(YC-1)组、SAE+YC-1组，每组8只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导SAE大鼠模型，在行CLP术前24h经股静脉插管缓慢注射YC-1(10 mg/kg溶解于二甲基亚砜)。CLP术后36 h,进行新物体识别试验、悬尾试验、旷场试验，并取海马区脑组织标本，采用HE染色观察海马区脑组织病理变化，透射电镜观察神经细胞自噬变化，Western Blotting检测海马区脑组织Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、HIF-1α蛋白表达。[结果]与空白组相比，脓毒症非SAE组、SAE组、脓毒症非SAE+YC-1组、SAE+YC-1组明显降低大鼠的记忆能力和探索能力，明显升高海马区脑组织Beclin-1蛋白表达及明显降低LC3-I蛋白表达(P<0.05),脓毒症非SAE组和SAE组海马区脑组织病理损伤明显。与SAE组比较，HIF-1α抑制剂处理可明显增加...     

载药脂质体的研究与应用进展

载药脂质体给药系统已成为国内外的研究热点。传统脂质体经修饰和改良后表现出良好的生物相容性,缓释性和靶向性。新型脂质体在经皮给药,肺部给药,脑部靶向治疗,基因治疗等方面的应用研究结果显示,集药物缓释、靶向于一体的具有良好生物安全性的脂质体给药系统具有很大发展潜力。本文综述了该领域中的最新研究进展。