苹果黄蚜细胞色素P450基因AcCYP6CY14的表达及其在抵抗吡虫啉中的作用

【目的】研究苹果黄蚜Aphis citricola细胞色素P450基因AcCYP6CY14的表达及其在抵抗吡虫啉中的作用。【方法】搜索苹果黄蚜转录组数据库,获得细胞色素P450基因AcCYP6CY14的cDNA部分序列,采用RT-PCR技术克隆目的基因cDNA序列全长。利用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术测定目的基因在苹果黄蚜不同发育阶段的表达水平。采用浸虫法,用浓度为LC30的吡虫啉对苹果黄蚜3龄若蚜进行诱导,RT-qPCR检测吡虫啉诱导不同时间后P450基因的表达情况。利用RNA干扰(RNAi)技术沉默苹果黄蚜3龄若蚜的P450基因,并研究该基因沉默后,苹果黄蚜对吡虫啉的敏感性。【结果】获得苹果黄蚜细胞色素P450基因的cDNA全长序列,为1 542 bp,编码513个氨基酸,命名为AcCYP6CY14(GenBank登录号:MH717248)。研究发现该基因在苹果黄蚜各个发育阶段均有表达,在3龄若蚜中表达量最高。经吡虫啉诱导12 h后,该基因的相对表达量显著高于对照。dsRNA饲喂结果显示,苹果黄蚜取食ds AcCYP6CY14 24 h后,将其转接到新鲜的苹果嫩稍上,24、48、72 h后,该基因的表达量显著下调。沉默该P450基因后,苹果黄蚜对吡虫啉的敏感性极显著升高(P0.01),死亡率提高了65.2%。【结论】克隆得到了苹果黄蚜P450基因AcCYP6CY14的cDNA全长序列,该基因在苹果黄蚜整个生育期均有表达,且在3龄若蚜中表达量最高,推测该基因可能参与了苹果黄蚜对吡虫啉的解毒代谢。     

辛伐他汀对雷帕霉素作用下心肌微血管内皮细胞的影响

目的:研究辛伐他汀(SIM)对雷帕霉素(RAPA)引起的体外心肌微血管内皮细胞(CMECs)损害的保护机制。方法:分离、培养大鼠心肌微血管内皮细胞。经形态学及Dil-ac-LDL吞噬试验进行鉴定后,采用RAPA(100 nM)处理24小时建立CMECs损伤模型,然后加入不同浓度的SIM(0,10-2,10-1,100,101μM)培养24小时后,采用MTT,WST-8及Transwell检测受损后CMECs的增殖和迁移;采用Hoechst 33258及Caspase-3检查各组CMECs的凋亡;采用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测Akt/p70 S6K磷酸化的程度;格里斯反应及实时逆转录PCR分别检测一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达。结果:①经形态学及Dil-ac-LDL吞噬试验均表明,成功培养CMECs;②低浓度SIM 100μM可显著改善100 nM RAPA对CMECs增殖、迁移和凋亡的影响;③SIM可通过上调PI3K/Akt进而上调p70s6K磷酸化(P0.05或P0.01);④SIM通过PI3K/Akt促进CMECs分泌NO及eNOS mRNA的表达(P0.05或P0.01)。结论:一定浓度下的SIM可改善RAPA作用下CMECs的增殖,迁移和凋亡,这些保护作用可能是通过其激活PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路实现的。     

纳洛酮对慢性阻塞性肺疾病合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清炎症因子水平及血气分析的影响

目的:分析纳洛酮对慢性阻塞性肺疾病合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清炎症介质水平及血气分析的影响。方法:将106例慢性阻塞性肺疾病并Ⅱ型呼吸衰竭患者按抽签法分作对照组与研究组,各53例,对照组行常规治疗,研究组基于对照组加以纳络酮治疗。比较两组肺总量(TLC)、第1秒末用力呼气量(FEV1)、最大口腔呼气压(PEMAX),血氧饱和度(SaO_2)、动脉血氧分压(PaO_2)、二氧化碳分压(PaCO_2),最大氧耗量(VO_2)、氧摄取率(ERO_2),白细胞介素-10、18(IL-10、IL-18),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物(LPO),不良反应。结果:治疗后,研究组TLC、FEV1、PEMAX、SaO_2、PaO_2、CaO_2、IL-10、GSH-Px、SOD均高于对照组,组间差异有统计学意义(P0.05)。研究组PaCO_2、VO_2、ERO_2、IL-18、TNF-α、CRP、LPO均低于对照组(P0.05)。两组不良反应比较无差异(P0.05)。结论:纳络酮可降低慢性阻塞性肺疾病并Ⅱ型呼吸衰竭的炎症介质,改善血气分析指标。     

烟草早花机理研究进展

早花严重影响着烟草的质量与产量,随着对植物开花机理研究的不断深入,对烟草早花的研究也已从对温度、光照、水分和养分等生理方面的研究发展到了分子水平研究,然而烟草早花的成因及其影响因素至今仍未有明确的定论。从影响烟草成花的生理与分子机理及外界环境条件等方面进行分析和综述,以期为传统的研究方法与分子技术相结合提供参考依据,为烟草早花机理的研究提供参考。     

醋酸亮丙瑞林对子宫内膜异位症患者血清雌二醇、孕酮及黄体生成素水平的影响

目的:研究醋酸亮丙瑞林对子宫内膜异位症患者血清雌二醇、孕酮及黄体生成素水平的影响。方法:选取2016年10月至2017年9月我院收治的84例子宫内膜异位症患者,根据患者入院顺序分为观察组和对照组,每组42例。观察组使用醋酸亮丙瑞林治疗,对照组使用炔雌醇环丙孕酮片。比较两组患者的临床疗效,治疗前后痛经评分、血清雌二醇、孕酮、黄体生成素、TGF-β、IL-4、IL-10、IL-17水平的班花及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组临床总有效率显著高于对照组[90.48%(38/42) vs.64.29%(27/42)](P0.05)。两组患者治疗后痛经评分、雌二醇、孕酮、黄体生成素、TGF-β、IL-4及IL-10水平均较治疗前显著降低(P0.05),且观察组以上指标均明显低于对照组(P0.05)。两组患者治疗后血清IL-17水平及不良反应发生率与治疗前相比均无明显差异(P0.05)。结论:与炔雌醇环丙孕酮片相比,醋酸亮丙瑞林能有效提高子宫内膜异位症患者的临床疗效,降低其血清雌二醇、孕酮及黄体生成素水平,改善患者的痛经情况,且安全性较高。     

EB病毒感染人胎鼻咽上皮细胞逃避老化期过程中抑制p16^INK4a表达

细胞周期调控紊乱是细胞永生化进程中一个重要的分子事件,本文利用Western blotting和S-P法分别检测p16^INK4a、p53、p21^WAF1／CIP1和E2F1的蛋白表达,试图从细胞周期调控的角度,探讨EB病毒诱导人胎鼻咽上皮细胞逃避老化期的分子机制。结果表明,EB病毒通过抑制p16^INK4a表达而阻断p16^INK4a／Rb途径,上调转录因子E2F1,而对p53、p21^WAF1／CIP表达无明显的影响。结果初步揭示,EB病毒介导的p16^INK4a／Rb／E2F1细胞周期调控紊乱参与了人胎鼻咽上皮细胞逃避老化期过程,为进一步探讨鼻咽癌发病机制提供了科学依据。     

甘肃省经济增长与环境压力关系动态变化的结构分解分析

基于宏观环境经济学思想,建立了以污染物排放为表征的环境压力函数,并运用结构分解分析（SDA）模型,结合“修正后的Laspeyres方法”,构建了用于分析和解释“经济增长-环境压力”关系动态变化的驱动因子及其影响程度的方法,并分析了1990-2005年甘肃省经济增长与环境压力之间时序关系的变化趋势以及各驱动因素对时序关系变化的影响程度.结果表明：研究期间,甘肃省由污染物排放所产生的环境压力主要是由经济增长过程中产生的废气和工业固体废弃物所致,且环境压力在后期呈现出较快的增长趋势;人口因素对甘肃省环境压力变化的影响不大,经济增长因素对环境压力增大具有明显的正向效应,而技术因素则相对表现出抑制效应,但不足以抵消经济增长带来的正向效应,且经济增长和技术因素对环境压力的影响程度视不同类型污染物而有所差异.     

基于环境污水监测的埃可病毒11型的循环动态变化及其基因特征分析北大核心CSCD

为探讨山东省环境污水监测中埃可病毒11型（Echovirus 11,Echo11）的动态变化及分子流行病学特征,本研究对山东省2011~2012年环境污水监测分离到的Echo11毒株进行了VP1区核酸扩增和序列测定,并与1994~2010年山东省急性弛缓性麻痹（Acute flaccid paralysis,AFP）监测系统中Echo11分离株以及国外同型毒株进行同源性分析和系统发生学分析。结果显示：2011~2012年山东省济南市和临沂市共分离到Echo11 94株,其时间分布具有季节性特征,夏秋季高峰明显。分离毒株之间核苷酸和氨基酸同源性分别为89.5%~100.0%和95.4%~100.0%;与原型株（Gregory）之间核苷酸和氨基酸同源性分别为76.6%~79.7%和90.4%~92.5%。山东环境分离株全部属于A基因型,毒株之间核苷酸变异较大,提示山东地区存在多个传播链共循环。本研究描述了山东省环境污水中Echo11分离株的动态变化和遗传特征,结果证明环境污水监测是探索人类肠道病毒动态流行和遗传变异的重要手段。     

一株联苯降解菌的筛选及其降解条件研究

通过选择性富集培养,从济南市南部山区所取的土样中分离得到1株联苯降解菌,实验证明该菌株能以联苯作为惟一的碳源和能源生长,初步命名为LB07,经形态学、生理生化鉴定和16SrRNA基因序列对比分析,确定该菌属于巨大芽胞杆菌。分别研究pH、温度、底物浓度、装液量和培养时间各个单因素对联苯降解率的影响。然后设计正交实验确定菌株降解联苯的最佳优化条件,最佳培养条件为联苯初始质量浓度150mg／L,温度35℃,pH=6．5,装液量为250mL三角瓶装50mL,培养时间10d,菌株LB07降解联苯的性能最好,降解率达到94％。     

陕西黄土台塬近三十年耕地动态变化的表层土壤有机碳效应

区域土地利用类型转变对土壤有机碳储量的影响,是生态环境效应评价的核心问题。根据土壤样点和土地利用数据,研究了陕西黄土台塬近三十年耕地转变对表层(0—20 cm)土壤有机碳密度和储量的影响。结果表明:(1)1985—2006、2006—2015年耕地的土地利用转化率分别为2.81%和17.89%,说明退耕还林政策加快了研究区土地利用类型转换速度。(2)研究区近三十年不同年份耕地表层土壤有机碳密度变化差异较大,1985年为1.73 kg/m~2,2006年较之增加8.09%,2015年较2006年增加36.36%。(3)1985—2006年,耕地不变和发生转变的面积分别为9429.87 km~2和272.41 km~2,表层土壤增加的碳储量分别为927.93×10~6 kg和33.8×10~6 kg。2006—2015年,耕地不变和发生转变的面积分别为8119.04 km~2和1768.47 km~2,表层土壤碳储量增加值分别为3132.79×10~6 kg和1198.99×10~6 kg。⑷耕地转变为林草地等类型,有利于表层土壤有机碳储量的增加,是朝着碳汇方向进行。因此,陕西黄土台塬退耕还林可以增加生态系统碳固定。