重组大肠杆菌全细胞催化高效合成胆绿素北大核心CSCD

胆绿素作为一种重要的保护细胞的抗氧化剂,其传统生产方法主要由胆红素的化学氧化产生,但过程复杂、纯度不高。本研究提出了一种高效、绿色、安全的生产胆绿素的方法。通过比较,筛选得到了破伤风梭状芽孢杆菌(Clostridium tetani)来源的血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)基因,并成功构建具备转化血红素合成胆绿素能力的重组大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21/pETDuet-hoCt。在pH 7.0、35℃、100 mg/L底物浓度条件下胆绿素产量为32.9 mg/L。为提高还原力,构建了基于谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GdhA)的NADPH辅酶再生系统,获得重组菌E.coli BL21/pETDuet-gdhAEc-hoCt,胆绿素产量为71.5 mg/L。此外,通过引入膜表面展示系统,构建重组菌E.coli BL21/pETDuet-gdhAEc-blc/hoCt,缩短转化时间的同时,胆绿素产量进一步得到提高,达到76.3 mg/L,是目前生物法合成胆绿素的最高研究报道。本研究为胆绿素的绿色生产奠定了良好的基础。     

液胶色谱柱复性在低分子量尿激酶原突变体（DscuPA—32K）中的应用

将构建一种具溶栓和抗栓以重功能尿激酶原突变体（DscuPA-32K)基因,在大肠杆菌中进行表达。由于DscuPA-32K分子较大并且表达量较高,目的的性质基本以包涵体的形式存在。包涵体中的蛋白质是无活性的蛋白质,为了获得有活性的蛋白质,就需要对包涵体进行变性及复性。尝试了一种新的凝胶色谱柱复性方法,并通过柱复性方法与常规的稀释复性方法进行了比较,发现柱复性方法明显优于稀释复性方法,具有成本低,效率高,并对目的的蛋白质（DscuPA-32K)进行了初步纯化等优点,尤其对酶这一类容易失活降解的蛋白质进行复性时,很值得进行推广应用。     

重组hIL—12病毒在Sf9细胞传代中遗传稳定性的研究

将含重组白细胞介素12(hIL—12)的杆状病毒(Ac—hIL12)经空斑纯化后,在草地贪夜蛾Sf9细胞中进行连续无稀释传代到P55代,收集被P15、P25、P35、P45、P55代重组病毒感染的细胞,抽提胞内病毒(ICV)DNA。根据重组病毒构建的原理,在P35cDNA和P40 cDNA的3′末段设计一对引物进行PCR,扩增出了包括P35cDNA、Polyhedrin启动子、P10启动子和P40 cDNA序列在内的全长约2．0kb片段,克隆至T Vector进行序列测定后发现,在第PmP25和P35代所扩增出的序列没有发生任何突变。但在P45代,P35 cDNA中就有3个碱基发生了点突变(461T→C,517A→G以及630C→T),Polyhedrin启动子的 1位后插入了一个碱基T,P40 cDNA与P10启动子区(230bp)没有变化;而第P55代除了以上碱基突变以外,P10启动子区—168位的G替换突变为T,—136与—135位之间插入一个碱基T,以及—122位缺失一个碱基T。以上结果表明杆状病毒在体外细胞连续传代过程中可导致外源基因本身的突变。     

模糊数学在作物数量性状遗传相关分析中的应用探讨

本文应用模糊集论中论域上模糊相容关系的传递闭包性质提出了一种刻划多数量性状遗传网络结构的新方法。本文所定义的刻划这种网络结构的完备遗传相关系数概括了网络中各性状间二次以上的遗传相关关系。最后,以甘兰型油菜(Brassica Nbpus L.)自交系为例说明这种分析方法的具体应用。     

黄芪多糖对RNase和RNase抑制因子的作用

黄芪多糖-Ⅱ(简称APS-2)系葡萄糖聚合体,分子量12,300,其作用与黄芪多糖(APS)相似。小鼠和大鼠皆腹腔注射200mg/kg/day×3J小鼠实验表明APS-2有显著抑制肝、脾碱性RNase活力的作用,对血清RNase活力无作用,对酸性RNase无明显抑制。大鼠实验表明对肝碱性RNase只有104,000×g部分有显著抑制作用,而对10,000×g部分无影响。对肝碱性RNase的抑制因子具显著性增强作用。因此黄芪多糖的作用是通过增强RNase抑制因子和抑制RNase活力,使RNA的分解代谢降低,从而引起RNA累积和合成速率的降低。     

安捷伦推出汉化版ChemStation分析实验室软件

日前，安捷伦科技公司推出第一个汉化版ChemStation软件，用于分析实验室中进行仪器控制、数据采集和数据分析。中国、香港、台湾和新加坡的客户可以选择购买汉化版或英版ChemStation软件。     

宋内氏志贺氏菌I相抗原在E. ColiHB101菌株中的表达

志贺氏菌痢是发展中国家高度流行的传染 病，也是我国最常见的腹泻病之一。已表明非 经肠道的灭活菌体苗在试验攻击研究和野外试 验中无效[2,31。用减毒口服活菌苗则有一定预 防效果〔5,61c     

宋内氏志贺氏菌Ⅰ相抗原在E .coli HBl01菌株中的表达

志贺氏菌痢是发展中国家高度流行的传染病,也是我国最常见的腹泻病之一。已表明非经肠道的灭活菌体苗在试验攻击研究和野外试验中无效。用减毒口服活菌苗则有一定预防效果。 近年来,Kopecko,sansonetti等将宋内氏志贺氏菌(简称宋内氏菌)一个大的非接合性Ⅰ相质粒(MW 120×10~6dalton),通过质粒诱动系统,转移到宋内氏Ⅱ相菌中。他们发现,宋     

低剂量氯胺酮对工作记忆的影响

氯胺酮是一种N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）阻滞剂，低剂量氯胺酮具有良好的镇痛、抗炎和抗抑郁作用，近年来受到了广泛的关注。但是低剂量氯胺酮对于高级认知功能的影响尚未全面阐明。工作记忆是涉及众多复杂认知活动的关键功能，有研究显示低剂量氯胺酮急性或慢性使用均会损伤工作记忆，其神经机制也开始受到关注。深入分析低剂量氯胺酮对于工作记忆的影响及其机制对于指导氯胺酮的临床使用具有重要意义。本文首先介绍了低剂量氯胺酮作用于神经系统的药理作用途径，以及工作记忆本身的神经环路机制，进而回顾了近年来关于低剂量氯胺酮对工作记忆的急性和慢性作用的相关研究，并重点分析了低剂量氯胺酮损伤工作记忆的可能的神经机制，希望对低剂量氯胺酮在临床中的合理使用提供科学依据。