黑龙江大豆蚜种群动态及田间空间分布研究

2007-2009年对黑龙江大豆蚜田间种群动态的调查结果表明,6月中旬大豆蚜Aphis glycines Matsumura开始在田间出现,3～5周后田间有蚜株率达到100%。7月未至8月初蚜量达到高峰期,9月中下旬在田间逐渐消失。大豆蚜有翅蚜与无翅蚜的发生动态基本一致,有翅蚜高峰期有时会稍有提前。2007年大豆蚜发生时期早、基数大、增长周期长导致高峰期蚜量显著高于2008年和2009年。大豆蚜田间分布聚集度指标I﹥0、m*/m﹥1、Ca﹥0、C﹥1,整个生长季种群都表现为聚集分布。建立的Iwao回归关系方程(m*=7.14758+1.11200m)表明种群分布的基本成分为个体群,个体之间表现为相互吸引。     

三种鸡形目雉科禽类卵黄抗体的纯化及二抗的制备

目的 纯化三种鸡形目雉科的禽类孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY,并且免疫家兔制备抗血清。方法 采用了水稀释法,HiTrap IgYPurification HP免疫亲和层析法和硫酸铵沉淀法纯化IgY。免疫家兔制备抗血清,免疫双扩散法测定效价。Protein-A亲和纯化兔抗IgY血清IgG。结果 经亲和纯化和盐析纯化,得到了孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY,经SDS-PAGE检测为电泳纯,孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY的相对分子质量约为180×10^3。免疫后经Protein-A亲和纯化后获得了兔抗IgY的IgG。结论 证实了孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY的存在及其特性。雉科鸡形目禽类卵黄抗体的纯化方法 相似,可以推广到鸡形目其它禽类的卵黄抗体的纯化中,获得的抗血清可以进一步进行标记和今后抗原的检测。     

脾切除术对肝癌发生的影响

目的：探讨脾切除术对肝炎后肝硬化脾亢患者的肝癌发生发展的影响。方法：回顾性研究369名肝硬化脾亢伴或不伴肝癌患者,经倾向性得分匹配方法（PS法）均衡分为无脾切除组（246例）和脾切除组（123例）,分别比较脾切组中脾切除术对患者肝功能的影响和两组间肝癌发生率的差异。结果：脾切除术后患者AST、ALT在短期内有轻微升高,WBC和PLT记数明显增加,血清TBIL和PT也都降低。无脾切除组和脾切除组的肝癌发生率分别为33.33%和12.26%,卡方检验结果P〈0.05,有统计学意义。结论：脾切除术不但可以改善肝硬化肝癌患者的肝功能,还可以降低肝硬化脾亢患者肝癌发生的危险。     

高温胁迫下水稻基因组DNA表观遗传变化MSAP分析

目的:研究高温胁迫对水稻基因组DNA甲基化变化的影响,筛选出一批与高温胁迫的相关基因,研究DNA基因化与基因转录水平之间的关系。方法:在人工气候箱子中,对四叶期的水稻幼苗进行38度高温处理,分别取0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、16 h和24 h七个不同时间点的幼叶提取DNA与RNA,利用MSAP技术检测总甲基化水平变化,RT-PCR检测相关基因的转录本的表达量变化。结果:与对照组0 h幼叶相比,高温处理下的2 h、4 h、8 h、12 h、16 h和24 h幼叶的总体甲基化水平依次是37.14%、36.79%、36.00%、35.50%、35.43%、34.64%和34.57%,可知幼叶DNA甲基化水平在高温处理后不断降低。此外,RT-PCR结果显示筛选的两个与甲基化相关的基因(PP2C和RAFP)的转录水平与甲基化水平呈负相关。结论:基因组甲基化作为一种重要的表观遗传调控方式,可以通过调控相关的基因的表达量水平来防御高温胁迫。     

枯草芽孢杆菌β-1，3-1，4-葡聚糖酶基因(bglS) 在酵母菌中的克隆与表达

将大肠杆菌质粒pFG1中含枯草芽胞杆菌卢β-1,3—1,4-葡聚糖酶基因(bglS)的2.7kb EcoRI片段克隆到大肠杆菌,酵母菌穿梭质粒上组建成杂种质粒YCSH,转化S.cerevisiae并得到表达。两种不同方向的插入子(YCSH 1和YCSH 5)在酵母菌中表达出的β-1,3-1,4葡聚糖酶活性相差2．3倍。根据酶作用底物专一性测定和酶反应的最适pH分析表明：YCSH中bglS基因产物与出发菌株B．Subtilis 1．88的基本酶学特性完全相同,但YCSH中bglS基因在酶母中的表达水平远比大肠杆菌中低     

β-LG基因外显子2多态性对荷斯坦牛乳成分的影响

目的:为了研究中国荷斯坦奶牛的β-乳球蛋白(-βlactoglobulin,-βLG)基因外显子2多态现象对乳产量及成分影响。方法:本实验采用单链构象多态(PCR-SSCP)技术对中国荷斯坦奶牛-βLG基因(NCBI登录号:DQ489319)外显子2进行克隆及多态性研究。结果:8种SSCP带型:ab,abc,abcd,abd,abe,abcde,abce和abde型,带型频率分别为:0.14,0.10,0.27,0.23,0.05,0.04,0.11和0.06(P<0.05);6个单核苷酸位点:位点1 C>T,位点2 T>C,位点3 C>T,位点4 C>G,位点5 C>A,位点6 A>T或C,且它们的遗传多态信息含量处于中度或高度多态(PIC>0.25)。结论:中国荷斯坦奶牛-βLG基因外显子2区具有单核苷酸多态,单个核苷酸的改变影响奶牛的生产性能(牛乳产量、乳蛋白和脂肪含量等)。     

特异性免疫疗法治疗慢性荨麻疹患者的疗效及对血清IgE、IL-4、IFN-γ和生活质量的影响

目的:研究特异性免疫疗法治疗慢性荨麻疹患者的疗效及对血清免疫球蛋白E(Ig E)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)和生活质量的影响。方法:选择2015年4月至2017年2月于陕西省人民医院进行治疗的112例慢性荨麻疹患者纳入本研究,随机分为观察组(n=56)及对照组(n=56),对照组患者给予依巴斯汀片治疗,观察组在此基础上给予特异性免疫疗法进行治疗,对比两组患者的临床疗效以及治疗前后血清Ig E、IL-4、IFN-γ水平,比较两组患者治疗前后的生活质量情况。结果:观察组的总有效率为96.43%,高于对照组的83.93%(P0.05)。治疗前,两组患者血清Ig E、IL-4及IFN-γ的水平之间的差异无统计学意义(P0.05);治疗后,两组患者血清Ig E、IL-4及IFN-γ的水平均降低,且与对照组相比,观察组各指标水平更低(P0.05)。治疗前,两组患者的生活质量评分比较无统计学差异(P0.05);与治疗前比较,两组患者治疗1个月后、治疗3个月后的生活质量评分均降低,且观察组治疗1个月后、治疗3个月后的生活质量评分低于对照组(P0.05)。结论:采用特异性免疫疗法治疗慢性荨麻疹患者疗效确切,能够降低其血清Ig E、IL-4以及IFN-γ水平,改善患者的生活质量。     

利用微卫星研究普洱亚洲象种群的遗传多样性

本文采用非损伤性取样法获得普洱地区亚洲象粪便样品113份,试剂盒法提取粪便基因组总DNA,利用9对微卫星引物对DNA进行特异性扩增,CERVUS 3.0软件基因分型得到49个独特的基因型。利用GenAlEx v6.5与Arlequin v3.5进行位点遗传信息检测和种群遗传多样性分析,结果表明：研究采用的所有微卫星位点均未偏离哈迪温伯格平衡,位点的平均等位基因数为3.111,平均香农信息指数为0.804,平均期望杂合度为0.468,平均观测杂合度为0.476。比较相同位点上不同地区亚洲象的遗传杂合度,表明普洱地区亚洲象的种群遗传多样性较低。     

小青龙汤对慢性支气管哮喘患者肺功能的影响

目的:探讨小青龙汤治疗慢性支气管哮喘的临床疗效。方法:选取2009年1月至2011年1月我院收治入院的哮喘患者84例,随机分为对照组和治疗组,对照组采用西药对症治疗,治疗组在对照组的基础上联合应用小青龙汤,治疗结束后对两组患者的临床疗效和肺功能进行分析。结果:临床疗效比较:治疗组总有效率显著高于对照组(95.42%VS 80.95%,P<0.05);治疗结束后,两组患者肺功能FEV1占预计值%和PEF占预计值%均显著升高,肺功能明显好转(P<0.05),且治疗组肺功能改善更为明显(P<0.05)。结论:小青龙汤作为中医经典方剂治疗慢性支气管哮喘,可显著改善肺功能,提高临床疗效。     

δ-睡眠肽与GFP融合蛋白的表达和纯化

构建δ-睡眠肽(DSIP)蛋白与GFP的融合基因表达载体,高效表达和纯化GFP-DSIP融合蛋白。通过SOE-PCR拼接DSIP全长编码基因,并使得DSIP上游具有肠激酶识别位点,经双酶切定向克隆至表达载体pET-28a,构建重组载体pET-28a-DSIP,通过PCR扩增GFP全长编码基因,经双酶切定向克隆至pET-28a-DSIP,构建原核重组表达载体pET-28a-GFP-DSIP,通过双酶切和测序鉴定后,导入E.coli BL21宿主菌中,IPTG诱导表达融合蛋白,采用镍亲和层析和分子筛凝胶层析获得高纯度蛋白,SDS-PAGE分析鉴定。经测序鉴定成功构建了原核重组表达载体pET-28a-GFP-DSIP,在IPTG诱导下获得可溶性的绿色荧光蛋白与睡眠肽的融合蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化成功获得高纯度的融合蛋白。成功构建了DSIP与GFP融合基因的重组表达载体,确定了GFP-DSIP融合蛋白诱导表达的最佳条件,获得了较高纯度的融合蛋白,为进一步研究DSIP蛋白的生物学功能奠定了基础。