vWF-ΔPro改善基于蛋白质剪接的双载体BDD-FVIII基因转移

多聚体von Willebrand因子(vWF)的功能之一是保护凝血Ⅷ因子(FⅧ)免受蛋白水解引起的快速清除．前肽缺失突变体vWF (vWF-ΔPro)不能形成多聚体,但可以结合FⅧ蛋白．为探讨vWF-ΔPro对基于蛋白质反式剪接作用介导的双载体转FⅧ基因后连接的FⅧ蛋白的分泌和活性的影响,将vWF-ΔPro基因和融合Ssp DnaB内含肽的B结构域缺失型FⅧ(BDD-FⅧ)断裂基因共转染293细胞进行转基因的瞬时表达,用Western印迹检测了单独转染vWF-ΔPro基因细胞的vWF-ΔPro表达量和蛋白形式,并检测了其对FⅧ的结合力;用ELISA法观察分泌至培养上清中的剪接的BDD-FⅧ,并用Coatest法检测由其产生的生物活性．结果显示,vWF-ΔPro转基因细胞呈现二聚体蛋白表达形式,其结合FⅧ的能力与转野生型vWF基因细胞相近;vWF-ΔPro共转染细胞上清中剪接BDD-FⅧ蛋白浓度为198±21 ng/mL,活性为1.78±0.18 IU/mL,明显高于未转染vWF-ΔPro基因的细胞对照(91±12 ng/mL和1.05±0.13 IU/mL),与共转染野生型vWF基因细胞对照相近(221±19 ng/mL和1.95±0.22 IU/mL),表明vWF-ΔPro可显著改善内含肽剪接的BDD-FⅧ蛋白的分泌和生物活性．为vWF-ΔPro转基因的基于蛋白质剪接技术双AAV载体转BDD-FⅧ基因动物体内实验提供了依据．     

UHRF1在膀胱尿路上皮癌中对HIF1α-VEGF通路的调控作用

目的:本文研究旨在探讨UHRF1对膀胱癌早期诊断和预后的价值.方法:本文研究收集26例膀胱癌病人的癌旁组织和癌症组织,同时用人BCa细胞T24细胞作为体外模型.CCK-8分析、TUNEL染色、LDH活性和Caspase 3/8/9蛋白表活性达水平被用于检测UHRF1的作用.qRT-PCR检测、基因芯片和Western ...     

气象因子对宁夏枸杞果实生长及多糖含量的影响

选取宁夏枸杞(Lycium barbarum)主产区银川、白银和德令哈三地5年生宁杞1号为实验材料,探讨各地枸杞果实(横径、纵径和百粒重)生长及多糖含量与主要气象因子之间的关系,并建立回归模型。结果表明:三地果实生长类型均属双"S"型,即包括第1次快速生长期、缓慢生长期和第2次快速生长期;各产区宁夏枸杞的果实在不同生长期的发育时间和整个生长期的时间均存在差异。三产地枸杞果实的发育过程中,多糖含量始终呈现银川白银德令哈的趋势。多糖含量随枸杞果实发育成熟度的增加而升高,表现为缓慢升高和快速升高2个阶段。平均气温和平均昼夜温差是影响枸杞果实生长发育的主导气象因子。枸杞果实的整个发育过程中,银川地区枸杞果实的横、纵径和百粒重的增长首先随平均气温的升高而增加,分别达到23.71°C、23.93°C和23.55°C时最大,之后随着温度的增加而减小;白银地区枸杞果实横、纵径和百粒重一直随平均气温的增加而增加,到温度分别为22.99°C、22.16°C和21.35°C时接近最大;德令哈枸杞果实横、纵径和百粒重一直随平均气温的增加而增加,直到平均温度分别为19.55°C、21.01°C和20.64°C时接近最大。     

穴位按摩联合高压氧对急性脑卒中后吞咽功能障碍临床效果

目的:研究穴位按摩联合高压氧对急性脑卒中后吞咽功能障碍的临床效果。方法:选择2016年1月～2018年12月我院收治的80例急性脑卒中后吞咽功能障碍患者,将其随机分为两组。对照组采取高压氧治疗,观察组采取穴位按摩联合高压氧治疗。观察和比较两组吞咽功能障碍的改善效果。结果:观察组的吞咽功能障碍改善有效率明显高于对照组(P0.05);两组治疗15 d和30 d的洼田饮水试验评分均明显低于治疗前1 d(P0.05),且观察组明显低于对照组(P0.05);两组治疗后的吞咽障碍特异性生活质量量表(Swallowing quality-of-life questionnaire,SWAL-QOL)评分均明显低于治疗前(P0.05),且观察组明显低于对照组(P0.05);观察组吸入性肺炎的发生率为7.50%(3/40),明显低于对照组[25.00%(10/40)](P0.05)。结论:穴位按摩联合高压氧可促进急性脑卒中后吞咽功能障碍患者吞咽功能的恢复,防止吸入性肺炎的发生,提高患者生活质量。     

湿地生态系统健康的时空尺度特征

湿地生态系统健康是目前湿地研究领域的新概念、新问题。本文从时空尺度的基本概念和特征出发,探讨了湿地生态系统健康的各种表述和确定指标,较详细地阐述了湿地生态系统健康的时间尺度特征、空间尺度特征以及时空尺度的统一性和差异性,特别强调了尺度在研究湿地生态系统健康中的重要性。     

人肝癌裸小鼠常位移植实验研究

采用硫贲妥钠（３０ｍｇ／ｋｇ、３０％乙醇配制）麻醉和蘸上立止血（２５０ｋＩＵ／ｍｌ）的明胶海棉止血措施确保了人肝癌裸小鼠常位移植术能安全、可靠地进行。本中心建立的两株人肝癌裸小鼠移植瘤株（ＨＨＣ４、ＨＨＣ１５）已成功地移植于裸小鼠（ＳＰＦ级）肝脏内,移植瘤生长良好、传代稳定和持续分泌ＡＦＰ。荷瘤（ＨＨＣ１５）３～６周裸小鼠血清ＡＦＰ含量与瘤体积的增加呈正相关。常位移植前（７ｄ）裸小鼠皮下注射０．１ｍｌ０．５％ＣＣ１（Ｖ／Ｖ。橄榄油配制）能明显提高ＨＨＣ４常位移植的成功率（Ｘ２检验、Ｐ＜０．０１）;在微量ＣＣｌ４作用下,裸小鼠肝细胞受损伤,发生肝硬化,在此基础上所移植和生长的人肝癌常位移植瘤与大多数人肝癌病变发生的肝脏病理生理学特点相似,本模型的建立更适用于抗肝癌药物的模拟治疗和筛选。     

药用蛋白质乳腺生物反应器的制作技术及新方法进展

用乳腺生物反应器生产人类珍稀的药用蛋白已经构成了现代生物技术的一个重要领域.与其他的生物工程方法比起来,用乳腺生物反应器生产人类珍稀的药用蛋白具有更多的优点.这一生物技术的实际应用依赖于基因的时空表达调控操作和可靠的转基因动物制作方法.综述了这一技术的优点,概括描述了了乳腺生物反应器表达载体的构建方法,及转基因动物的制作方法.讨论了这些方法的优缺点及技术改进的发展方向,特别是介绍了最近出现的、有研究和应用价值的用精原干细胞制作转基因动物的方法.     

亚硝酸盐对污水生物除磷影响的研究进展

亚硝酸盐作为生物硝化和反硝化的中间产物, 存在于污水生物脱氮除磷系统中。对于生物强化除磷工艺亚硝酸盐既是电子受体用于反硝化除磷, 同时又是抑制剂影响生物除磷过程。本文综述了聚磷菌在厌氧、好氧和缺氧环境中的代谢机理, 在此基础上分别从好氧除磷和反硝化除磷两方面介绍了亚硝酸盐对污水生物除磷影响的研究, 同时概述了亚硝酸盐对生物除磷的抑制机理, 并对该领域的研究提出了个人见解。