一个改进的PCR过程中聚合酶复制精确性测定系统的建立

在大肠杆菌中建立了一套用于测定ＤＮＡ聚合酶在ＰＣＲ过程中复制精确性的系统,并测定了耐热ＦＤＤＮＡ聚合酶在ＰＣＲ扩增过程中的复制精确性。这一系统主要包括以质粒ｐＵＣ１１８和ｐＵＣ１１９为出发质粒所构建的一套共６个突变质粒,分别为ｐＦＤＦＰ１１８和ｐＦＤＦＰ１１９（＋１移码突变）、ｐＦＤＦＭ１１８和ｐＦＤＦＭ１１９（－１移码突变）、ｐＦＤＦＵ１１８和ｐＦＤＦＵ１１９（碱基置换突变）。这些突变质粒均不能进行ｌａｃＺ－α互补反应,因此在含有Ｘ－Ｇａｌ和ＩＰＴＧ的培养基上菌落呈白色。同时还构建了ＰＣＲ产物克隆载体ｐＦＤＦＬ１１８和ｐＦＤＦＬ１１９。以上述突变质粒为模板进行ＰＣＲ反应,取反应产物和ｐＦＤＦＬ１１８或ｐＦＤＦＬ１１９连接后转化到大肠杆菌中。若在ＰＣＲ过程中发生回复突变,则转化子在含有Ｘ－Ｇａｌ和ＩＰＴＧ的培养基上呈蓝色。由转化子中蓝白菌落个数即可计算出ＤＮＡ聚合酶的复制差错率。用这一系统测得ＦＤＤＮＡ耐热聚合酶的复制差错率为１０－５～１０－６。     

小鼠BW5147细胞与网织红细胞融合后cAMP水平及其磷酸二酯酶的细胞化学观察

本实验用PEG介导,将小鼠BW_(5147)细胞与小鼠网织红细胞在体外进行悬浮融合,经HAT选择性培养基筛选获得的胞质杂交细胞,表现出增殖减慢、生长率下降、生瘤能力降低等去恶化现象。本实验从cAMP-PDE细胞化学反应显示出胞质杂交细胞内cAMP-PDE活性比亲本BW_(5147)瘤细胞有所减弱,而cAMP水平则有所升高,提示胞质杂交细胞恶性程度下降可能与细胞内cAMP-PDE活性降低和cAMP水平升高具有一定的关系。本实验的结果将为进一步探索促使肿瘤细胞逆转的可能途径提供一定的依据。     

目前我省水稻病虫害综合防治的途径

<正> 综合防治在病虫害的治理方面,愈来愈起着明显的作用。随着综合防治实践的不断深入发展,对综合防治的认识也必将获得进一步提高。现结合我省水稻病虫害综合防治问题,拟从三个方面进行讨论。 一、综合防治的概念和标准 综合防治的概念应是通过各种措施,从而达到压低害虫的基数,把病虫危害控制在允许的经济阀值以下。在经济上,获取最大的收效,并无副作用出现。所以综合防治与非综合防治是有严格区别的。     

论品种的纯与杂

华国锋同志在第一次全国农业学大寨会议上的总结报告中指出:“要积极进行良种的繁育、推广和提纯复壮工作。”这是建设大寨县,达到高产稳产,全面贯彻执行农业八字宪法,大搞科学种田的一个组成部分。在理论与实践上正确地理解与应用品种的纯与杂,对发展我国良种繁育、推广和提纯复壮有重大意义。     

关键是培养学生的科学思维能力

当前生物化学的进展极快,研究的领域很宽,教科书的内容也很广泛,而讲授时数又不可能相应增加,以致造成课时紧张,很多内容只讲述必要的结论性知识,很少有时间讲述其来龙去脉,分析其科学方法,指出其不足之处,展望其发展方向。结果使学生习惯于死记硬背,负担过重,脑子刻板。我们深深感到,     

结合珠蛋白遗传性多态现象与疾病关系的研究——Ⅱ.结合珠蛋白遗传性多态现象与白血病的关系

本文报告广东地区0—54岁白血病病人Hp~1频率显著高于正常人,其相对危险率为1.9,提示这一地区Hp~1基因与白血病发生有关。急粒和急淋组Hp~1频率显著高于正常人,慢粒组则与正常人无显著差异。化疗后的急拉和急淋组Hp2-2型和Hp2-1型Hp平均含量较化疗前显著降低,Hp1-1型则降低不显著;慢粒组三类Hp平均含量化疗前后无明显变化。提示Hp~1基因可能与急性白血病发生有关。具有Hp纯合子或杂合子正常母亲的白血病子女中,纯合子与杂合子的比例符合预期比例,提示在白血病病人家庭中Hp的遗传方式无异常。还观察到,肝癌中Hp~1频率亦显著增高,提示Hp~1基因除与白血病有关外,还可能与其他某些肿瘤的发生有关。     

畜禽遗传资源冷冻保存中的取样方法探讨

本文基于遗传学和数理统计原理,提出了运用冷冻生殖细胞的方法长期保存畜禽遗传资源时,冷冻生殖细胞的4种取样方法,并推证了其误差公式和最低保存数量的估计公式。最后通过实例对公式的实际应用作了说明和讨论分析。     

急性及慢性低氧对大白鼠和高原鼠兔肝线粒体呼吸功能的影响

本实验用氧电极法测定在急性及慢性低氧条件下,S.D大白鼠及高原鼠兔(Ochotona curzoniae)肝线粒体的氧化磷酸化效率及呼吸控制率之变化。结果表明:大白鼠和高原鼠兔经24小时急性低氧暴露后,其氧化磷酸化效率无明显变化;呼吸控制率在高原鼠兔中无明显变化,而在大白鼠中却有明显增加,这种增加是由于呼吸状态Ⅳ呼吸速度降低而引起的。经25天的慢性低氧暴露后,大白鼠和高原鼠兔的氧化磷酸化效率仍无明显变化,但大白鼠在海拔7000米时的呼吸控制率则有明显下降,而高原鼠兔却明显增加。实验结果提示:在细胞呼吸水平方面,高原鼠兔对低氧的耐受力明显高于大鼠。     

我国汉族人群的乙二醛酶Ⅰ遗传多态性

用琼脂糖平板凝胶电泳技术分析了我国六个城市的汉族共1238人的红细胞乙二醛酶I的遗传多态性。每个汉族人群的受检人数和GLO1*1基因频率分别为:郑州200人(0.1023),哈尔滨195人(0.1103),呼和浩特210人(0.1259),贵阳204人(0.1373),兰州210人(0.1476),西安199人(0.1508)。中国不同地区汉族人群之间的GLOI基因频率分布存在显著性差异,但这种差异明显小于中国不同少数民族之间的差异。     

几种诊断肿瘤的定位显影剂—99~m锝铬合物配位体的合成

合成了六个肿瘤定位显影剂,单氨三乙酰氨基酸配位体,其中三个未见报道。