人胰岛素原基因在大肠杆菌中高效外分泌表达

将胰岛素原基因融合到金色葡萄球菌蛋白Ａ的基因上,构建成大肠杆菌中基因融合的外分泌表达载体。它能高效表达且有效地分泌表达产物。利用亲和层析能方便地从培养液中分离出融合蛋白。融合蛋白经ＣＮＢｒ裂解后,经反相ＨＰＬＣ分析,分离得到具有天然结构的胰岛素原并进行了鉴定。     

致龋菌与牙周致病菌混合感染动物模型的初步研究

目的通过建立龋病与牙周病共同发生的动物模型,初步探讨致龋菌与牙周致病菌的相关性。方法 5~6周龄金黄地鼠22只,雌雄各半,随机分成2组,均给予高蔗糖饮食。对照组10只,感染组12只,双侧下颌第一磨牙丝线结扎,接种牙龈卟啉单胞菌(P.g)和变形链球菌(S.m);种菌结束后8周检查下颌第一磨牙牙体和牙周组织损害情况。结果感染组产生明显的牙周损害:探诊出血(BOP)、菌斑指数(PLI)以及牙槽骨吸收(ABL)均显著大于对照组(P0.01),同时,感染组冠部龋坏率达到90.0%,大于对照组(66.7%),但差异没有统计学意义。2个组均未产生根龋。结论牙龈卟啉单胞菌与变形链球菌分别作用于牙周和牙体组织发生龋及牙周损害,二者没有显著的相互抑制作用,可在地鼠口腔中同时出现龋和牙周炎病损的模型。     

2型糖尿病患者幽门螺杆菌感染与超敏c反应蛋白、血脂情况的关系

目的：探讨2型糖尿病（T2DM）患者幽门螺杆菌（HP）感染与超敏c反应蛋白（hs-CRP）、血脂水平的关系。方法：以2009年1月1日至2009年12月31日在我院体检的683例2型糖尿病患者为研究对象,根据HP感染情况分成HP阳性组（n=306）和HP阴性组（n=377）,采用单因素和多因素Logistic回归分析方法,分析HP感染与hs-CRP、血脂水平的关系。结果：（1）HP阳性组的hs-CRP水平高于HP阴性组（1.14mg/L vs 0.96mg/L）,差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）HP阳性组的血脂异常率（59.8%vs 50.7%）和hs-CRP异常率（20.9%vs 14.3%）均高于HP阴性组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。（3）单因素Logistic回归分析显示,血脂异常和hs-CRP异常对HP阳性的OR值及分别为1.449和1.582,均有统计学意义（均P〈0.05）,多因素Logistic回归分析显示,hs-CRP异常对HP阳性的OR值为1.509,有统计学意义（P〈0.05）。结论：2型糖尿病患者,HP感染可能通过增高hs-CRP水平,影响脂质代谢,触发一系列生物、生物化学级联反应,可使患者并发心血管病变的风险性增高。     

胶质细胞源神经营养因子cDNA全序列的克隆及其生物学功能的研究

为了研究ＧＤＮＦ在神经系统中的生物学功能,通过ＲＴ－ＰＣＲ方法从大鼠睾丸总ＲＮＡ中扩增出ＧＤＮＦｃＤＮＡ全序列,序列分析表明与ＧｅｎＢａｎｋ中的顺序完全相同．将ＧＤＮＦｃＤＮＡ以非融合方式连接在真核表达载体ｐＥＧＦＰ－ＮⅠ的绿色荧光蛋白的上游,在ＣＭＶ启动子控制下表达．通过绿色荧光蛋白报告基因的表达表明ＧＤＮＦｃＤＮＡ能在真核细胞ＨｅＬａ中很好表达．采用裸ＤＮＡ转染方法研究ＧＤＮＦ对损伤的坐骨神经的修复作用,在雏鸡出生后３ｈ切断其右侧坐骨神经,将ｐＥＧＦＰ－ＧＤＮＦ与Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ的混合物注射到坐骨神经切断位点附近肌肉内,５ｄ后追补一次．２０ｄ后进行实验检测,观察到ＧＤＮＦｃＤＮＡ的转染阻止了切断神经侧的腰脊髓内［Ｌ４－Ｌ６］运动神经元的大量死亡,并显著促进了切断坐骨神经的再生．     

用间接荧光免疫法快速检测牙周袋内牙龈类杆菌

本试验选择成年牙周炎致病菌—产黑色素类杆菌群中牙龈类杆菌为指示菌,用牙龈类杆菌47A—1参考株制备标准抗血清,并和羊抗兔IgG荧光抗体,直接与牙周龈下菌斑标本涂片进行间接荧光反应,计数一个视野荧光反应阳性的牙龈类杆菌的菌数(三个视野平均值)。全过程只需1.5～2小时。用此法检查了90例健康人,75例牙龈炎及70例牙周炎患者,结果发现正常牙周人的牙龈类杆菌菌数为     

人胰岛素原基因在大肠杆菌中高效外分泌表达

将胰岛素原基因融合到金色葡萄球菌蛋白Ａ的基因上,构建成大肠杆菌中基因融合的外分泌表达载体,它能高效表达且有效地分泌表达产物,利用亲和层析能方便地从培养液中分离出融合蛋白,融合蛋白经ＣＮＢｒ裂解后,经反相ＨＰＬＣ分析,分离得到具有天然结构的胰岛素原并进行了鉴定。     

Bacillus Calmette(BC)研究所预计2001年春申请生产杀虫病毒制剂

《日经生物技》术2000年3月27日号第14页报道：Bacillus Calmette(BC)技术开发研究所最近宣布,预计在2001年春提交利用昆虫病毒生产生物农药的申请。 据说如农药审查顺利,打算于2002年商品化。如果能商品化,将成为国内第1号利用病毒生产的生物农药。虽然该生物农药在海外已实用化,但是在日本国内还没有商品化。 Bacillus Calmette(BC)技术开发研究所正在开发中的天敌病毒制剂是以茶叶害虫一茶蛾、茶卷叶蛾为对象的两种杀虫性病毒(茶蛾粒病病毒、茶卷叶蛾粒病病毒)的混合剂。现正由日本植物防疫协会进行其杀虫效果的评价试验。 Bacillus Calmette(BC)技术开发研究所是生物系特定产业技术研究推进机构(生研机构)98年度投资资助,于1999年2月正式设立。除生研机构外,日本化药等3个公司也投入了资金。Bacillus Calmette(BC)技术开发研究所的试验研究期限为6年,研究经费总额为5亿日元。孙国凤     

GDNF及BDNF对受损运动神经元的长期修复

为了研究胶质细胞源神经营养因子（ＧＤＮＦ） 及脑源神经营养因子（ＢＤＮＦ） 对切断轴突的新生运动神经元的长期维持存活及促进神经再生的作用, 我们选用出生时单侧切断坐骨神经的雏鸡模型, 用裸ＤＮＡ 转染方法, 在损伤神经附近的肌肉中转染ＧＤＮＦ ｃＤＮＡ 和ＢＤＮＦ ｃＤＮＡ 的真核表达载体,观察在体表达的神经营养因子对损伤的修复作用。结果显示,在体表达的ＧＤＮＦ 在８ 周内能使切断坐骨神经的腰脊髓运动神经元近９０ ％ 维持存活。切断的坐骨神经从断端向远体端再生,最长再生达９ ．５ｍ ｍ 。表达两个因子比单独表达ＧＤＮＦ 对运动神经元的存活无显著性差异。而两个因子协同作用对坐骨神经的再生更为有效,坐骨神经再生最长的可达１５ ．４ｍ ｍ 。     

PCR直接检测龈下菌斑主要可疑牙周致病菌

目的：应用PCR方法直接检测龈下菌斑主要可疑牙周致病菌与牙周病活动部位的关系,探讨其方法的可行性并探讨其主要可疑牙周致病菌的分布规律。方法：应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)直接检测龈下菌斑主要可疑致病菌16s RNA保守区域片段。40名受试者包括牙周病患者20人,每人同口取一个牙周病活动部位,一个相对健康或牙周病静止对照部位;成人健康者20人,每人各取一个标本。结果：龈下菌斑5种可疑牙周致病菌在牙周病活动部位的检出率牙龈卟啉菌为86％,福赛类杆菌为95％,螺旋体为86％,中间普氏菌和黑色普氏菌分别为95％和33％,均显著高于同口部位对照组和健康对照组。结论：PCR直接检测菌斑牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、福赛类杆菌、齿密螺旋体及黑色普氏菌匀与牙周炎活动部位相关。     

基于第三方支付的居民健康卡支付体系设计

为优化医疗业务流程、创新居民健康卡就诊支付方式,引入了第三方支付平台,融合了线上交易和线下医疗应用。结合医院就诊费用结算流程和无密支付的要求,设计了银联交易网关和银联在线支付异步交易转换算法,建设了委托代扣签约、余额查询、缴费、退货和支付撤销等服务,采取了无密消费有效期等措施保证了持卡人资金安全。对财务系统和各执行科室业务系统进行改造,建设了居民健康卡支付服务体系,患者持卡能够在全院范围内所有科室实时缴费。