串联抗菌肽Cecropin B基因在莱茵衣藻中的表达及其抗菌活性分析

为了应对各种抗生素在水产养殖业所带来的副作用,我们在本文中尝试利用微藻对一种抗菌肽进行表达的可行性研究．根据莱茵衣藻核基因组偏爱密码子对抗菌肽Cecropin B基因进行改造,并将4个经改造的Cecropin B基因依次串联起来,中间加上莱茵衣藻的自剪切连接肽序列LWMRFA,人工合成总长度为522 bp的串联Cecropin B基因．将串联Cecropin B基因克隆到含hsp70-RBCS2启动子和RBCS2终止子的pH105载体上,再与携带ble筛选基因的表达框架连接,构建重组表达载体pCB124．采用玻璃珠转化法将载体pCB124导入莱茵衣藻cc-849中,筛选得到能表达抗菌肽Cecropin B的转基因衣藻．经过6个月的保持培养后,进一步对转基因藻细胞提取液进行抗菌活性分析,发现转基因藻具有明显的抑制革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和溶壁微球菌)生长的特征．这一结果为具有抗菌活性的饵料藻的生产和应用提供了新的途径．     

人类PKNOX1基因一种新剪接型全长cDNA的克隆与表达分析

为了寻找新的Down’s综合征相关基因,利用生物信息学分析与实验技术相结合的方法,从定位于Down’s综合征关键区内(21q22．3)的EST(GenBank登录号H77399)出发,从人类睾丸组织cDNA文库内克隆到含同源盒结构域转录因子PKNOX1的一种新剪接型全长cDNA,命名为PKNOX1B,GenBank登陆号AYl42115。PKNOX1B基因跨越58．4kb,全长cDNA约2．8kb,有11个外显子和10个内含子,编码405个氨基酸残基的酸性蛋白质,分子量为44．628kDa,等电点6．28。PKNOX1B与PKNOX1的前9个外显子及9个内含子完全相同,由于PKNOX1B在第10与11外显子之间发生了差异剪接,以致其在3’端cDNA序列被截短约2kb,所编码的蛋白质在C端较PKNOX1短30个氨基酸残基。但PKNOX1B保留了与PKNOX1完全相同的同源盒结构域,因而它可能与其他含同源盒结构域基因家族成员一样参与了发育的遗传调控。RT-PCR结果显示PKNOX1B除骨髓组织外在人体组织广泛表达。在睾丸组织中PKNOX1可见5kb,2．9kb,2kb 3种转录本,而在其他组织中仅发现2个较大的转录本,2kb的转录本在睾丸组织呈现特异性的表达,它有可能参与了精子的发生过程。     

甲醇诱导模式对重组人白介素11发酵的影响

目的：建立一种在150L发酵罐中提高rhIL-11蛋白产出率的控制方法。方法：研究在毕赤酵母表达rhIL-11的发酵过程中,分别采用间歇法(甲醇浓度0．5%,每24h诱导一次)、分批补料法(甲醇补料速度在8h内从2．88ml/min提高至8．64ml/min)以及恒甲醇浓度法(利用甲醇浓度传感器检测并控制甲醇补料速度使甲醇浓度始终保持0．5%左右)的不同甲醇诱导模式,对工程菌生长及目的蛋白表达的影响。结果：采用间歇法的菌浓OD_(600)可达到80、rhIL-11表达浓度可达到0．1mg/ml;分批补料法的菌浓OD_(600)可达到240、rhIL-11表达浓度可达到1．0mg/ml;恒甲醇浓度法的菌浓OD_(600)可达到300、rkIL-11表达浓度可达到1．0mg/ ml。结论：rhIL-11蛋白产出率,恒甲醇浓度法(约0．12g/d·L)比间歇法(约0．01g/d·L)和分批补料法(约0．09g/d·L)都高,分别提高了12～13倍和30～40%。     

枯草芽孢杆菌群β-甘露聚糖酶基因克隆及同源性分析

本文对33株枯草芽孢杆菌群菌株进行β-甘露聚糖酶活性筛选,其中的32株具有β-甘露聚糖酶活性,只有1株无β-甘露聚糖酶活性.通过基因克隆测序的方法获得33株枯草芽孢杆菌群菌株β-甘露聚糖酶基因编码区全序列,对酶基因进行同源性分析并构建系统发育树;在β-甘露聚糖酶基因系统发育树中,33株枯草芽孢杆菌群菌株聚为3个分支,分别是枯草芽孢杆菌分支、地衣芽孢杆菌分支和解淀粉芽孢杆菌分支;枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌β-甘露聚糖酶基因种内同源性大于91%,而种间同源性为60%69%.     

赤泥自然成土过程及其微生物驱动机制

氧化铝废渣(赤泥)堆场生态修复的关键是赤泥土壤化.运用空间代替时间的方法,在未采取人工修复措施的赤泥堆场采集具有时间序列特征的赤泥样品,通过测定其理化生化指标及微生物群落结构变化,研究赤泥的自然成土过程及其微生物驱动机制.结果 表明:随赤泥泥龄的增加,其物理指标孔隙度、水稳性团聚体含量、团聚体平均重量直径提升,容重降低...     

真核细胞染色质结构的观察

用鸡红血球、人胚胎期胸腺细胞进行了染色质结构的研究。人陶腺细胞用PFA刺激,经72小时培养后,使一部分细胞处在分裂期。按Kleinschmidt法进行核酸释放,铜肉蘸取标本后使乾,用1.3％磷钨酸染色,或用金喷涂后,在电镜下观察。结果可见从分裂间期的鸡红血球中放出许多300(?)的螺管状结构(solenoid)。它们由于渗透压的作用而     

鸡Myostatin基因单核苷酸多态性与骨骼肌和脂肪生长的关系

肌肉生长抑制素是控制骨骼肌生长发育的重要细胞因子. 采用PCR-SSCP 和DNA测序的方法检测了Myostatin基因单核苷酸多态性, 利用CAU资源家系对所发现的Myostatin单核苷酸多态性与屠体重、胸肌重、腿肌重、肝重和腹脂重等性状进行了关联分析. 结果表明, P60/61位点基因型(AA, BB和AB型)对12周龄腹脂重、腹脂率、初生重、胸肌率有影响(P < 0.05): AA型腹脂重显著高于BB型(P < 0.05); AA和AB型腹脂率显著高于BB型(P < 0.05); AA型的初生重显著高于BB型(P < 0.05); AA型胸肌率显著高于AB型(P < 0.05). P80/P81位点基因型(CC, DD和CD型)与胸肌重(P < 0.05)和胸肌率(P < 0.01)相关: CC型与DD型之间的胸肌重差异显著(P < 0.05), CC型的胸肌重较高; CC型与DD型之间的胸肌率差异极显著(P < 0.01), CC型和CD型之间差异显著(P < 0.05), CC型比CD和DD型的胸肌率高, 而CD型的胸肌率也比DD型的高(P < 0.05). P93/94位点基因型(EF和EE型)与胸肌率有显著相关(P < 0.05): EF型比EE型具有更高的胸肌率. 研究表明, Myostatin基因的功能不但与骨骼肌的生长发育有关, 而且, 更重要的是可能参与脂肪的代谢与沉积.     

PPARγ在脂肪生成中的遗传和表观遗传调控

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPARγ)是脂肪生成和脂肪组织发育的关键调控因子,另外在糖脂代谢、炎症和免疫反应等多种生物学过程中也发挥重要作用。近年来,对PPARγ基因的研究一直是脂肪生物学研究的热点。随着研究的不断深入,人们发现PPARγ基因不仅受遗传调控,还受DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA和染色质重塑等表观遗传调控。本文综述了PPARγ基因在脂肪生成中的遗传和表观遗传调控研究进展,探讨了未来PPARγ基因调控的研究方向和趋势。     

黄土丘陵区土壤水分对黄刺玫叶片光响应特征参数的影响

在半干旱黄土丘陵区,以3年生黄刺玫(Rosa xanthina L.)植株为材料采用盆栽控水试验,利用CIRAS-2型便携式光合作用测定系统在8个土壤水分含量下测定了黄刺玫叶片的光响应过程。探讨了黄刺玫光合生理参数与土壤水分的定量关系及土壤水分效应等级划分问题。结果表明:黄刺玫的净光合速率(P_n)、光合量子效率(Φ)、水分利用效率(WUE)、胞间CO_2浓度(C_i)和蒸腾速率(T_r)对土壤水分都具有明显阈值响应特征。土壤相对含水量(RWC)在36.2%—81.2%范围内,黄刺玫在强光下的P_n和WUE水平较高,光合作用不会发生明显的光抑制。RWC为66.5%左右时,Φ与P_n达到最高水平,表现出较强的光能利用潜力;RWC为81.2%为时,T_r达最大值,RWC为44.5%时,WUE为最大值。依据黄刺玫叶片P_n、C_i、T_r和WUE与土壤水分的定量关系确定RWC在低于36.2%时为"低产低效"等级,在36.2%—44.5%之间为"低产高效"等级,44.5%—66.5%为"高产高效"等级,66.5%—81.2%为"高产中效"等级,在高于81.2%时为"低产低效"等级。     

DEU教学模式在临床护理教学中的运用

目的 探讨实习专用病房(Dedicated education unit,DEU)教学模式在临床护理实习教学过程中的应用效果.方法 选择2019年6月17日～2020年3月15日在我科实习的2017级护理大专班实习护生106名,按教学方法的不同进行分组,其中使用传统带教方式的为对照组,采用DEU临床护理教学方法的为实验...