利用改进的DDRT-PCR分离并鉴定水稻细胞缺铁胁迫相关cDNA克隆

利用改进的差异显示PCR(DDRT—PCR)技术从水稻细胞中分离与缺铁胁迫相关的新基因。在分离到的8个差异片段中,通过Northern杂交验证,其中5个为阳性。在这5个阳性片段中有3个是受缺铁胁迫抑制,有2个受缺铁胁迫诱导表达。对这些阳性片段的序列分析表明有3个(IDR2,IDR3,IDR8)为新基因。其中IDR2,IDR8是2个未知基因,IDR3通过GenBank搜索可以找到一些与它同源的已知基因片段。     

兴奋性氨基酸受体过度刺激和对抗其神经毒性的途径

谷氨酸受体在病理状态下的过度兴奋同神经系统的缺血性损伤和某些退行性变有密切关系。E.Costa等最近提出区别于谷氨酸受体正常功能的“受体滥用(receptor abuse)”新概念,要求针对受体病理性过度刺激所引起的、不同于正常生理效应的特异性胞内改变,设计对抗“受体滥用”的拮抗剂;这种药物应当既能选择性地阻断谷氨酸受体的病理性过度刺激,又不影响非损伤区谷氨酸受体的正常功能。Costa提出的新概念和治疗神经损伤的药理设计新思路,对神经损伤和退行性变的临床和实验研究颇有启发。     

湖蛙的染色体组性和Ag-NORs研究1)

我们采用改进的空气干燥法和Ag-NORs显带技术，分析了分布于新疆的湖蛙(Rana ridibunda pallas)的染色体组型、减数分裂及Ag-NOR。结果表明，湖蛙体细胞的二倍体染色体数目2n=26，由5对大型的染色体和8对小型的染色体组成。雌、雄个体间为发现异型性染色体的存在。Ag-NORs定位于第10对染色体长臂上的次缢痕处。在本次工作中，我们还发现，湖蛙除在伊犁外，博乐、乌鲁木齐市郊也有分布。     

miR-29a靶向调控PDGFB促进非小细胞肺癌细胞凋亡

为了探究miR-29a对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制,本研究通过荧光定量PCR检测肺癌组织、癌旁组织、肺癌细胞以及人正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B中miR-29a的表达,在肺癌A549转染miR-29a mimics后,使用荧光定量PCR和CCK-8法分别检测miR-29a的表达以及各组细胞的活力,使用流式细胞术检测A549细胞凋亡;通过荧光定量PCR检测肺癌组织、癌旁组织PDGFB m RNA的表达,采用Western blot检测PDGFB蛋白的表达;使用双荧光素酶报告基因检测miR-29a可能的靶基因;在肺癌A549细胞转染miR-29a mimics后继续转染PDGFB过表达质粒,通过qPCR和Western blotting分别检测PDGFB mRNA和蛋白的表达。结果表明,与癌旁组织相比,miR-29a在肺癌组织的表达显著下调(p<0.01),PDGFB在肺癌组织的表达显著增加(p<0.01);转染miR-29a mimics后,肺癌A549细胞中miR-29a表达显著增加(p<0.01);CCK-8法结果显示miR-29a mimics组A549肺癌细胞在24 h和48 h后细胞增值率较miR-NC对照组显著降低(p<0.01);流式细胞术结果显示miR-29a mimics组的细胞凋亡率较miR-NC对照组显著增加(p<0.01);与miR-NC+PDGFB 3’UTR WT组相比,miR-29a mimics+PDGFB 3’UTR WT组的荧光强度显著降低(p<0.01);荧光定量PCR和Western blotting显示miR-29a mimics+PDGFB组PDGFB m RNA和蛋白表达量与miR-29a mimics+vector组相比显著增加(p<0.01)。本研究结果表明miR-29a在肺癌组织和肺癌细胞株中低表达,及抑制PDGFB的表达并且促进肺癌细胞凋亡。     

一种改进的甩尾测试及其在针刺镇痛实验研究中的应用

疼痛作为主观的感受和体验,是一种复杂的生理心理反应。在动物实验中只能间接借助于由伤害性刺激引起的反应(“痛”反应)作为测量的标准。在针刺镇痛的动物实验研究中,采用不同动物、不同的测痛方法加以分析和比较,可以帮助我们得出比较全面的结论。本文报告一种改进的大白鼠辐射热甩尾测试方法,比目前国外习用的方法更