一种简单有效的克隆未知旁侧DNA片段的方法

操作含长插入片段的DNA克隆时 ,经常需要进行亚克隆和测序实验。通常的方法首先是得到插入片段的限制性内切酶谱 ,然后选择合适的内切酶消化DNA ,分离靶片段 ,将其连接入质粒载体中进行下一步操作。但这种方法工作量大 ,步骤繁琐。在此 ,介绍一种不需要做限制性内切酶谱分析 ,而根据靶片段的旁侧序列直接进行亚克隆实验的方法。首先 ,选择合适的限制性内切酶消化含长插入片段的DNA克隆 ,其中一种酶切在已知的旁侧序列上 ,另一为随机选择 ;然后酶切混合物与线性化的质粒载体连接 ,转化细菌得到一“亚克隆库” ;将其中的克隆挑选入 96孔板培养后 ,按行或列混合菌液得到相应的“pool” ;最后 ,用PCR方法筛选获得含靶DNA片段的阳性克隆 ,其中所用的引物一个与已知的旁侧DNA序列配对 ,另一个与质粒载体上序列配对 ,PCR扩增已知的旁侧DNA片段以鉴定阳性克隆。多次独立实验表明该方法简单有效 ,可广泛用于亚克隆和DNA步移实验     

龙须菜及其色素突变体藻胆蛋白的光谱及分子特征的比较

对龙须菜（Gracilaria lemaneiformis Greville）及其色素突变体藻胆蛋白吸收光谱进行了比较研究,结果显示不同藻株藻红蛋白的吸收光谱有显的变化,而藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的基本相同。我们克隆了龙须菜及其色素突变体的藻红蛋白亚基的部分基因序列,用该基因序列推导出的氨基酸序列进行分析以揭示这一变化的分子机理,结果显示除几个氨基酸残基的替换外,几株藻间的藻红蛋白的氨基酸序列十分相似,一些氨基酸的替换发生在决定藻红蛋白二级结构及亚基间相互作用的区域,可能会影响藻胆蛋白的构型及相互作用,导致光谱性质的变化。     

公立医院增设药事服务费的研究综述

新一轮医药卫生体制改革,提出了要探索有效方式,逐步改革以药补医机制,通过设立药事服务费等方式逐步改革或取消药品加成政策,同时采取适当增加政府投入、改革支付方式等措施,完善公立医院补偿机制。药事服务费的相关研究随之出现,但由于对药事服务费的定义存有不同理解,目前对药事服务成本的测算尚未有统一的方法。通过对药事服务费的概念及存在的争议、药事服务费的测算现况及存在问题的综述,有助于在总结现有不足的前提下,寻找新的思路。     

狂犬病毒核蛋白（NP）的纯化及其免疫原性的研究

对重组痘苗毒和重杆状病毒表达的狂犬病毒NP及原代地鼠肾细胞培养的狂犬病毒核衣壳蛋白（RNP）、先经Sepharose CL 4B分子筛柱初步提纯,再经抗狂犬病毒NP McAB 2C12-S-epharose 4B亲和层析柱纯化分离,经ELISA、SDS－PAGE电泳和Western-Blot分析证实,获得了高纯度和免疫反应性的NP和RNP。以相同剂量的纯化蛋白免疫小鼠,RNP和两种重组NP均可诱生特异的抗NP抗体,三种蛋白间无明显差异;狂犬病毒CVS株攻击保护实验结果显示,三种蛋白免疫的小鼠存活率约为50％;两种重组NP的免疫反应性和免疫原性与天然狂犬病毒RNP相似。     

湖北省公立医院成本补偿机制研究

目的 了解湖北省对公立医院的财政投入,医院收入比例及收支平衡情况。方法 根据财政投入及医院收支的相关数据,利用定性与定量分析,对比的分析方法,研究2007—2009年湖北省公立医院财政补偿情况及其收支的变化情况。结果 政府财政补助有所提高,年均增幅达到28.83%,但在医院收入中所占比例仅占7%左右,低于全国平均水平。公立医院医疗收入最高,占医院收入比例的50%左右。其次为药品收入,将近占到总收入的40%。医院收支基本保持平衡,但是大多负债率较高。结论 应该调整政府财政补偿力度与着重点,改变现有公立医院的收入结构,以保证公立医院健康稳定的发展。     

新农合支付方式改革对患者住院均次费用的影响研究

目的 通过多种形式的新农合支付方式改革,提高参保人群的受益程度,有效控制患者住院均次费用的不合理增长,促进医疗机构内部运行机制的转变,提高医保资金的使用效率。方法 采集不同类别的医疗机构,不同支付方式的住院均次费用的增幅数据,进行改革前后的数据分析。结果 改革前后各级各类医院住院均次费用的逐年增幅差距很大,利用支付方式综合改革后的各级各类医疗机构患者住院均次费用得到控制。结论 多种形式的支付方式改革是影响医疗机构内部运行机制、降低住院均次费用增幅的有效手段。     

变频工作制在医院管理实际工作中的应用

总结了变频工作制的3种模式,分析了变频工作制与弹性工作制、饱和工作制等人力资源管理模式之间的联系,阐述了变频工作制在医院的具体应用及在公共行政管理领域的应用,并提出了应用变频工作制需注意的问题。     

北衙金矿矿石内部可培养细菌多样性初步研究

目的对北衙金矿矿石样品内部的可培养细菌进行分离并对其多样性进行研究。方法采集云南北衙金矿矿石样品,采用固体肉汤培养基、卵黄培养基及厌氧琼脂培养基分离矿石内部的可培养细菌,并利用16SrRNA基因序列构建系统发育树,初步评估细菌多样性。结果北衙金矿矿石内部细菌的主要种群包括厚壁菌门和放线菌门的不同菌属,包括芽孢杆菌属、类芽孢杆菌属、考克菌属及节杆菌属的菌株,其中抗逆性较强的优势菌群为放线菌门的细菌。结论本研究证实北衙金矿矿石内部的确存在大量可培羔±田萧．并且右种群名样件．     

周六手术在医院运行管理中的价值和意义

目的 通过开展周六手术,缩短病人平均术前等待日及平均住院日。在保证医疗质量的前提下,达到提高效率,增加产能的目的。方法 在多部门协作的基础上,开展周六手术,改变原有人力配置方式和手术流程,以配合周六手术的进行。结果 手术流程再造后,与之前同期相比术前等待日缩短25.00%, 月平均手术台次增加12.35%, 病人平均住院日降低9.22%。结论 开展周六手术,能缩短患者平均住院日和术前等待日,为患者节约宝贵的时间和金钱,在一定程度上解决了患者看病难、看病贵的问题,提高了医院的工作效率。     

实施“优质护理服务示范工程”的实践探讨

目的 探讨“优质护理服务示范工程”的实施及影响。方法 树立“优质护理服务示范工程”护理服务文化理念,制定“优质护理服务示范工程”护理服务标准及实施方法。结果 提高了病人满意度及护理工作质量、健康教育覆盖率及合格率,增进护患感情。结论 开展“优质护理服务示范工程”, 能提高护理质量, 确保护理安全,能扩大医院的知名度, 提升护理服务的品牌。