花生45S rDNA和5S rDNA的染色体定位研究

对四粒红和蜀花四号花生材料进行了核型分析,四粒红为2B核型,核型公式为2n=4x=40=38m＋2sm（4SAT）;蜀花四号为1B核型,核型公式为2n=4x=40=40 m（2SAT）。利用双色荧光原位杂交技术,对45S rDNA和5S rDNA这两个材料有丝分裂中期染色体上的物理位置进行了定位分析。定位结果表明,四粒红有6对45S rDNA位点,位于A2L、A7S、A9L、B3L、B7S、B8L（A和B分别代表基因组A和基因组B,L和S代表长臂和短臂,数字代表染色体序号,下同）;2对5S rDNA位点,位于A3S和B3S;蜀花四号有5对45S rDNA位点,位于A2L、A9L、B3L、B7S、B9L;2对5S rDNA位点,位于A3S和B3S。花生的45S rDNA位点具有可变性,5S rDNA则相对保守。     

Fiber-FISH技术及其在植物基因组研究中的应用

Fiber_FISH(fiber based fluorescent in situ hybridization DNA纤维荧光原位杂交)是近年来发展起来的一项直接在DNA纤维上进行荧光原位杂交的技术,其分辨率和灵敏度可分别达到1～2 kb和200 bp。描述了Fiber_FISH的技术要点,念珠状信号形成的可能原因,以及这一技术在植物基因组研究中的应用。     

水稻中期染色体和DNA纤维的高效制备技术

水稻中期染色体和DNA纤维制备是水稻分子细胞遗传学研究中的关键技术。目前,这两个技术还有很多不足,该研究建立了高效制备水稻中期染色体和DNA纤维的方法。该方法制备的染色体,分裂相多、杂质少、背景清晰、染色体分散且形态好,水稻根尖分生组织细胞的分裂指数高达25％。植物细胞的细胞壁是制备DNA纤维的最大障碍,所以必须先提取细胞核,然后裂解细胞核释放出DNA纤维。在这个研究中,还建立了一个用刀切法分离细胞核,进而用SDS裂解核膜,用载玻片拖出DNA来制备水稻DNA纤维的方法。该方法制备的DNA纤维多呈平行的细线,背景清晰,伸展的程度均匀,适合于原位杂交。     

图像反卷积复原技术在玉米45S rDNA转录图式研究中的运用

由于成像焦平面外杂光的干扰,宽场荧光显微镜所得的图像往往较模糊,使其不适合用来观察植物细胞核内的精细结构。该实验讨论了反卷积软件中对图像复原结果有较大影响的几个重要参数的设置。经过合适的图像反卷积复原,由宽场荧光显微镜获取的玉米45S rRNA原位杂交信号图像得以清楚显示。对所得杂交图像的分析表明:玉米45S rDNA转录往往先发生在核仁外围,且随着核仁转录活性的提高逐渐向核仁内部扩散,并最终与5S rRNA一起,在核仁内部的空洞结构中形成成熟rRNA。研究结果显示,反卷积复原可有效提高宽场荧光显微镜所得二维图像的分辨率,从而使宽场荧光显微镜在植物细胞核内精细结构研究中发挥更多的作用。     

量子点在生物学中的应用

量子点是一种无机荧光材料,它具有独特的光物理特性,如其激发光谱宽且连续分布,而发射光谱呈对称分布且宽度窄,而且可通过改变量子点内核的尺寸对其发射光波长进行精细调节等。量子点的这些特性正引起人们日益广泛的关注,并在很多领域得到了应用。本文介绍了量子点的组成以及它的光学特性,同时介绍并讨论了近年来量子点在生物学领域应用的进展以及存在的问题。     

引物原位地高辛标记在绒毛细胞中快速检测Y染色体专性序列

本文报道了以人绒毛细胞为材料, 利用人类Y染色体特异片段的一对扩增引物Y~3|和Y~4|以地高辛(Digoxigenin)为标记物, 在玻片上进行细胞内引物原位延伸标记,进而快速检测Y染色体专性序列的实验结果。 Abstract:By using primers that generate DNA segments specific for the human Y chromosome,we have successfully carried out primed in situ Digoxigenin labeling at single-cell level on the glass slides.The extreme speed,simplicity and safey make it possible to be used to detect sex and diagnosis chromosome disorder.     

大麦45S和5S rDNA定位及5S rDNA伸展纤维的FISH分析

用荧光原位杂交技术对45S和5SrDNA在大麦(Hordeum vulgare L．)有丝分裂中期染色体进行了确定分析,较强的45SrDNA信号共有2对,分别分布在大麦的第1染色体的短臂和第2染色体的长臂。而5SrDNA则只有1对杂交信号,位于第3染色体的长臂,但信号较弱。用伸展DNA纤维的荧光原位杂交(Fiber—FISH)技术测定了5SrDNA在大麦的基因组中的拷贝数,计算出5SrDNA的拷贝数约为408～416。对大麦品种中rDNA位点数目的可变性进行了讨论。     

柳枝稷的生物学研究现状及其生物能源转化前景

柳枝稷(Panicum virgatum,L.)是起源于北美的一种热带草原高秆草,具有优良的草料特性和水土保持功能。因其有很大的能源利用前景,而目前全球能源紧缺,因此全世界范围内已有许多国家把研究柳枝稷转化生物能源这一利国利民的项目提到议事日程,展开了全方位的研究。这篇论文综述了柳枝稷的生物学研究现状以及其生物能源转化前景。     

水稻BAC在玉米有丝分裂染色体上FISH杂交体系的构建

 以水稻细菌人工染色体(BAC)为探针在玉米有丝分裂的细胞学制片上进行荧光原位杂交(FISH),探讨玉米基因组C_ot DNA对BAC探针重复序列的封阻、杂交后洗脱的严谨度、杂交液中FAD的浓度变化、水稻BAC探针的特异性重复序列的封阻对FISH杂交信号特异性的影响.初步形成了一套以水稻BAC探针在玉米有丝分裂染色体上进行BAC-FISH杂交的优化技术体系.研究结果表明：使用玉米基因组C_ot DNA来封阻水稻BAC探针的重复序列玉米基因组C _ot DNA的C_ot值应小于50,同时还需根据不同探针调整C_ot DNA的C_ot值及与探针的比例;而降低杂交液中FAD浓度和适度控制杂交后洗脱的严谨度,尤其是使用水稻BAC探针本身特异的重复序列的封阻对BAC-FISH杂交信号特异性的改善具有较好的效果.     

流式细胞术分析和分拣植物染色体

流式细胞术是当染色体、细胞核和细胞等颗粒随着流动的液体（水或缓冲液）通过一个测量点时,被探测器探测到,这样根据颗粒的物理和化学特征而将不同的颗粒分开并计数分拣的技术。流式细胞分析在人类基因组计划中发挥了重要作用,流式细胞技术的应用也适用于植物,目前这个技术应用范围包括流式核型分析,分拣纯化染色体,定位基因,构建文库等。文章综述了流式细胞术在植物基因组分析方面的研究进展。