全文获取类型
收费全文 | 161篇 |
免费 | 23篇 |
国内免费 | 72篇 |
出版年
2024年 | 4篇 |
2023年 | 11篇 |
2022年 | 11篇 |
2021年 | 9篇 |
2020年 | 14篇 |
2019年 | 12篇 |
2018年 | 11篇 |
2017年 | 8篇 |
2016年 | 5篇 |
2015年 | 6篇 |
2014年 | 9篇 |
2013年 | 13篇 |
2012年 | 9篇 |
2011年 | 17篇 |
2010年 | 14篇 |
2009年 | 11篇 |
2008年 | 16篇 |
2007年 | 13篇 |
2006年 | 7篇 |
2005年 | 11篇 |
2004年 | 12篇 |
2003年 | 3篇 |
2002年 | 1篇 |
2001年 | 4篇 |
2000年 | 5篇 |
1999年 | 8篇 |
1997年 | 2篇 |
1996年 | 2篇 |
1994年 | 1篇 |
1992年 | 1篇 |
1991年 | 1篇 |
1990年 | 1篇 |
1984年 | 2篇 |
1983年 | 2篇 |
排序方式: 共有256条查询结果,搜索用时 0 毫秒
141.
142.
尿苷-胞苷激酶作为生物体核苷酸代谢补偿途径中的重要催化剂,可以催化胞苷的磷酸化反应合成5′-胞苷酸 (简称胞苷酸),但需要NTP作为磷酸供体。为了提高胞苷酸的生产效率,文中首先使用大肠杆菌分别异源表达来源于嗜热栖热菌Thermus thermophiles HB8的尿苷-胞苷激酶和来源于类球红细菌Rhodobacter sphaeroides的聚磷酸激酶,其中尿苷-胞苷激酶用于催化胞苷和ATP形成胞苷酸,聚磷酸激酶则用于ATP的循环再生。然后,使用D403金属螯合树脂吸附Ni2+形成固定化载体,再利用固定化载体特异性吸附重组酶形成固定化酶。最后,单因素优化实验确定固定化酶的催化反应条件,在30 ℃、pH 8.0的条件下,以60 mmol/L胞苷和0.5 mmol/L ATP为底物,可实现5批次的高效连续催化反应,胞苷酸平均摩尔得率达到91.2%。上述制备方法反应成本低,产物得率高,酶利用率高,在工业生产中具有较好的应用潜力。 相似文献
143.
T-bet特异表达于胸腺细胞和Th1细胞,参与调控机体的免疫应答。随着众多学者对该转录因子研究的深入,发现T-bet的表达与Th1/Th2比例失衡有着密切的关系。而Th1/Th2正是目前哮喘发病机制的研究热点。就转录因子T-bet与Th1/Th2及哮喘的关系作一综述。 相似文献
144.
145.
目的:克隆杜氏盐藻硝酸盐还原酶(NR)基因5′上游序列,并对其功能进行分析。方法:利用BamHI、EcoRI、HindIII、PstI、SalI、Xbal6种限制性内切酶分别酶切盐藻基因组DNA,并与接头连接,构建成盐藻基因组步行文库。采用LA-PCR方法,从上述盐藻步行基因组文库中扩增NR基因5′上游序列,测序并进行分析。为检测其表达特性,构建了该片段与GUS嵌合基因的表达载体pNR-GUS,通过电击法将所构建的重组表达载体转化盐藻,组织化学染色法观察GUS的表达。结果:从盐藻基因组步行文库中扩增出约1200bp特异片段,序列分析表明5′上游序列含有启动子的特征性序列。GUS瞬时表达染色结果显示,该DNA片段具有硝酸盐诱导和铵抑制的启动子活性。结论:所克隆的盐藻的5′上游序列可能是一种具有“开关”活性的可控性启动子。 相似文献
146.
147.
根据玉米,水稻等物种泛素序列设计一对简并引物.提取杜氏盐藻细胞的总RNA,利用RT-PCR方法扩增盐藻泛素基因的cDNA片断,回收两个长度不同的片断ubi-1和ubi-2,将其克隆到pMDl8-T载体上,测序后进行序列分析,为克隆杜氏盐藻泛素基因的cDNA序列并进行进化分析.结果 ubi-1经测序后得到一个完整拷贝(228 bp)和一个不完整的泛素cDNA序列(191 bp).Ubi-2经测序后得到两个拷贝(556 bp)和一个不完整的泛素cDNA序列(191 bp).盐藻3个不同拷贝泛素cDNA序列之间存在差异,但所编码氨基酸序列相同.盐藻泛素cDNA序列与其他物种的泛素cDNA序列具有高的同源(70%~85%),所推导的氨基酸序列与其他物种仅存在1~2个氨基酸的差异.进化分析显示,所分离的盐藻泛素基因与两个模式生物果蝇和衣藻的泛素基因共处一个进化支,彼此亲缘关系最近.盐藻泛素基因与其他物种的泛素基因可能来自共同的"祖先"基因.在进化中高度保守. 相似文献
148.
我们从1999年4月~2000年3月用伊曲康唑治疗花斑癣52例,获得满意疗效,现将结果报告如下 1材料与方法 1.1临床资料门诊选择经临床和真菌镜检确诊的花斑癣共52例. 相似文献
149.
限制性酶切片段差异显示及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
差异显示技术(DD)-PCR是一种研究基因表达差异的重要而应用广泛的方法,传统的差异显示法由于在PCR时采用Poly(T)引物和随机引物而导致较高的假阳性率和产物的近Poly(A)非编码区的大量扩增。改进后的限制性酶切片段差异显示技术(RFDD)-PCR采用ToqI酶切双链cDNA,连上特殊设计的接头,再用经特殊设计的特异性配对于接头的引物来扩增,因此能重点扩增编码区并能极大地消除假阳性率。由于扩增时引物就带有荧光或放射性核素标记,还使得差异显示条带的检测更为方便、灵敏。本简要介绍了该法的原理、步骤、应用及其优缺点。 相似文献
150.
桃蚜Myzus persicae(Sulzer)寄主广泛,是一种全球性的广食性害虫。为了探明不同桃树品种对桃蚜遗传分化的影响,我们采用微卫星分子标记技术对白油蟠桃,黄油蟠桃等7个桃树品种上的桃蚜进行遗传多样性研究。结果表明,7对微卫星引物在171个样本中检测到118个等位基因,平均每个位点有16.857个等位基因。不同品种桃树上桃蚜的遗传多样性较为丰富,表明种内存在着较大的遗传变异。种群间没有遗传分化或分化不明显,这可能是种群间存在着明显的基因交流而造成的,说明桃树品种间的差异对桃蚜的分化影响较小。 相似文献