淋病奈瑟菌肽基脯氨酰异构酶的原核表达及其作为候选疫苗的初步评价

【背景】淋病是我国主要的性传播疾病之一,感染淋病奈瑟菌可促进人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)的传播和感染。目前我国淋病发病人数呈上升趋势,随着多重耐药菌株的出现,亟须研发保护性疫苗来防治淋病的传播和感染。【目的】分析淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae, NG)肽基脯氨酰异构酶(peptidyl-prolyl isomerase, PPIase)蛋白的高级结构和表位,探讨其作为疫苗和分子诊断靶点的潜力。【方法】利用生物信息学软件分析PPIase蛋白的极性、亲水性、柔韧性、表面可及性、二级和三级结构,以及T、B细胞表位等;用pET32a(+)质粒构建PPIase蛋白的原核表达系统并纯化蛋白,用纯化的重组蛋白和超声波破碎的NG全菌抗原分别免疫BALB/c小鼠,收获免疫血清;制备NG全细胞抗原,分别以全细胞抗原酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)和间接免疫荧光试验检测重组PPIase蛋白血清抗体与NG全细胞表面抗原的结合情况。【结果】生物信息学分析结果显示,...     

流苏树与美国流苏形态及解剖结构研究

为流苏树属不同种之间的分类研究及杂交育种提供依据,以流苏树和美国流苏为试验材料,观察自然状态下叶片和花的形态差异,并使用扫描电镜对叶片和花粉进行解剖学和孢粉学的比较研究.试验结果为:(1)流苏树与美国流苏在形态学特征上存在一定差异,两者的叶长、叶宽、叶柄长及花瓣长均呈显著性差异.(2)流苏树和美国流苏的叶表面均具蜡质纹...     

重组PCR技术的应用及优化

重组PCR是通过DNA重叠序列的衔接作用,使多个DNA分子融合在一起的体外扩增技术。它使基因全序列的拼接、基因融合、基因破坏及启动子交换等DNA操作变得简单易行。如今重组PCR已成为DNA分析的有效利器。本研究通过重组PCR在分子进化、基因敲除及基因敲入、启动子研究和转基因植物转化载体的构建等方面的实际应用,分析了该技术的影响因素,并针对引物设计、DNA碱基重叠长度、温度参数等重要反应条件提出了优化方案。     

同步辐射(软X射线)辐照玉米的细胞学效应研究

利用同步辐射(软X射线)辐照玉米自交系H65和H14D种子,研究其M1代的细胞学效应,并以60Co-γ射线作对照。结果表明,软X射线辐照处理后,不仅能够诱发玉米M1代根尖细胞内核畸变和染色体畸变,而且还能够诱发染色体多种类型的变异,其变异频率随辐照剂量的增加而增大,辐照剂量与细胞总畸变率呈正相关。软X射线对玉米根尖细胞的有丝分裂具有明显地抑制作用,辐照剂量与细胞分裂指数呈负相关。软X射线辐照的细胞学效应与γ射线基本相似,但在诱发的细胞畸变率和染色体变异类型上存在一定的差异。两个供试品系对辐射的敏感性为H14D>H65。     

也西湖噬藻体的分离与鉴定

【背景】噬藻体是一类特异性侵染蓝藻的病毒,广泛存在于淡水和海水水体中,参与调控宿主蓝藻的丰度和种群密度,被认为是潜在的蓝藻水华生物防控工具。但目前的研究多集中于海洋噬藻体,对淡水噬藻体的生物学特性和结构生物学等研究较少。【目的】分离更多种类的淡水噬藻体,为研究淡水噬藻体的三维结构、侵染机制、与宿主的共进化关系,及其在蓝藻水华防治中的应用提供理论基础。【方法】采集中国科学技术大学西校区内景观湖也西湖水华暴发水域的水样,利用液体培养基和双层固体平板法对17种宿主蓝藻进行筛选,通过NaCl-PEG沉淀法和氯化铯密度梯度离心分离和纯化噬藻体,并利用负染电镜观察噬藻体的形态,同时采用梯度稀释法测定裂解液的效价。【结果】发现也西湖的水样可特异性侵染本实验室分离自巢湖的一株拟鱼腥藻Pan。侵染后的裂解液中存在4株形态各异的噬藻体,包括1株短尾噬藻体和3株长尾噬藻体,其中包括首次发现的1株含有非典型长轴状头部结构的淡水噬藻体。【结论】也西湖作为巢湖流域的一个小型水体,具有与巢湖类似的水华蓝藻及其噬藻体分布谱,因此可以用于模拟大型湖泊进行相关分子生态学和生物防控的研究。     

2种方法提取绒毛香茶菜精油成分及体外抗氧化能力的比较研究

分别采用微波辅助水蒸气蒸馏法和超声波辅助水蒸气蒸馏法,从新鲜的绒毛香茶菜叶片中提取精油,用GC-MS对精油化学成分进行测定,且对比了2种不同方法提取的精油对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基的清除能力。结果表明:微波辅助水蒸气蒸馏法优于超声波辅助水蒸气蒸馏法,提取率达到0.56%。绒毛香茶菜精油主要成分为烯烃类及酮类,2种方法提取的绒毛香茶菜精油成分中,4-羟基-4-甲基-2-戊酮最多(相对含量在23.23%～42.53%之间),其次是α-萜品烯、萜品油烯、双戊烯和D-柠檬烯。在不同的抗氧化能力评价体系中证实,2种方法提取的绒毛香茶菜精油在(200～1 000)μg/mL浓度梯度范围内均有较强的抗氧化活性,且与精油浓度梯度成正相关。综上所述,2种提取法所得绒毛香茶菜精油的提取率、成分、含量及抗氧化活性等方面均存在一定差异,为绒毛香茶菜精油的深入研究提供了理论基础。     

抗稻瘟病基因Pi2的基因特异性KASP标记开发与应用

水稻稻瘟病抗性基因Pi2是一个对稻瘟病生理小种具有广谱抗性的基因,对于水稻的稻瘟病抗性育种具有非常重要的应用价值.为提高Pi2的选择效率,本研究根据高抗稻瘟病品种黄广油占与高感稻瘟病品种广陆矮4号在Pi2基因的第787位、第788位密码子上的变异GCA GGA/GTG TTA,基于竞争性等位基因PCR(KASP,kom...     

巨噬细胞溶酶体消化力的研究 Ⅱ.体外培养下小鼠腹腔巨噬细胞溶酶体消化力的形态学检测

巨噬细胞具有吞噬异物和消化异物的能力,两个过程意义也不相同。如果只能吞噬异物(包括微生物),而不能或不适当消化和降解异物,必将有害于机体,引起甚至加重疾病。临床和实验研究中有关人体和小鼠巨噬细胞的吞噬活动(吞噬率及其指数)作为免疫学指标已运用很多,但只有在检测吞噬指标的同时进行溶酶体消化力的观察,才可能全面认识巨     

长鞭恙螨亚属在中国的发现及其一新种的描述(蜱螨亚纲:恙螨科)

长鞭恙螨亚属Lorillatum由Nadchatram(1963)建立之初,归在纤恙螨属Leptotrombidium中,后来,Vercammen-Grandjean(1968)将其改归翼手恙螨属Chiroptella,至1971年,V.-G.和Longston二氏才将其提升为属;温廷桓(1984)鉴于一直归属置疑的通什恙虫Trombicula(?Trombicula)tungshihensis Hsu and Chen,1964的某些重要特征介乎长鞭恙螨属与翼手恙螨属之间而较接近前者,为此将可考虑建立一个亚属,但当时认为仍只能置疑。赵善贤(1985)研究了较大量的通什恙虫的海南岛标本     

喀喇昆仑山-西昆仑山地区土壤元素的自然含量特征

本文对喀喇昆仑山-西昆仑山地区土壤中23种元素的自然含量进行了论证。用对比和区域分异系数的方法,讨论了本区土壤元素在世界、我国和区域内的异同和分异特征。通过相关分析和主成份分析,揭示了土壤元素的共生组合关系和表现在土壤类型上的聚类特征,进一步说明了元素在本区土壤中的相关性和分异特征。