基于应用的基础微生物学实验教学模式的设计与探索

为提高学生学习的积极性并更好地将微生物学基本技能与科研和生产实践接轨,将应用性、趣味性兼顾的小型科研课题融入教学过程来加深学生对微生物学基本技能的理解,并提高学习的兴趣。通过自选课题的创新性、实验设计的严谨性及结果分析的全面性对学生的综合素质进行评价。这些改革为提高学生对基础微生物学实验的兴趣,加深学生对基础实验技能的认识,同时也为筛选真正对微生物学具有浓厚兴趣的优秀学生做出了有意义的探索。     

一种改进的丝状真菌DNA提取方法

以丝状真菌雅致枝霉(Thamnidium elegans)和深黄伞形霉(Umbelopsis isabellina)为材料,使用优化的CTAB法提取基因组DNA.改进后的方法使用液氮冻融以及玻璃珠振荡的方法代替了传统的液氮研磨,所需茵体量少,而得到的基因组DNA比用传统的CTAB法得到的基因组DNA产率高,纯度好、且步骤简单,适用于一次微量提取多个样品的基因组DNA.这种方法得到的基因组DNA可用于大部分分子生物学基本实验如PCR和DNA的酶切等.     

上海地区HIV毒株基因亚型分布及原发基因耐药的分子流行病学研究

本文通过对未经抗病毒治疗患者的人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）毒株进行检测,了解上海地区HIV-1的亚型分布及原发耐药基因变异现状。对118例未经治疗的HIV感染者其标本中HIV蛋白酶全长和部分反转录酶基因进行反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增,经DNA测序后进行系统进化树分析和重组分析,以确定HIV-1基因亚型和重组体,并与斯坦福耐药数据库比对,了解耐药性突变位点。使用斯坦福REGA HIV亚型分型工具和美国国立生物技术信息中心（NCBI）HIV亚型分析工具分析亚型,获得118例患者的HIV基因序列,基因分型分别为CRF01_AE重组体57例(48.3%)、B亚型36例(30.5%)、CRF07_BC 15例 (12.7%)、CRF08_BC 7例(5.9%)、C亚型2例(1.7%),亚型间或重组体间二重重组体(B/CRF01_A E)1例(0.8%)。蛋白酶抑制剂(PI)和反转录酶抑制剂相关的耐药基因突变率达54.2%（64/118）,其中2例（1.7%）发生PI耐药,基因突变位点：M46L、Q58E。5例(4.1%)对反转录酶抑制剂产生耐药,其中对核苷类反转录酶抑制剂（NRTI）和非核苷类反转录酶抑制剂（NNRTI）的耐药率分别为3例(2.4%)和5例(4.1%)。基因突变位点：NRTI为M41L、D67N、T69I/N/S、K70L、L74V、V75L、V118I、M184V、L210W/F/M/S和T215F;NNRTI为V90I、L100V、K103R/N、V106M/P/I/G、E138G/A、V179E/D/T、Y181C、G190A、H221Y、F227L、K238S和Y318F。结果提示,上海地区HIV毒株以CRF01_AE重组亚型为主,且发现新的重组体,可能出现新重组体流行的趋势。PI和反转录酶抑制剂相关的耐药基因突变率较高,且存在高度原发耐药毒株,应加强HIV-1耐药基因变异监测,科学、合理地给予抗病毒治疗。     

PELA微球乙型肝炎疫苗的免疫原性研究

将疫苗包裹在可生物降解的微球中则一种极有潜力的新型疫苗载体系统。用聚－ＤＬ－乳酸－聚乙二醇共聚物（ＰＥＬＡ０为材料,包裹乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ０,缓释微球疫苗,以皮下注射或口服的方式免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,研究其免疫原笥。同时以乙肝常规铝佐剂疫苗免疫两剂作为对照。结果表明,皮下注射单剂微球疫苗后,在第１４周,小鼠血清ＩｇＧ滴度可达到与铝佐剂疫苗组相当的水平,维持较高的滴度;此外,口服微球疫苗组     

深黄被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因在大豆中的表达

为在传统的油料作物大豆中产生γ 亚麻酸 ,从深黄被孢霉中克隆的Δ6 脂肪酸脱氢酶基因与植物表达载体pBI12 1连接 ,构建了重组质粒pBMICL6 ,采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统成功的将该基因导入到栽培大豆吉林 35、吉林 4 3、吉林 4 7、绥农 10、绥农 14和黑农 37等品种中 ,获得一批转基因植株。经PCR检测和Southern杂交分析 ,证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组中。Northern杂交结果表明该基因在转基因大豆的mRNA水平上获得表达。对转基因大豆种子进行脂肪酸成分分析 ,结果表明Δ6 脂肪酸脱氢酶基因获得表达 ,产生了γ 亚麻酸 ,其含量最高可达 2 7 0 6 7% ,这是国内外深黄被孢霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因在大豆中表达的首次报道     

维吾尔医常用药材-芹菜籽挥发油化学成分的研究

利用水蒸气蒸馏法提取维吾尔医常用药材芹菜籽挥发油成分,运用气相色谱-质谱-计算机联用技术,结合标准谱库,从检出的12个化合物中共鉴定了10个成分。其中主要成分为γ-萜品烯、1-甲基-2-异丙基苯、2-甲基-5-异丙基苯酚、邻苯二甲酸正丁基异丁基二酯、邻苯二甲酸二酯、α-宁烯等,其中γ-萜品烯、1-甲基-2-异丙基苯、2-甲基-5-异丙基苯酚的含量较高,占挥发油成分总量的86．84％。检出成分占挥发油成分的98．7％。     

ICP-OES测定铁皮石斛干花中多种元素

用微波消解和马弗炉灰化消解分别处理云南、浙江、霍山三种产地的铁皮石斛干花,再用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)定量分析多种元素含量,构建一种快速测定石斛干花元素含量的方法。结果表明,微波消解结合ICP-OES测出三产地石斛花存在常量元素K、Ca、Na、Mg和微量元素Se、Co、Cu、Mn、Fe、Cr、Sr、Zn、B,且含量均高于马弗炉消解结合ICP-OES测定结果;有害元素As、Pb、Cd、Hg和潜在有害元素Sb、Ba、Sn、Al、Ni均未检出;内标回收率均在92.5%-110.0%之间,相对标准偏差(RSD)<10%。试验探究出微波消解和ICP-OES的结合不仅效率高,检测成本低,运行稳定且测定结果准确可靠,可用于铁皮石斛干花中多元素分析研究。     

抗四环素单链抗体基因的构建与序列测定

目的：构建抗盐酸四环素的单链抗体（scFv）基因。方法：以抗盐酸四环素单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA为模板,用RT-PCR法扩增全套抗体轻、重链基因;经重叠延伸反应,以编码柔性多肽（GIy4Ser）3的基因为接头,将轻、重链基因组装为完整的seFv基因,并克隆到pGEMT-Easy载体中进行测序分析。结果：所克隆的四环素scFV基因全长为735 bp,为VH-Linker-VL结构,VH基因为354bp,Linker为（Gly4Ser）3多肽的核酸序列,VL基因为336 bp。结论：构建了抗四环素的单链抗体基因,为进一步用于四环素的残留枪测奠审某础．     

儿科学临床见习教学的困境与对策

目前,我国医疗教育已经受到了社会各界的重点关注,各大医学院校已经将见习教学提上日程,而儿科学临床见习教学中困难重重,还需要掌握其中的问题,并将其改进,这样方能够提升临床见习教学的质量。本文从儿科学临床见习教学的困难入手,提出了教学资源匮乏、教学方法落后和缺乏实践教学三方面问题,并针对问题提出了相应的解决方案,最后在保证临床见习教学质量方面给出了建议,望对儿科学临床见习教学有所帮助。