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目的:建立一种从废弃胚胎中提高囊胚形成率和质量的培养体系,寻找多种促进内细胞团(ICM)数目增多、贴壁、增值的方法,提高人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)建系效率,建立人胚胎干细胞库。方法:将179枚IVFDay3废弃的胚胎放入优选培养体系中培养(G2.5培养液中添加10%人血清蛋白,人白细胞抑制生长因子(hLIF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF))。到Day7将形成的囊胚全部用机械法分离ICM,接种于丝裂霉素C灭活处理的原代小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)上,培养8-9天,每4-5天传代1次。结果:优选培养体系的囊胚形成率为29.1%(52/179),其中A级囊胚形成率为11.2%(20/179),50个ICM贴壁生长,20个出现克隆形态,成功建立11株hESC(FY-hES-11至FY-hES-21)。11株hESC均具有共同的多能性生物学特性。结论:优选培养体系可以明显提高囊胚形成的质量,促进ICM的增值,纯熟的机械切割法可以避免损伤ICM并提高其贴壁率,原代灭活的MEF饲养层可以明显促进细胞增殖。 相似文献
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【目的】通过小鼠的急性毒性、30 d喂养及细菌移位试验,对马奶及其制品(酸马奶)中分离出来的7株肠球菌属乳酸菌进行初步安全性评价。【方法】分别对小鼠连续7 d及30 d灌胃不同剂量的肠球菌JHZ9、JHZ15、JHZ17、JHZ22、JHZ25、JHZ28、JNN1,对其一般体征进行观察,记录体重和食物摄入量,最后进行大体解剖,观察肝、肾、脾、心、肺并称重,同时进行细菌移位试验。【结果】除30 d喂养中,试验菌株JHZ17的高剂量组与生理盐水组差异显著(P0.05),7 d急性毒性试验及30 d喂养试验中各试验组小鼠体重、食物摄入量与对照组相比无显著性差异(P0.05),30 d喂养后小鼠各脏器(心、肝、脾、肺、肾)指标与对照组无显著性差异(P0.05),小鼠的经口急性毒性最大耐受剂量(MTD)大于1010 CFU/(mL bw)20 mL/(kg·d),属无毒级别,未发现细菌移位现象。【结论】肠球菌JHZ9、JHZ15、JHZ17、JHZ22、JHZ25、JHZ28、JNN1安全,无毒副作用。 相似文献
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Y染色体短串联重复序列(Y-short tandem repeats, Y-STRs)已被广泛应用到DNA检验领域。然而,由于Y染色体存在较高的结构突变率,可能会导致部分Y-STR等位基因丢失甚至产生特殊的缺失模式,从而影响其在法医学中的应用。位于Y染色体长臂的无精子症因子(azoospermia factor, AZF)与精子发生有关,该区域微缺失可导致不育症。然而Y染色体微缺失人群是否存在特殊的Y-STR缺失模式仍有待研究。本文利用法医学上常用17个Y-STR探讨了85例Y染色体微缺失患者的Y-STR缺失模式。结果显示,单纯AZF a区缺失样本,均存在DYS439-DYS389I-DYS389II基因座无效扩增情况;单纯AZF b区或单纯AZF c区缺失样本存在DYS448基因座无效扩增;复合AZF b+c+d区缺失样本存在DYS385-DYS392-DYS448基因座无效扩增;复合AZFa+b+c+d区缺失样本存在DYS390-Y-GATA-H4-DYS385-DYS392-DYS448基因座无效扩增。因此,本研究结果提示Y-STR缺失模式与Y染色体微缺失有对应关系。 相似文献