促肿瘤转移蛋白AGR2研究进展

Anterior Gradient-2(AGR2)在一系列腺癌中都存在过表达,诸多证据表明,AGR2可以在胞外促进肿瘤的生长和转移。AGR2是一种分泌性蛋白而且可以在很多癌症患者的血清和尿液中检测到,因此AGR2是一个潜在的肿瘤检测分子标志物和肿瘤治疗靶标。分子生物学家陆续发现了一些AGR2潜在的结合靶标,这对阐明其致癌机制有着重大意义。本文就近年来关于AGR2的结构和功能以及将其作为肿瘤检测指标或治疗靶标的研究作一综述。     

以Cytb基因部分序列分析大额牛系统地位及其种群现状

对12头大额牛Cytb基因部分序列447bp进行分析,共发现33个变异位点,定义了4种单倍型;结合GenBank中牛属普通牛、瘤牛、牦牛和印度褐牛4个近缘种的Cytb基因同源区序列进行分析,以水牛作为外群,分别采用邻接(NJ)法和最大简约(MP)法构建分子系统发育树,得到基本一致的拓扑结构,结果表明大额牛是独立于普通牛、瘤牛和印度褐牛之外的Bos属的一个独立的种。同时还指出目前我国有相当比例的大额牛受到外来物种的入侵,我国的大额牛保护工作正面临非常严峻的考验。     

口蹄疫病毒O型中和抗体检测固相阻断ELISA方法的建立

【目的】为评价O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)灭活疫苗免疫后中和抗体(neutralizing antibodies,NA)水平,建立检测中和抗体的固相阻断ELISA (neutralizing antibodies solid-phase blocking ELISA,NA-SPBE)方法。【方法】本研究以本实验室前期制备的FMDV广谱反应性牛源单克隆抗体E32作为捕获抗体,以生物素标记的FMDV O型型内广谱中和牛源单克隆抗体C4作为检测抗体,经过条件优化建立了检测FMDV O型中和抗体的固相阻断ELISA方法,并对该方法进行了敏感性、特异性、重复性、交叉反应性与病毒中和试验(virus neutralization test,VNT)相关性等试验。【结果】抗体E32最佳包被浓度为0.5 μg/mL,O型FMDV灭活抗原最佳稀释浓度为0.25μg/mL,生物素标记抗体C4-Bio最佳工作浓度为0.06 μg/mL,链霉亲和素-HRP的最佳稀释度为1:40 000。以1.35 log₁₀作为效价判定临界值时,敏感性和特异性分别为97.14%和98.84%。利用该方法分别检测FMDV A型、FMDV Asia1型、BVDV、PRRSV、CSFV、PPRV抗体阳性血清时,均为阴性,未出现交叉反应。该方法批内和批间重复试验的变异系数均<10%,表明其重复性较好。利用该方法与VNT分别对160份血清样品进行检测,二者的相关系数r为0.807 5,P<0.000 1,相关性显著。【结论】该方法可以检测FMDV O型中和抗体,为FMDV O型灭活疫苗免疫效果评价提供有力技术支撑。     

鸭胚多肽对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响

实验研究鸭胚多肽对小鼠机体抗疲劳、耐缺氧能力的影响。实验设对照组和实验组(鸭胚多肽低剂量、中剂量和高剂量组),连续灌胃小鼠30 d后,测定小鼠负重游泳力竭至死时间,并测定小鼠游泳后血清中乳酸(LD)含量、尿素氮(BUN)含量、葡萄糖(LG)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性,小鼠常压耐缺氧存活时间、亚硝酸钠中毒存活时间、急性脑缺血性存活时间。结果表明:鸭胚多肽能显著增加小鼠负重游泳时间、血清中LDH活性、小鼠亚硝酸钠中毒存活时间及急性脑缺血性存活时间,并能显著降低LD、BUN含量。说明鸭胚多肽能有效提高小鼠的抗疲劳、耐缺氧能力。     

表达EGFP报告基因口蹄疫病毒亚基因组复制子的构建

【目的】构建含有EGFP报告基因的口蹄疫病毒(FMDV)亚基因组复制子系统。【方法】利用融合PCR方法,将EGFP报告基因替换O型FMDV全长c DNA克隆中的前导蛋白Lb和结构蛋白P1基因,构建含有EGFP报告基因的FMDV亚基因组复制子FMDV-EGFP。复制子质粒连续转化、测序检验复制子载体的稳定性。Not I线性化的复制子FMDV-EGFP用脂质体介导法转染表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞后,不同时间段观察EGFP荧光表达情况。转染的细胞用流式、间接免疫荧光、RT-PCR和Western blot检测该复制子载体的自主复制能力和口蹄疫病毒蛋白的表达情况。【结果】复制子质粒的连续转化及测序表明报告基因可以稳定存在。FMDV-EGFP复制子转染BSR/T7细胞3 h后在荧光显微镜下能够看到绿色荧光,EGFP荧光信号随着转染时间的延长逐渐增加,并且荧光信号可持续6 d以上。转染24 h后的细胞流式分析显示转染的细胞中有6.0%发出荧光,说明构建的复制子载体能够有效表达EGFP蛋白。另外,间接免疫荧光、RT-PCR和Western blot方法也检测到该复制子RNA在BSR/T7细胞中能够进行自主复制,并且能够表达病毒的非结构蛋白。【结论】含有EGFP报告基因的FMDV亚基因组复制子的成功构建为进一步研究病毒复制、翻译机制及筛选抗病毒药物等奠定了坚实的基础。     

DLPFC在MCI患者和正常老年人归纳推理过程中的作用: 一项fMRI研究

以往对青年人被试的研究发现, 左侧背外侧前额(DLPFC)在归纳推理过程中起着非常重要的作用. 本研究使用功能磁共振成像(fMRI)考查这一脑区是否也在轻度认知障碍(MCI)患者及正常老年人进行归纳推理时被显著激活, 以及MCI患者和正常老年人在激活模式上是否存在差异. 实验结果发现, 与正常老年人相比, MCI患者在行为数据(反应时和正确率)和DLPFC的激活模式上没有差异, 但MCI患者DLPFC的BOLD信号强度低于正常老年人, 双侧DLPFC的功能连接强度显著高于正常老年人. 这可能是由于MCI患者在DLPFC的功能减弱, 因而需要加强与对侧脑区的协同来完成认知加工. 总之, 这一结果表明, 与青年人一样, DLPFC在老年人的归纳推理中也起着重要作用, 而且DLPFC功能的改变可能是一个先于影像学形态结构改变的MCI的早期诊断标记.     

海藻糖合酶产生菌筛选、鉴定及目的基因克隆

目的:为筛选出一株产海藻糖合酶的菌株,并以此菌的全DNA为模板,克隆出产海藻糖合酶的目的基因片段。方法:实验过程中采用了常规筛选菌种、快速提取细菌全基因、显微镜观察菌种、热启动PCR技术、电泳纯化回收基因片段、EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定目的基因片段等方法。结果:在电镜下可观察到有芽孢、杆菌;菌株16S rRNA基因扩增产物共计1490个碱基;PCR方法扩增出阳性克隆大约1700bp的基因片段。结论:通过生理、形态、结构特征分析及16S rRNA基因全序列比较得出结论:筛选到一株短小芽孢杆菌;PCR扩增出阳性克隆片段,全长1722bp,为实验所要的编码海藻糖合酶的基因片段。     

甘薯体细胞胚的发生和植株再生

本文概述了甘薯体细胞胚发生和植株再生的研究现状及存在的问题。     

持久性有机污染物的植物修复

简要介绍了持久性有机污染物,重点分析了植物对去除环境中持久性有机污染物的修复机制,指出了植物修复技术存在的问题和今后的发展方向。