Bloom解旋酶突变体的克隆与表达

blm基因的突变可导致Bloom综合症(BS),Bloom综合症是一种罕见隐性常染色体遗传疾病,患者遗传不稳定并易患多种类型癌症。临床发现BS患者细胞中的BLM的RecQ-Ct区域的1 036位半胱氨酸残基发生突变。运用生物信息学及分子生物学技术,通过两轮重组PCR,构建985位和1 036位氨基酸突变的BLM解旋酶多点突变基因,克隆到载体pET-28a中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。分离纯化获得了高纯度(>95%)的双突变型BLM解旋酶,并对其进行了Western blotting鉴定。这些结果可为进一步研究BS的致病机制奠定基础。     

颗粒酶B和胱天蛋白酶-3对肌动蛋白水解作用的体外研究

已知凋亡过程的基本变化之一是细胞骨架的异常,后者在某种程度上决定凋亡细胞的形态学特征.为揭示凋亡相关蛋白酶--颗粒酶B和胱天蛋白酶-3对胞浆型肌动蛋白的水解作用,采用成年猕猴脑组织粗提物作为无细胞体系,以外源性颗粒酶B触发凋亡途径的终末反应.经一系列免疫印迹分析发现:孵育12 h方见β-肌动蛋白被剪切,产生41 ku和15 ku水解片段,并证明该水解反应为颗粒酶B依赖;颗粒酶B活化的内源性胱天蛋白酶-3和重组胱天蛋白酶-3均不能水解脑提取物中的β-肌动蛋白,尽管胱天蛋白酶-3可作用于纯化的肌动蛋白,产生15 ku片段.以上结果提示,内源性β-肌动蛋白对凋亡相关蛋白酶,尤其胱天蛋白酶-3不敏感,这可能与该蛋白质的空间结构特征或脑组织中存在的某种蛋白酶抑制因子有关.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒orf7和orf5双基因的原核表达研究

根据PRRSV已知序列设计两对引物,采用RT-PCR方法分别扩增orf7和orf5基因片段。利用EcoRI、SpeI和HindIIl位点将orf7和orf5基因片段依次克隆到pMD-18T载体,构建成重组质粒pMDl8NE,并比较所克隆基因序列的同源性。将串联的orf7和orf5基因亚克隆到原核表达载体pGEX．KG,构建重组原核融合表达质粒pGEX．KGNE,并转化BL21,SDS．PAGE和Western．blot分析表明：orf7和orf5基因与GST获得了融合表达,并且表达的融合蛋白GST-NE具有免疫学反应活性,这为猪繁殖与呼吸综合征血清学诊断方法的建立及疫苗研究打下基础。     

中国大陆一苔类新记录种——糙叶拟蒴囊苔

报道了产自中国大陆贵州省的拟蒴囊苔属（Saccogynidium）一新纪录种——糙叶拟蒴囊苔[S. muricellum (De Not.) Grolle]。本种与刺叶拟蒴囊苔(S. irregularospinum Gao, Cao, & Lai)主要的区别特征在于侧叶先端具2枚短齿,齿仅由1个细胞组成;其腹叶先端的齿也较短。依据贵州的标本,提供了详细的形态描述和线条图。     

试题评价指标的程序设计

衡量教师教学与学生学习优劣的重要手段之一的考试制度,仍是教学工作的重要环节,如何来评价试题的好坏,根据统计分析原理,需计算难度与区别度两个主要指标,以往采用手工计算要花费教师的大量时间,如何解决这一问题,本文从这一实际需要出发,提出用计算机代替手工计算,既省时又准确,具有较好的推广价值。     

老年社区获得性肺炎患者TNF-alpha和sTREM-1 的表达及临床意义

目的:探讨老年社区获得性肺炎患者TNF-α和s TREM-1表达水平及其临床意义。方法:从我院选择48例社区获得性肺炎患者为CAP组(重症组和普通组),另选取对照组48例。收集两组患者的血浆及BALF,分别收集重症组患者住院后1天、4天的血浆和BALF,对比各组s TREM-1和TNF-α的表达水平。结果:对照组TNF-α和s TREM-1的表达水平均低于CAP组(P<0.05);重症患者的TNF-α和s TREM-1表达水平高于普通组和健康对照组(P<0.05)。重症患者TNF-α表达水平与对照组无显著差异(P>0.05),而s TREM-1表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TNF-α和s TREM-1表达水平与CAP的发病过程密切相关,其表达水平与CAP的严重程度呈正相关。     

三株口服液抗肿瘤作用的实验研究

三株口服液是一种复合生态制剂。它能杀死３７．３％体外培养的人体宫颈癌细胞（Ｈｅｌａ细胞）,杀死８３．０％小鼠白血病细胞（Ｌ１２１０细胞）。对小鼠移植性肿瘤Ｓ１８０有明显的生长抑制作用,抑瘤率达３１．１～５０．０％,的确是一种新型的医疗保健制剂。     

白细胞介素-11研究和开发进展

白细胞介素 １１是美国ＦＤＡ在１９９７年批准的第一个促血小板生成的细胞因子药品。本文就促血小板生成类细胞因子的Ｒ＆Ｄ、ＩＬ １１基因与蛋白结构、ＩＬ １１生物学活性、药学研究以及临床应用作一综述。     

基于红外相机技术的黑麂活动节律

动物的活动节律是行为生态学中的一个重要内容,它主要研究动物在不同时间内的活动强度及变化规律(原宝东和孔繁繁,2011).黑麂(Muntiacus crinifron)隶属偶蹄目(Artiodactyla)鹿科(Cervidae)麂属(Muntiacus),属国家一级保护动物,其分布范围十分狭小,目前该种群仅存于安徽、浙江、江西和福建4省,且栖息地成小种群岛屿状分布(盛和林,1987).     

BN P 的测定和临床应用的研究进展

B型利钠肽是一种具有利尿作用的内源性肽,其对早期发现心衰病人、心衰病人的分级、区分心衰及其他原因引起的呼吸困难、监测心衰治疗、提示心衰病人预后、识别有无左室功能不全及急性冠脉综合症的风险评估方面具有重要临床应用价值。本文主要介绍了B型利钠肽的测定及临床应用。