MALDI-TOF MS对肺炎链球菌鉴定与分型的应用

目的探讨MALDI-TOF MS对肺炎链球菌鉴定和质谱分型的应用价值。方法收集2009年1月至2013年5月温州医科大学附属第二医院临床分离的112株肺炎链球菌标本,采用Optochin敏感试验和全自动细菌分析仪对收集的菌株进行鉴定验证,并用Microflex MALDI-TOF质谱仪进行分析鉴定。根据质谱图的相似性进行细菌同源聚类树分析并构建质谱分型模型,采用荚膜肿胀试验对参与分型的菌株进行血清型比较。结果除20株不符合检测条件之外,92株临床菌株和1株标准株经质谱分析均为肺炎链球菌,选取的60株菌株以0.5的差异水平,将60株肺炎链球菌分为18个质谱型别,在这些菌株的血清分型中有19F、19A、23F、23A、3和14六个血清型别,分布于不同的MALDI-TOF MS分型中,其中19F有18株,占30%(18/60),分布在6种不同的MALDI-TOF MS分型中,也有3型血清型较为集中地分布于相应的MALDI-TOF MS一个型别里。结论 MALDI-TOF MS能快速、准确、简便地鉴定肺炎链球菌,且能达到种的水平。对比血清型,按照0.5差异水平,建立的18个质谱分型部分的型别与血清型有一致性,但也存有差异。     

镉通过引发氧化应激和线粒体损伤诱导PK-15细胞凋亡

镉（cadmium,Cd）是一种生物累积性的有毒重金属元素,能够在肾组织大量蓄积并引起肾发生病变和功能损伤。前期研究证实,Cd处理能够引起猪肾PK-15细胞的活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平升高和细胞死亡,但详细机制有待进一步研究。本研究以PK-15细胞为研究对象,通过CCK-8检测、透射电镜观察、DCFH-DA标记、JC-1染色、彗星实验和流式细胞术等研究手段,分别检测Cd处理后的细胞活性、形态变化、ROS生成、线粒体膜电位Δψm、DNA损伤及细胞凋亡情况。CCK-8实验结果显示,CdCl2处理后PK-15细胞活性下降,且呈时间和剂量依赖性;形态学观察发现,CdCl2处理引起PK-15细胞皱缩、变圆,细胞核固缩、染色质凝聚,线粒体肿胀、线粒体嵴减少或消失;荧光染色和流式细胞术检测结果显示,CdCl2处理引起PK-15细胞内ROS水平升高、线粒体膜电位Δψm下降和DNA损伤,最终导致细胞凋亡。Western印迹结果显示,CdCl2处理组中促凋亡蛋白质Bax表达量上调,抑凋亡蛋白质Bcl-2表达量下调,并且CdCl2处理组检测到了活化状态的裂解胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)。此外,ROS清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）缓解了CdCl2引起的线粒体损伤、DNA损伤和细胞凋亡。综上所述,Cd通过引发氧化应激和线粒体损伤诱导PK-15细胞凋亡。     

Ag－NOR在胸腹水细胞学诊断中的意义

采用核仁组成区嗜银蛋白（Ａｇ－ＮＯＲ）技术,对４０例胸腹水的患者进行细胞学观察研究。结果发现,良性病变胸腹水内细胞Ａｇ－ＮＯＲ计数在１．１～２．０之间,银颗粒小,大小比较均一。恶性病变Ａｇ－ＮＯＲ计数在４．３～６．２之间,银颗粒大,不规则。肉瘤与癌所致的胸腹水内细胞Ａｇ－ＮＯＲ颗粒数目未发现有明显差别。提示在临床病理工作中,Ａｇ－ＮＯＲ技术在胸腹水脱落细胞学检查中,对良、恶性肿瘤的鉴别诊断具有一定的实用意义。     

生地黄与熟地黄中5个苷类成分和总多糖的含量比较

建立测定地黄中梓醇、地黄苷D、益母草苷、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷及总多糖含量的方法,比较生地黄与熟地黄中成分含量的差异。采用HPLC法同时测定了生地黄和熟地黄中梓醇、地黄苷D、益母草苷、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量。采用UV法测定了生地黄和熟地黄中总多糖的含量。结果表明,生地黄炮制成熟地黄后,梓醇、地黄苷D、益母草苷和毛蕊花糖苷的含量均出现不同程度的降低,而异毛蕊花糖苷和总多糖的含量增加。本文所建立的同时测定梓醇、地黄苷D、益母草苷、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷含量的方法及总多糖的含量测定方法,可用于控制生地黄和熟地黄的质量。不同炮制方法对熟地黄中上述成分的含量产生一定影响。     

核素门控心肌灌注显像对乳腺癌化疗后心肌损害的早期诊断价值分析

摘要 目的：探讨核素门控心肌灌注显像（GMPI）对乳腺癌化疗后并发心肌损害的早期诊断价值。方法：选择2018年8月至2020年4月在徐州市中心医院接受化疗的乳腺癌180例患者,化疗方案均选择蒽环类药物（以注射用盐酸表柔比星为主）,进行6个周期（每周期为21 d）的治疗,在化疗前后对180例患者均行超声心动图及GMPI检测,并按照不同检测方式分为常规组（n=180）与研究组（n=180）,常规组采用超声心动图进行检测,研究组采用GMPI进行检测。于化疗前（A1）、化疗第2周期末（A2）、化疗第4周期末（A3）、化疗第6周期末（A4）分别行超声心动图及GMPI检测,观察两种检查参数在不同时间点的变化情况;对比两种检测方式对心肌损害的检出率差异;绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估两种检测方式对乳腺癌化疗患者发生心肌损害的早期诊断价值;再次绘制ROC曲线评估GMPI中具有显著变化的不同参数对化疗后发生心肌损害的临床诊断价值。结果：超声心动图参数显示随着蒽环类药物剂量的增加,左心室射血分数（LVEF）呈显著下降趋势（P＜0.05）,其他参数变化未见显著统计学差异（均P＞0.05）;GMPI参数显示随着蒽环类药物剂量的累积增加,LVEF呈显著下降趋势,相位标准差（SD）、相位直方图带宽（BW）、熵呈显著上升趋势（均P＜0.05）,其他参数变化未见显著统计学差异（均P＞0.05）;GMPI对乳腺癌化疗后发生心肌损害的检出率显著高于超声心动图（P＜0.05）;ROC曲线显示,GMPI对乳腺癌术后化疗后产生心肌损害的曲线下面积显著高于超声心动图（P＜0.05）;另一ROC曲线结果显示,相比于GMPI单一参数检测,联合参数检测对诊断乳腺癌化疗后出现心肌损害的曲线下面积显著较高（P＜0.05）。结论：相比于超声心动图,GMPI显像能更有效的在早期诊断出患者在化疗后是否发生心肌损害,且运用GMPI中的多参数联合检侧能进一步提高化疗后并发心肌损害的诊断率,可为乳腺癌化疗后心肌损害的早期诊断提供临床参考。     

不同来源标本中大肠埃希菌耐药率的比较分析

目的研究不同标本来源中大肠埃希菌的耐药谱,为临床用药提供治疗参考。方法对温州医学院附属第二医院2010年1月到12月患者送检的体液标本进行培养,用microcsan walkaway 96S微生物自动鉴定仪对菌种鉴定及药敏分析,结果用2分割法进行统计分析。结果分离出大肠埃希菌597株,其中痰液、脓液、血液、分泌物、引流液中分别分离出295、148、102、37、15株。所有分离株均对亚胺培南敏感,对氨苄西林、哌拉西林的耐药率最高。痰液分离株对氨曲南、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、妥布霉素及所有头孢类的耐药率显著高于血液分离株的耐药率(P<0.05);痰液分离株对氨曲南、氨苄西林/舒巴坦、除头孢他啶外的所有头孢类的耐药率显著高于脓液分离株的耐药率(P<0.05);脓液分离株对氨苄西林、哌拉西林、妥布霉素的耐药率明显高于血液分离株的耐药率(P<0.05)。痰液中ESBLs阳性率显著高于血液和脓液中ESBLs阳性率。产ESBLs的大肠埃希菌共316株,所占的比例为52.9%;痰液分离的ESBLs阳性株对四环素、环丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星、甲氧苄啶/磺胺呷恶唑、阿米卡星的耐药率显著低于脓液分离株的耐药率(P<0.05)。结论痰液分离的大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素的耐药率普遍高于脓液和血液分离株的耐药率,同时认识到该院抗生素的耐药现象很严重,临床上更加合理的使用抗菌药物。     

哮喘患者诱导痰和外周血CD3~＋CD56~＋NKT细胞的检测及意义

目的：研究CD3＋CD56＋NKT细胞在哮喘患者急性发作期诱导痰和外周血中的比例改变,并探讨其临床意义。方法：以28例哮喘急性发作期患者为研究组,22名正常人作为对照组,采用二色直接荧光素标记法和多参数流式细胞仪检测诱导痰和外周血CD3＋CD56＋NKT细胞的比例,同时检测外周血IL-4、Ig-E及INF-γ等水平。结果：哮喘患者急性发作期诱导痰和外周血CD3＋CD56＋NKT细胞明显高于健康对照组（P〈0.01）。哮喘患者急性发作期外周血IL-4、Ig-E及INF-γ等水平明显高于健康对照组（P〈0.05）。哮喘患者外周血中CD3＋CD56＋NKT细胞比例与IL-4、Ig-E及INF-γ升高成正相关。结论：哮喘患者急性发作期诱导痰和外周血中的CD3＋CD56＋NKT细胞明显增高,CD3＋CD56＋NKT细胞可能通过调节IL-4、Ig-E及INF-γ等细胞因子从而在哮喘的发病机制发挥重要作用。     

利用冠层光谱估测烟草叶面积指数和地上生物量

综合多种烟草类型、品种及肥料处理因素,分析了17种光谱参数与烟草叶面积指数（LAI）、地上鲜生物重（AFW）、地上干生物重（ADW）的关系,建立逐步回归模型对烟草LAI、AFW、ADW进行估测并结合相关分析筛选出相应的特征变量。结果表明：5个回归方程的复确定系数R^2、回归系数相伴概率均达到显著水平。包含17个光谱参量的逐步回归方程筛选出的第一自变量均为Rg／Rr,相关分析及散点图分析亦得出Rg／Rr与LAI、AFW、ADW相关系数分别为0．759、0．611、0．647,R^2为0．576、0．3727、0．4184,均达到极显著水平,证明烟草LAI、AFW、ADW的特征变量为Rg／Rr。仅采用8种植被指数建立模型,证明利用比值植被指数（RVI）估测LAI、ADW亦是可行的。经过统计检验,建立的模型估测效果均较好,估测值与实测值的相关性均达到显著水平,其中包含特征变量Rg／Rr的回归模型估测效果优于RVI构建的模型。表明采用高分辨率光谱或宽波段光谱提取光谱变量可对烟草LAI、AFW、ADW进行监测,并可根据数据条件选择有效的估测模型,为烟草遥感数据分析提供方法。     

微生物自动化分析仪的毕业实习带教初探

对如何在微生物毕业实习教育中利用自动化仪器进行教学进行了初步探讨。从上机前的标本处理、正确使用仪器、仪器结果分析、认识仪器的局限性、发临床检测报告、利用VITEK软件的资料处理系统对医院感染进行监控和分析等 6大方面对学生进行培训。认识仪器鉴定的局限性和手工操作的重要性 ,把理论知识和实践工作有机地结合起来。     

水杉史话

1941年冬,原中央大学森林系的干铎教授首次在四川省万县的谋道溪镇(又称磨刀溪镇,现归属于湖北省)附近见到了几棵参天大的水杉树,直到1946年12月,我国著名植物分类学家胡先骕在出版的《Bulletin of the Geological Society of China》中,首次著文宣称,在四川省万县发现了水杉活的植株。此后,胡先骕和郑万钧又于1948年4月,在静