植物内生固氮菌

植物内生固氮菌的发现和研究显现了一个新的固氮系统,深化了根际联合共生固氮的研究。文章综述了10年来植物内生固氮菌的研究进展,并探讨了内生固氮菌进入植物体内的方式和行使固氮功能的可能性。     

联合固氮

1定义氮素是构成生命物质最重要的元素之一。自然界只有某些微生物能直接将大气中的氮透过固氮酶还原成NH,这类微生物包括细菌,蓝绿藻、放线菌等。在固氮的细菌中有一类属于自由生活的类群,它们定殖于植物根表（有的能侵人根表皮和外皮层的细胞间隙）和近根土壤中,靠根系分泌物生存,繁延,与植物根系有密切的关系。但宿主植物并不形成特异分化的结构。植物与细菌之间的这种共生关系称联合共生固氮。这类固氮菌称联合固氮菌。联合共生固氮的概念是1976年由巴西Dobereiner实验室提出的。ZO年来联合固氮的研究受到世界各国科学家的重视…     

固氮酶结构基因在联合固氮菌Klebsiellaplanticola19—1细胞中的定位

用Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍ ｏｎｉａｅｎｉｆＨＤＫ 为探针与Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｌａｎｔｉｃｏｌａ １９－１ ＤＮＡ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交表明,Ｋ．ｐｌａｎｔｉｃｏｌａ １９－１ 中存在与ｎｉｆＨＤＫ 同源的片段。用凝胶内溶菌及电场倒转技术检测在Ｋ．ｐｌａｎｔｉｃｏｌａ １９－１ 中存在一大质粒。用Ｋ．ｐｎｅｕｍ ｏｎｉａｅ ｎｉｆ ＨＤＫ 探针与大质粒ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ 杂交证明固氮酶结构基因定位于大质粒     

Zn 2+对细菌铁蛋白形成的影响

用酶联免疫法（ELISA）检测了Zn2+对细菌铁蛋白[bacterioferritin (B.F.)]合成的影响。Zn2+抑制B. F合成,而在高Zn2+培养液中生长的菌体其B. F分子中Zn2+含量比低Zn2+条件下的高二倍。B. F分子中的Zn2+能转运出来激活碱性磷酸酶的活性。     

铁氰化钾氧化固氮酶钼铁蛋白与铁、钼、硫化合物重组的研究

棕色固氮菌固氮酶钼铁蛋白经铁氰化钾氧化后变为“漂白蛋白”,其活性损失约75％,同时释放出80％的钼和50％左右的铁。与铁、钼、硫重组溶液重组,金属组成和乙炔还原活性均得到明显恢复。穆斯鲍尔(M／issbauer)谱表明,重组溶液中的Fe、Mo、S已形成FeMc6原于簇的类似物,“重组蛋白”的M6ssbauer谱和天然MoFe蛋白相似。     

联合固氮研究进展

联合固氮研究进展李久蒂安千里（中国科学院植物研究所,北京１０００９３）ＡＤＶＡＮＣＥＳＩＮＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＮＩＴＲＯＧＥＮＦＩＸＡＴＩＯＮＲＥＳＥＡＲＣＨＬｉＪｉｕ－ｄｉＡｎＱｉａｎ－ｌｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃ...     

介绍一种新的半干式免疫转渍法

蛋白质免疫转渍法(Western blotting)是近十年发展起来的一种生化新技术。其原理是用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离待分析的蛋白质样品,然后用转渍装置把蛋白质转移到硝酸纤维素膜(NC膜)上。再利用免疫检测法检出要分析的蛋白质区带。过去报道的大多是利用液相夹心式电转渍仪完成转渍的,这     

固氮螺菌(Azospirillum.brasilenseYu-62)中固氮酶活性的氨关闭现象

固氮螺菌(A.brasilense)Yu-62在以谷氨酸为氮源好气液体培养条件下,氨离子使固氮酶迅速失活,Western blotting实验证明这种失活的分子基础是固氮酶铁蛋白一亚基被修饰.测定加NH_4^+后细胞内α-ketoglutarte和glutamine的含量.α-ketoglutarate/glutamine比值在加NH_4^+后瞬间下降然后上升,而细胞内ATP/ADP的比值没有明显变化.谷氨酸合成酶的抑制剂azaserine使固氮酶失活.Western blotting实验表明这种失活的分子基础也是固氮酶铁蛋白一亚基被修饰.测定加azaserine后细胞内α-ketoglutarate及glutamine比值的变化以及外源α-ketoglutarate及glutamine对细胞固氮活性的影响,表明细胞内一些小分子化合物的变化可能是作用于固氮酶活性氨关闭的重要因素.     

用免疫亲和层析法纯化细菌铁蛋白

用细菌铁蛋白免疫家兔,制备抗铁蛋白血清,用进一步纯化的抗铁蛋白抗体作为配基与溴化氰活化的Sepharose4B偶联,得到亲和免疫吸附剂。以此法纯化的铁蛋白为聚丙烯酰胺凝胶电泳纯,相对复合抗体作双向免疫电泳显示单峰,并具有较高的免疫活性。