改良组织块消化法建立大鼠气道平滑肌细胞模型

目的：建立改进大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的体外培养方法,为相关研究提供实验材料。方法：将组织块连续贴壁进行细胞原代培养,胰酶消化传代培养,差速贴壁进行细胞纯化,形态学及免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。MTT法检测PDGF-BB诱导的ASMC增殖。结果：成功培养大鼠ASMC,以改良组织块消化法最为理想。第四代平滑肌细胞纯度可达95％以上。相差显微镜下培养细胞呈典型“峰谷状”生长。免疫荧光化学染色显示特异性平滑肌肌动蛋白阳性表达。随着PDGF浓度的升高（2-80ng／ml）,MTT比色A490值呈上升趋势。与对照组相比较,80ng／ml、20ng／ml PDGF—BB组有统计学意义（P〈0．01）。结论：改良组织块消化法可缩短培养周期,在充分利用标本的基础上获得大量气道平滑肌细胞。     

过氧化物酶6在大鼠附睾中的表达及分布

通过双向电泳结合质谱技术分离鉴定正常成年大鼠附睾头段与尾段管腔液中的蛋白组成,从附睾头段及尾段管腔液的22个差异蛋白点中鉴定出12个蛋白质.其中11个蛋白质在不同种属哺乳动物的附睾组织中已有鉴定报道,而过氧化物酶6(peroxiredoxin 6,Prdx6)为新发现的存在于附睾头段及尾段管腔液中的体液蛋白.采用RT-PCR、Western印迹及免疫组化技术,对该蛋白在大鼠附睾中的表达及分布进行了分析.实验表明,Prdx6与精子的成熟、贮存及保护有一定关系,其具体机制值得进一步深入研究.     

三种天然提取物的减肥降脂作用研究

选用Wistar雄性大鼠,喂饲高脂饲料,建立预防性肥胖高血脂模型,对苦丁茶水提取物、阿拉伯糖、乌龙茶提取物三种天然成分进行减肥降脂试验。大鼠随机分组,灌胃给药,以药物曲美减肥胶囊为阳性对照组。测定模型组、给药实验组、阳性对照组各种生化指标(如总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白)、大鼠的体重、Lee′s指数和脂肪湿重等。结果表明:各给药实验组较模型对照组体重增长减慢,且下降明显,体内脂肪湿重也明显下降,同时发现L-阿拉伯糖组有极其显著降低血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、Lee′s指数和体内脂肪含量(P0.01)的效果。L-阿拉伯糖对肥胖症、高血脂症具有良好的预防和治疗的作用。     

低温胁迫下黄瓜嫁接苗与自根苗某些物质含量的变化

在低温胁迫下黄瓜嫁接苗的Ｐｒｏ,Ｖｃ,水溶性糖含量明显高于自根苗,而叶中水溶性蛋白质含量低于自根苗,根中与自根苗相近,Ｐｒｏ,Ｖｃ和水溶性糖含量的提高是嫁接自根苗抗冷的重要原因。     

胰岛素样生长因子结合蛋白4基因敲除小鼠的建立和鉴定

[目的]用CRISPR/Cas9技术构建胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)基因敲除(knock-out,KO)小鼠,以研究IGFBP-4对脑发育的影响。[方法]将IGFBP-4引导RNA和Cas9 mRNA显微注射于小鼠受精卵,繁育小鼠并观察体重和脑重改变。PCR和RT-PCR鉴定DNA和mRNA突变,Isotropic Fractionator测脑细胞总数和神经元数量,Western Blot观察NeuN表达,转棒实验测试动物行为学。[结果]KO造成了4种DNA缺失和插入突变,选择缺失GGGT致移码突变的动物进行繁育。与野生型小鼠相比,3月龄KO小鼠体重减轻了10.8%(P <0.05),整脑、皮层和小脑重量分别减轻了7.2%、6.9%和10.3%(P <0.05),小脑神经元比例和NeuN表达水平分别降低了14.3%和15.3%(P <0.05),Rotarod运动能力有所降低。[结论]用CRISPR/Cas9成功制备了IGFBP-4 KO小鼠,动物体重和部分脑区重量和神经元数量受到了影响。     

植物油和脂肪酸对灰树花深层发酵的作用*

研究了植物油、脂肪酸和不同氮源对深层培养的灰树花生物量及胞外多糖产量的影响。添加较低浓度的橄榄油有利于胞外多糖的生产,而较低浓度的豆油促进生物量的提高。本实验及文献报道的结果显示不同的脂肪酸对生物量和胞外多糖的作用效果大小顺序为棕榈酸（十六碳饱和酸）>油酸（一烯酸）>亚油酸（二烯酸）>亚麻酸（三烯酸）>硬脂酸（十八碳饱和酸）。豆饼粉和大豆粉作为氮源时对生物量和胞外多糖的作用是蛋白质和脂肪酸共同作用的结果。     

云南铁壳麦研究进展

铁壳麦是云南省独有的小麦种质资源,是中国特有的3个普通小麦亚种之一.本文对云南铁壳麦在形态特征、遗传特性以及与其他亚种的比较等方面所作的研究进行综述,并结合云南小麦育种及生产现状,对其今后的研究方向提出一些建议,旨在为云南铁壳麦的合理利用及保护提供参考.     

新型经济禽——鸵鸟

新型经济禽──鸵鸟刘学英，尚磊（山西农业大学山西太谷县０３０８０１）近年来，很多野生动物正被人工驯养、开发利用，特种经济动物养殖业应运而生。其中新型经济禽—一鸵鸟的饲养，以其生产成本低、经济效益高及禽产品品质优异等特点而受到普遍青睐。鸵鸟的商品生产目...     

不同透析方式治疗终末期糖尿病肾病临床疗效比较

目的:比较应用血液透析(hemodialysis,HD)与持续不卧床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis,CAPD)两种不同透析方式治疗终末期糖尿病肾病的临床疗效。方法:回顾性分析2010年6月至2013年2月在我院接受透析治疗的终末期糖尿病肾病患者98例的临床资料,其中55例为接受HD治疗,43例接受CAPD治疗,统计分析及比较两组的临床治疗效果。结果:HD组透析后的体重(50.2±8.9Kg)较透析前(58.4±10.1Kg)明显减轻(P0.05),也明显低于CAPD组透析后体重(60.4±9.1 kg)(P0.05),HD组透析后血压下降明显(SBP 157.6±20.2 vs 144.3±14.4 mmHg,DBP 71.4±12.9 vs 83.2±10.9 mmHg)(P0.05),同时明显低于CAPD组透析后血压(SBP 144.3±14.4 mmHg vs 159.4±17.1 mmHg,DBP 71.4±12.9 vs 84.3±10.5 mmHg)(P0.05),两组透析后尿量与透析前比较无明显差异(0.05),但HD组尿量(487.0±332.0mL)明显少于CAPD组(593.0±420.0 ml)(P0.05),两组透析后生化指标如肌酐(HD 310.6±210.1μmol/L,CAPD425.9±267.2μmol/L)、尿素氮(HD 11.6±4.1 mmol/L,CAPD 19.5±6.9 mmol/L)、血钾(HD 3.4±0.4 mmol/L,CAPD 3.6±0.5 mmol/L)有明显下降(P0.05),HD组透析后血浆总蛋白(59.4±8.1 g/L)及白蛋白(37.4±6.1 g/L)水平较透析前(TP 55.2±9.0 g/L,ALB 33.2±5.9 g/L)显著性升高(P0.05),且HD组血浆总蛋白(55.2±9.0g/L)及白蛋白水平(33.2±5.9 g/L)显著高于CAPD组(TP 52.5±7.3 g/L,ALB 33.4±5.1 g/L)(P0.05),HD组发生心血管并发症(36.3%)、出血事件(30.9%)的比例较CAPD组(16.2%,13.9%)升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:两种透析方式都是治疗终末期糖尿病肾病的有效措施,两者各有特点。对于不同病人应采取个体化方针,能够提高患者的生活质量,减少并发症及改善预后。     

沉默长链非编码RNA Meg3损伤小鼠胰岛细胞的胰岛素分泌功能

MEG3是一种长链非编码RNA。已有研究证明,鼠源Meg3参与小鼠诱导多能干细胞、神经元和视网膜的分化过程。最新报道,MEG3在人胰岛β细胞中高表达,但其对维持成年胰岛β细胞的功能尚不清楚。本研究旨在探讨Meg3在小鼠胰岛细胞胰岛素分泌功能中的作用。实时定量PCR揭示,与Balb/c小鼠心、肝、脾、肺、肌、肾等组织/器官比较,Meg3在胰腺组织中高表达。在非糖尿病小鼠发生自发性糖尿病的第8、12周,Meg3在胰岛中的表达水平分别下调24%±8%和29%±9% (P<0.01);而当血糖升高20 mmol/L,小鼠胰岛中Meg3表达下调72%±16%(P<0.01)。在MIN6细胞中采用RNA干扰敲减Meg3的表达,在高糖浓度（20 mmol/L）刺激条件下,胰岛素分泌显著减少。小鼠静脉注射siRNA,结合血糖测定或葡萄糖耐受试验（IPGTT）显示,si-Meg3小鼠血清胰岛素水平显著下降。注射葡萄糖前血糖升高,注射葡萄糖后耐受能力降低;免疫组化分析显示,si-Meg3小鼠胰岛素阳性细胞的面积减少。实验结果提示,Meg3通过参与胰岛素的合成和分泌维持成年小鼠胰岛功能。Meg3表达失调可能参与I型糖尿病（T1DM）发病过程。