透明颤菌血红蛋白的DNA改组研究

为提高透明颤菌血红蛋白在限氧条件下促进宿主细胞生长的能力,首先通过易错PCR向透明颤菌血红蛋白基因中引入突变,再结合DNA改组对其进行改造。将改组基因置于透明颤菌血红蛋白天然启动子下游,转化大肠杆菌DH5α,构建改组文库。以限氧培养条件下菌体沉淀的颜色为指标进行试管初筛,再以限氧和极端限氧条件下菌体湿重为指标进行摇瓶复筛,最终得到一个高活性突变蛋白VHb'042506。该蛋白使宿主的菌体湿重在限氧和极端限氧条件下较原基因转化子分别提高了31.25%和58.75%。经测序和比对,该基因与原基因相比发生了11处碱基点突变,致氨基酸4处错义突变。CO差光谱实验显示该蛋白具有更强的特征吸收。     

肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7紧密粘附素免疫保护性片段(Intimin-C)的克隆表达纯化及部分生物学活性研究

克隆表达并纯化肠出血性大肠杆菌 (EHEC)O15 7∶H7紧密粘附素免疫保护性片段 (Intimin C) ,并对其部分生物学活性进行研究。设计引物采用PCR自O15 7菌基因组扩增紧密粘附素免疫保护性片段 (Intimin C)的编码基因eae C ,T A克隆测序后构建原核表达质粒 pET 2 8a(+) eaeC并转化E .coliBL2 1(DE3) ,诱导表达破菌及包涵体洗涤后采用离子交换柱和亲和层析柱对目的蛋白进行纯化 ,PAGE电泳初测目的蛋白的分子量、滴定法初测目的蛋白的等电点 ,并以纯化蛋白Intimin C免疫家兔制备多抗血清。采用PCR法自O15 7菌基因组扩增出了约 90 0b…     

适合棉铃虫细胞HzAm1生长的培养基筛选及低血清驯化

昆虫细胞-杆状病毒系统是昆虫杀虫剂生产和医用外源基因表达的有效工具。昆虫细胞的无血清或低血清培养是十分必要的。从三种商业化的培养基TC-100、GRACE和IPL-41中筛选出了最适合棉铃虫细胞HzAm1生长的基础培养基TC-100。以该培养基为基础,将血清用量从常用的10%降至1%,同时补加一定量的水解乳蛋白以及酵母提取物等,对棉铃虫细胞HzAm1进行驯化培养,效果良好。     

花生白藜芦醇合酶基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建

为得到含有白藜芦醇合酶cDNA(RS cDNA)并能表达白藜芦醇(Res)的转基因植物,以花生为材料,从其根部提取基因组DNA,并以其为模板,利用引物悬挂延伸PCR法扩增得到大小约1200bp的片段,将这个片段连接到克隆载体PBS-T上进行测序,测序结果证明,此片段就是花生的RS cDNA。将此片段再正向插入到植物表达载体PBI121的CaMV35s启动子和NOS终止子之间,对重组子进行筛选与鉴定,证明花生的RS cDNA已经正确插入PBI121中,成功的构建了植物表达载体PBI121L。     

木薯淀粉对人工胚乳性能及对人工种子发芽率的影响

研究了四种高聚化合物对人工胚乳性能及对人工种子发芽率的影响。结果表明,l％的木薯淀粉与1．5％的海藻酸钠制作的复台胚乳改善了单一海藻酸钠制作的人工种子胚乳的暖水性．从而提高了人工种子的发芽率     

利用DIS探究光照强度对光合作用速率的影响

DIS（计算机数据采集系统）目前已逐渐走进全国中小学实验室,如何充分利用好该系统,不少教师都有很好的探索（例如,《生物学通报》2008年第8期就介绍了唐晓春老师的“DIS在高中生物学实验中的应用初探”）。教师要充分利用这一系统,一是要认真研究系统提供的现成的实验内容,不断实践,反复操作,寻找规律;二是要在原有实验的基础上加以改进．使之更加完善并适于自己学校的条件和情况：三是要创新实验内容．开发出更多适于教师演示和学生操作的实验方案。     

罗布麻叶配方颗粒与传统汤剂HPLC指纹图谱的相关性

建立了罗布麻叶传统汤剂的HPLC指纹图谱,并对其与配方颗粒的HPLC指纹图谱相关性进行了评价.采用Kromasil 100-5-C18,250 mm×4.6mm,5 μm的色谱柱,以2g/L H3PO4-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,检测波长为360 nm,柱温40℃,流速1.0 mL/min,进样体积10 μL.结...     

钝绥螨属一新种记述(蜱螨目:植绥螨科)

本文记述我国钝绥螨属一新种,模式标本保存在江西大学生物系。江西钝绥螨 Amblyseius jiangxiensis,新种(图1—6)     

丙型肝炎病毒包膜蛋白E2的DNA免疫

为了比较启动子及分泌信号对丙型肝炎病毒包膜蛋白E2（HCV E2）的DNA免疫效果的影响,构建了4个不同的HCV E2（384－660）融合表达质粒：CMV启动子控制下和EF1α启动子控制下的分泌表达质粒pCMVSec-S1E2t660和pEF1αSec-S1E2t660以及非分泌表达质粒pCMV-S1E2t660和pEF1α-S1E2t660,4个表质粒在HeLa细胞中进行了暂时表达,免疫印迹分析表明,表达产物都同时具有HBV preS1及HCV E2蛋白的抗原性,夹心ELISA测定结果表明,分泌表达质粒的表达量明显高于非分泌表达质粒,带CMV启动子的质粒表达量高于EF－1α,并且只有分泌型质粒转染细胞后,才能在细胞培养上清液中检测到融合蛋白,4种表达质粒免疫C57BL／6小鼠,可产生preS1及E2的抗体,比较了抗体转阳率,抗体滴度和维持时间等,发现带CVM启动子的E2分泌表达质粒pCMV-S1E2t660明显优于其他3组,对4种质粒产生体液免疫反应不同的可能原因进行了分析。     

聚类分析在金针菇杂交育种中的应用

对12个金针菇菌株两种生化标记（酯酶和可溶性蛋白）进行了筛选研究．采用多元统计方法,进行聚类分析。结果表明,供试菌株可分为四个类群。按照亲本的遗传相似系数,对各杂交组合的杂种优势进行了检测,实际结果表明,不同杂交组合的产量与预测结果基本一致。群内组合为低产组合,群间组合杂种优势较强。