药用植物基因组及EST研究

以生物信息学数据库GenBank的生物信息为基础 ,对包括《中国药典》2 0 0 0年版一部、《新编中药志》第 1～ 3卷、《中国大百科全书》(中国传统医学分册 )、中国医学科学院药物研究所编写的《中草药现代研究》及《天然药物化学》第三版中所涉及的 2 30 0多种药用植物的基因组、蛋白质及表达序列标签 (EST)的注册情况进行了初步统计 ,就相关进展进行了综述。到 2 0 0 3年 9月底截止的数据分析表明 ,66%的药用植物没有核酸序列报道 ,77%的药用植物没有蛋白质序列注册。进行药用植物基因组研究的植物与国家十分有限 ,而进行药用植物EST研究的国家相对较多 ,涉及的植物也相对集中 。     

赤霉菌原生质体DNA转化*

Methods for the protoplast preparation and DNA transformation of Gibberella fujikuroi were established. The protoplasts were transformed with plasmid pAN7-1, which carries hygromycin B resistant gene (hPh), and the transformation frequency was about 10. Some transformants grew vigorously on the selectivemedium containing 400μg / ml of hygromycin B, while the minimum inhibitory concentration (MIC) of the antibiotic to the recipient strain was oniy 20μg / ml. Southern hybridization showed that the hph gene ha…     

检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的3种染色方法比较

用考马斯亮蓝染色、银染色、铜染色等 3种方法对同一种蛋白质染色的灵敏度、快速性进行比较 ,得出 3种蛋白质染色方法的优缺点 ,为蛋白质电泳染色合理选用不同方法提供依据     

冷冻电子断层成像技术及其在生物研究领域的应用

冷冻电子断层成像可以在纳米级尺度上研究那些结构不具有均一性的分子、病毒、细胞器以及它们之间组成的复合体的三维结构。在过去的十年中,电子显微镜硬件、冷冻制样设备和技术,以及自动化断层数据收集方法的进步使得本研究领域得到快速发展。本文对冷冻电子断层成像的方法,包括基本原理、样品制备、断层数据采集和图像处理、三维重构以及重建信息的理解和展示、近年来在生物样品领域的一些典型应用以及前景作一简单介绍。     

化脓性链球菌纤维粘连蛋白结合蛋白的研究进展

本文介绍化脓性链球菌纤维粘连蛋白（ＥＢＰ）结合蛋白的最新研究进展，对链球菌的粘附机理、纤维粘连蛋白结合蛋白的分子生物学结构特征、在粘附过程中的作用以及其临床意义作了扼要阐述。     

不同施肥管理措施对农田土壤中植物和微生物残留组分的影响

在农田生态系统中,施肥是维持和提高土壤有机碳(SOC)水平的重要管理措施。微生物代谢和植物组分存留共同控制着有机碳的截获过程。本研究利用肥料与肥力长期(30年)定位试验,以氨基糖和木质素分别作为微生物和植物残留组分标识物,探讨长期不同施肥处理对黑土农田中微生物和植物残体组分积累及有机碳库的影响。结果表明: 与未施肥处理相比,施用无机肥(单施氮肥或有机无机肥配施)可增加作物生物量和土壤氨基糖的积累,但对木质素和SOC含量无显著影响,说明无机肥施入刺激了微生物底物同化,加速了有机碳和木质素在耕层的周转。与无机肥相比,长期施用有机肥促进了SOC的累积(增幅38.3%),但是氨基糖在土壤有机碳中所占的比例并未发生显著变化,说明微生物残留物对SOC积累的贡献具有饱和性;而有机肥施入增加了木质素在SOC中的比例,即增加了植物残体对SOC长期积累的贡献。与单施有机肥相比,有机无机肥配施增加了微生物残留物对SOC的积累。因此,长期施肥可以调节微生物残留物和植物残留组分的不同积累过程,从而影响SOC的积累和稳定机制。     

7-木糖紫杉烷糖基水解酶LXYL-P1-1和LXYL-P1-2活性中心预测及初步的功能分析

7-木糖紫杉烷糖基水解酶LXYL-P1-1和LXYL-P1-2是克隆自真菌香菇的两个双功能酶(序列一致性97%),具有β-木糖苷酶/β-葡萄糖苷酶双重活性,能特异性地水解移除7-木糖-10-去乙酰紫杉醇等紫杉烷上的木糖基。采用生物信息学方法对两个酶蛋白进行酶活性中心预测,初步确定Asp300和Glu529分别为亲核试剂和一般酸/碱催化剂,而Asn172-Gly173-Arg174和Lys207-His208为底物结合结构域。以LXYL-P1-2为研究对象,以毕赤酵母细胞为表达宿主,应用定点突变技术获得了N172A、G173A、R174A、K207A、H208A、D300N和E529Q突变体,并进行了酶活性分析。结果显示:在分别以PNP-Xyl、PNP-Glc和7-木糖-10-去乙酰紫杉醇为底物时,N172A、G173A、R174A、K207A、D300N和E529Q的β-木糖苷酶与β-葡萄糖苷酶活性大幅度下降甚至完全消失;H208A的β-木糖苷酶活性也显著下降,但仍保持98%的β-葡萄糖苷酶活性。其结果初步验证了对上述两个酶蛋白的活性中心的预测,为进一步揭示7-木糖紫杉烷糖基水解酶结构与功能的关系提供了实验依据。     

后腹腔镜肾上腺全部切除与部分切除治疗醛固酮瘤的疗效对比

目的:探讨后腹腔镜肾上腺全部切除与部分切除治疗醛固酮瘤的疗效。方法:收集我院收治的醛固酮瘤患者60例,随机分为部分切除组和全切除组,每组30例,分别给予肾上腺部分切除以及肾上腺全切除手术,手术结束后,对所有患者的住院时间、术中出血量、手术时间、血清钾、血清醛固酮水平以及患者的治疗效果进行检测并比较。结果:手术后,部分切除组和全切除组患者血清钾水平均升高(P0.05),醛固酮水平均降低(P0.05);与全切除组相比,部分切除组患者的术中出血量以及住院时间较短(P0.05),血清钾水平较高(P0.05),血清醛固酮水平较低(P0.05);两组患者的手术时间以及临床疗效无明显差异(P0.05)。结论:后腹腔镜肾上腺部分切除术较全切除术能够缩短醛固酮瘤患者住院时间,减少手术出血量,升高血清钾水平,降低醛固酮水平。但两种术式的手术时间以及临床疗效相当,对临床有指导意义。     

痛风的临床病理特征分析并文献复习

目的:总结痛风临床病理特点。方法:回顾性分析1例痛风患者的生化机制、临床病理特征、刚果红染色、PAS染色特点、鉴别诊断要点,并复习相关文献。结果:患者主要临床表现为间断性多关节肿痛3年,加重伴发热3个月。体格检查发现患者有多发性皮下结节、多关节肿胀压痛。左腕、左肘皮下结节活检,经HE染色后光镜查见大量肉芽肿性病变,有的多核巨细胞内查见被吞噬的异物,有的病灶尚查见呈均质状物(尿酸盐结晶),其周围有较多异物巨细胞及纤维结缔组织包绕呈结节状,在结节的周边纤维血管周围可查见残留分化成熟的淋巴细胞及少数嗜酸性粒细胞。刚果红、PAS染色均为阴性。偏光显微镜下,刚果红未查见绿色强折光晶体,但见多量略呈淡黄色具有强折光性的晶体呈棒状或梭形。结论:痛风在刚果红染色偏光显微镜下观察呈淡黄色梭形或针状结晶,具有强折光性晶体,但这是否是痛风在刚果红染色的特征尚有待于进一步研究。