抑癌基因LIMD1

抑癌基因LIMD1在肿瘤发生及演进中的作用逐渐受到重视,两者的因果关系较为密切,如与肺癌、乳腺癌、头颈部恶性肿瘤及儿童急性淋巴细胞白血病等相关。本文就LIMD1的发现、结构、生物学功能及在肿瘤中的作用机制等做一综述。     

中国丁氏双鳍电鳐乙酰胆碱酯酶的制备亲和层析

Acelylcholinesterase was purified from the electric organs of Torpediniforms nacline timelci by affinity chromatography. "Pure" enzyme preparation as identified by PAGE analysis was obtained. The specific activity is 78 mmol ACh/h/mg protein. Sedimentation coefficient is 11.86 S. Molecular weight is 236000. Acidic amino acid and basic amino acid contents are 22% and 12% respectively. Circular dichroism pattern shows two negative valleys at 209 and 220 nm.Optimum substrate concentration is 1-3 mM ACh with Km around 0.18 rnM. Excess substrate causes inhibition of enzyme activity. Optimum pH lies between 7.5-8.0. Bovine serum albumin and phosphatidylcholine benefits the stability of enzyme activity. The pure enzyme can be stored at - 20癈. Repeated freezing and thawing causes sharp inac tivation.     

生物结构和功能的相似性

在六十年代初期,我们逐渐形成了一种概念,认为在生物现象间具有相似性,而研究其相似性是弄清生物变化规律十分重要的关键。相似性说明事物间有相同的一面,也有不同的一面。相似不是等同。相似性可以在分子水平上反映出来,更多地将在不同层次的生物水平上反映出来。按分子结构的同源性可以将生物活性分子区分为不同大小的家族,“物以类聚”已经在生物科学中得到充分证明。在很多领域,不同层次中已可列举不少生物现象间相似性的课     

牛脑成纤维细胞生长因子的分离纯化与鉴定

新鲜牛脑组织匀浆液经两步硫酸铵沉淀、CM-Sephadex C50 离子交换层析以及肝素-Sepharose 亲和层析,可得到纯化的酸性和碱性成纤维细胞生长因子(aFGF 和bFGF),分子量分别为13.2kD 和15.2—15.8kD.两种因子均可有效促进3T3细胞的 DNA 合成,ED₅₀分别为15.8ng/ml 和 0.32ng/ml.进一步对 aFGF 的等电点及氨基酸组成做了分析.     

从少量转染细胞中同时快速提取总RNA和基因组DNA

采用4mol / L LiCl将DNA和RNA分相,建立了同时从少量转染细胞中快速提取细胞总RNA和大分子基因组DNA的方法.与以前的方法相比,本法快速、简便、经济,尤其适合应用在哺乳动物细胞基因表达与调控的研究中．     

人转化生长因子β1在大肠杆菌中的表达——Ⅰ.胞内直接表达

采用PCR技术 ,扩增了人转化生长因子β1 (hTGFβ1 )成熟肽基因 ,并对其进行了全序列测定 .采用DH5α/ pBV2 2 0表达系统 ,使TGFβ1在大肠杆菌胞内的表达达到 1 6 % .通过N端氨基酸序列测定和免疫印迹分析 ,证实重组蛋白为hTGFβ1单体蛋白 .采用谷胱甘肽法或CHAPS/DMSO法 ,使重组蛋白的复性率达到 30 % .通过纯化获得了银染一条带的重组蛋白 ,MTT法对Mv1Lu细胞的测活表明 ,重组蛋白具有较强的生物活性     

bcl-2高表达细胞株的构建

利用基因转染技术,将人的bcl-2基因cDNA克隆于逆转录病毒载体pLXSN,通过PA317细胞包装成病毒后感染HeLa细胞。经PCR及蛋白质印迹证明转染成功,得到bcl-2稳定高表达株Hbc17。用顺铂诱导凋亡,Hbc17比对照细胞株H1具有明显的抗凋亡能力。为进一步研究顺铂诱导肿瘤细胞凋亡的机理奠定基础。     

人脑髓鞘碱性蛋白的分离纯化和鉴定

 本文介绍了从人脑中分离纯化髓鞘碱性蛋白的方法,人脑组织匀浆经甲醇—氯仿脱脂、酸提取、硫酸铵沉淀和羧甲基纤维素柱层析,得到了纯化的髓鞘碱性蛋白。该蛋白在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中为单一带,分子量为21kD。在聚焦电泳中测得其等电点在pH10以上,氨基酸组成分析结果也与文献值接近。这为进一步研究人脑髓鞘碱性蛋白的抗原性创造了条件。     

第二届国际药理学会议学术动向

第二届国际药理学会议于1963年8月20—23日在捷克布拉格召开。我国由科学院组成代表团出席会议。参加的51国其出席1600人。这次会议共宣读论文980篇,有37国的科学家在会上报告了论文。我们代表团主要参加了专题组的活动,先后宣读了3篇论文,其中一篇系综合性报告,在专题讨论会上作了介绍,另2篇在论文报告会上宣读,还作了一次补充报告。这些报告介绍了我国药理学的一部分成就,引起了国外科学家的重视。     

E．coli分泌表达载体的构建和人表皮生长因子在E．coli中的分泌性表达

采用ＰＣＲ技术从Ｅ．ｃｏｌｉ基因组片段中克隆出碱性磷酸酯酶（ＰｈｏＡ）的启动子和信号肽序列．在ＰｈｏＡ启动予５＇端设计了ＥｃｏＲⅠ酶切位点,在信号肽编码序列３＇端设计了ＨｉｎｄⅢ酶切位点．将ＰＣＲ产物酶切后ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ片段克隆至ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ位点,组构出含有ＰｈｏＡ启动子和信号肽序列的分泌表达载体ｐＢＭ－Ｐｈｏ－１．之后将人表皮生长因子的成熟肽基因克隆至该载体,使之在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得分泌表达,另采用ｐＩＮⅢ载体系统以分泌方式表达了人表皮生长因子。