枯草芽孢杆菌BS-26菌株纤溶酶的性质分析及活性组分的分离纯化

[目的]溶栓疗法是血栓性疾病安全且有效的治疗手段,从微生物中寻找溶栓药物是一种理想有效的途径,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-26菌株发酵液具有很强的体外纤溶活性,本文分析了发酵液中纤溶酶的性质并对活性组分进行了分离纯化.[方法]利用纤维蛋白平板法检测纤溶酶活性,利用硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和聚丙烯酰胺制备电泳等方法,进行分离纯化.[结果]此菌株产生的纤溶酶在50℃以下和pH5.0～11.0范围内具有较好的稳定性,最适作用温度为42℃;最适pH值为9.0;Mg2 、Ca2 对此酶有明显的激活作用,而Cu2 能完全抑制酶的活性;174.2μg/mL的苯甲基磺酰氟、1000μg/mL的鸡卵类粘蛋白和1000μg/mL大豆胰蛋白酶抑制剂能完全抑制酶活性,初步说明此酶属于丝氨酸蛋白酶类;体外溶纤作用表明,该酶溶解纤维蛋白的方式是直接溶解,而不是通过激活纤溶酶原.从该菌株的发酵液中获得了一种纤溶酶组分,比活力达8750 U/mg,回收率为3.2%,所获得样品纯度相对于发酵液提高了41倍,该酶在SDS-PAGE中是单肽链蛋白,分子量为32 kDa.[结论]获得了一种纤溶酶的单一组分,为纤溶酶发酵产品的大规模纯化及进一步研制和开发新的溶栓药物提供重要理论依据.     

记宁夏同心中中新世Alloptox(兔形目,鼠兔科)

从牙齿形态方面记述了同心中中新世的 Alloptox gobiensis (Young, 1932)和 Alloptox sp., 并尝试探讨了 P_3 和 P~2 的各主要性状在该属内种的划分和系统进化方面的意义.     

Ti质粒对甘薯叶片和愈伤组织的转化

以甘薯(Ipomea batatas)叶片和愈伤组织为材料,分别与根癌农杆菌(Agrobateriuum famefaciens)T_(37)和B_6S_3菌株共培养。然后在MS_0培养基上(含唑啉头孢菌素钠250 mg/L,羧苄青霉素150 mg/L,氨苄青霉素150 mg/L)进行培养,实验结果如下:1.经根癌农杆菌感染后的甘薯叶片和愈伤组织,2～3周后长出新的愈伤组织(表1),而未经处理的则逐渐死亡。两株根癌农杆菌对愈伤组织的转化率明显高于叶片。2.感染后在MS_0培养基上形成的愈伤组     

荧光标记金针菇原生质体融合

以金针菇（Flmmulina velutipes）为材料,经异硫氨酸荧光素（FIC）标记的金针菇单核W19菌株的原生质体与未经标记的单核Y7菌株的原生质体在聚乙二醇（PEG）的诱导下进行融合,利用显微操纵仪直接挑取一个带有荧光而另一个不具荧光的原生质体对,培养后,根据融合形成的汉核菌丝具有“锁状连合”这一形态学特征选择、鉴定融合菌株,酯酶同工酶电泳分析结果表明,融合菌株具双亲互补酶带。经测定,多数融合菌株菌丝生长速度和生物量较亲株高,且出菇正常。     

神经珠蛋白研究进展

神经珠蛋白(Neuroglobin,Ngb)是最近由德国科学家发现的一种新的珠蛋白类型。目前,已从人、小鼠和鱼类的组织中获得了基因序列。研究发现,人神经珠蛋白(hNgb)的mRNA序列全长7727bp,含11个重复序列,4个外显子和3个内含子,编码151个氨基酸。与鼠神经珠蛋白(mNgb)相比核苷酸同源性为94％。鱼的神经珠蛋白(fNgb)编码159个氨基酸,分子量约为16kD。Ngb具有高氧亲和性和可逆性结合氧的功能。并能协助氧气通过血脑屏障,在神经细胞代谢中增加氧的运输、储存和供应。对其进一步研究将为生物医学和生命科学提供新的思路,也将开辟一个全新的市场。     

抗凝蛋白EH体外活性检测条件的建立

EH蛋白是一种水蛭素衍生物,它是在水蛭素的N端引入了一小段寡肽,该寡肽可被凝血因子XIa(factor XIa,FXIa)和Xa(factor Xa,FXa)裂解释放水蛭素的抗凝血酶活性.比较在不同条件下FXa裂解EH蛋白的效果,包括裂解时间(2h,4h,6h,8h,10h,20h)、裂解温度(25℃,37℃,40℃)...     

AFLP 引物组合数量对准确研究竹子系统关系的影响

利用AFLP技术对26个竹子种类进行了多样性分析, 以探索引物组合数量对准确研究竹子类群系统关系的影响。实验共随机选取10对AFLP引物, 并对所得10组AFLP标记数据随机组合后进行Nei氏遗传距离/UPGMA聚类分析。每对AFLP引物 扩增数据为一组, 随着用于聚类统计的AFLP标记数据随机组合数量的增加, 26个竹子种类的聚类关系趋向一致。这提示我们,在系统学研究中, 足够数量的引物组合是获得供试材料间准确聚类关系的基础, 应采用对各AFLP引物组合数据随机累加后进行聚类分析的方法, 以聚类关系为标准来确定用于分析供试品种的最少引物组合数量。     

紫孢侧耳、糙皮侧耳及其融合菌株的同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法对紫孢侧耳、糙皮侧耳及其融合菌株的酯酶和过氧化物酶同工酶进行了分析。经多次试验,得到了两亲株和融合株恒定的同工酶谱, 在酶谱中融合菌株与亲株有明显差异,并表现出典型的双亲株互补酶带特征,从而证实融合菌株为两亲株基因重组之产物。 Abstract: After many repetitions,the patterns of esterase isozyme and peroxidase isozyme of Pleurotus sapidus,Pleurotus ostreatus and their fusant strains were obtained.There were differences among the parent strains and theirfusant strains in theirisozyme bands.Parental isozyme bands appeared in patterns of fusant strains.Itdemonstrated that fusant were recombinants of P.sapidus and P.ostreatus.     

一株产纤溶酶芽孢杆菌的鉴定及纤溶酶的分离纯化与性质分析

摘要：【目的】从假蕈状芽孢杆菌B-60菌株中纯化具有纤溶活性的单一组分,测定它的N-端氨基酸序列进行比对,并对单一组分的性质进行分析。【方法】利用纤维蛋白平板法检测纤溶酶活性,利用硫酸氨分级沉淀和阴离子交换色谱从假蕈状芽孢杆菌B-60菌株中纯化纤溶酶。【结果】从该菌株的发酵液中获得了一组纤溶酶单一组分（BpFE）,它的表观分子量为34 kDa。它在4℃~50℃活性较稳定,50℃以上活性急剧下降;作用最适pH值为pH5~6,在pH5~10活性较稳定,在pH3.0,活性几乎丧失;金属离子Ca2+,Mg2+,M