酿酒酵母呼吸缺陷型和野生型酒精发酵特性的比较分析*

比较了酒精发酵生产菌株IFFI1300及其呼吸缺陷型突变株在酒精产量、发酵动力学、耐酒精能力及与酒精发酵相关的乙醇脱氢酶活性等方面的特性。结果表明：1)发酵终期的酒精产量,45株呼吸缺陷型的平均值与野生型没有显著性差异;但部分缺陷型的酒精产量高于野生型。2)酒精发酵动力学结果显示,呼吸缺陷型酒精产生速度略高于野生型。3)单位重量干菌体的乙醇脱氢酶活性,呼吸缺陷型高于野生型。以上结果提示：呼吸缺陷型用于酒精发酵以提高酒精产量和缩短发酵周期是有潜力的。4)单位体积发酵液的乙醇脱氢酶活性则野生型高于呼吸缺陷型,主要原因在于呼吸缺陷型的生物量明显低于野生型。5)呼吸缺陷型菌株之间的耐酒精能力差别很小,耐酒精能力的高低与酒精产量的高低没有明显的正相关性。一般的,酒精产量高的菌株耐酒精能力较强。在实验结果的基础上,对呼吸缺陷型用于酒精发酵的优越性和可行性进行了讨论。     

肾脏原发性肿瘤CT 成像进展

肾脏原发性肿瘤种类繁多,多为恶性,且各病理亚型的影像表现均有不同。部分良性肿瘤如乏脂性血管平滑肌脂肪瘤、嗜酸细胞瘤难以与其区分,因此术前明确其组织学类型有助于治疗方案制定以及预后评估。CT是检查肾脏肿瘤的重要影像方法之一,除常规平扫、动态增强检查外,CT灌注成像、能量CT及PET-CT等亦提供了诸多信息。本文就其CT成像现状综述如下。     

塑料孔板原位免疫细胞化学、免疫荧光、特染方法的建立

细胞免疫化学、细胞各种特殊染色是我们常用的科研实验方法。常用的是盖玻片爬片染色法[1,2,3],此方法在研究工作中,操作繁琐、片薄易碎、去污不彻底、背景时常不洁净、细胞分布不均易脱落,影响了照片的清晰度。因此,我们一直摸索用塑料孔板原位染色代替盖玻片爬片染色,经过反复实验研究,解决了塑料孔板染色中的固定剂和封片剂两大难题,大大简化了操作过程,提高了染色的质量和实验结果的准确性。现将此方法介绍如下:材料和方法1.材料24孔培养板或6孔培养板4%多聚甲醛配制:4g多聚甲醛溶于PBS中,定容到100ml,存放在密闭容器中,65℃水浴中溶解,溶液4℃保存,两周内使用。封片剂配制:明胶7g溶于蒸馏水25ml温箱溶解,甘油35ml加蒸馏水40ml再加石碳酸0.25mg,二者混匀后温箱加热过滤。2.方法铺板:取对数生长期的细胞,经0.25%胰酶消化制成细胞悬液,计数24孔板铺2×104/ml细胞,6孔培养板2×105/ml细胞。根据孔底面积大小的不同,铺的细胞数也不同,一般以生长2-3d,空白比为50%为好,太稀、太密细胞形态不能充分展现。固定:加培养液2-3d,吸出培养液,用PBS洗一遍,加入4%多聚甲醛1-2ml,固定...     

螺旋霉素聚酮合成酶基因和抗性基因的克隆与表达的研究

根据不同聚酮合成酶基因DNA的同源性,利用放线紫红素聚酮合成酶基因act Ⅰ,actⅢ作探针,从螺旋霉索产生菌Str．spiramyceticus U-1941基因文库中检测并分离了螺旋霉素聚酮合成酶基因pCN3H8。限制酶酶切分析表明,其分子量为44kb。通过分子杂交实验,将螺旋霉素聚酮缩合酶基因(与act Ⅰ有同源性)及聚酮氧化还原酶基因(与actⅢ有同源性)进行了定位。pCN3H8 DNA在麦迪霉素产生菌变株Str.mycarofaciens sub sp．68中的表达产物,经紫外光谱分析与麦迪霉素相似。pCN3H8在放线紫红素聚酮缩合酶基因缺陷型变株Str．coelicolor TKl7中的表达产物,不具有放线紫红素的色素,其纸层析谱型与螺旋霉素有显著差别。pCN3H8在变青链霉菌Str．lividans TK24中的表达产物,也具有抗菌活性。将pCN3H8 DNA转化对螺旋霉素敏感的Str.griseofuscus原生质体,获得了螺旋霉素抗性的表达。从转化子中分离得到了质粒DNA pSG3,其分子量为7．0kb,可能是pCN3H8DNA转化Str．grlseofuscus时在体内缺失而形成。再转化实验证明,宿主菌对螺旋霉索的抗性,确实是由于pSG3 DNA作用的结果。含质粒pCG4,pSG3的螺旋霉素产生菌Str．Ambofaciens转化子螺旋霉素的产率明显提高。     

乳酸链球菌素的研究和应用

综述了一种新型天然食品防腐、保鲜剂-乳酸链球菌素的研究开发进展,主要从乳酸链球菌素的性质、作用机理、使用的安全性、活力单位的测定、作为食品添加剂的优缺点、在食品方面的用途及工业化秤现状等方面进行了探讨,以便我国更好地研究开发和利用这一生物工程产品造福食品加工业。     

海南岛吊罗山山地雨林物种多样性

在海南岛吊罗山热带山地雨林设置两５０００ｍ＾２的样地,分别从物种多样性指数,种－多度曲线,空间格局多样性,时间格局多样性,组成格局多样性对其进行了研究。结果表明海南岛吊罗山山地雨林物种多样性指数Ｓｈａｎｎｏｎ－Ｗｅａｖｅｒ和Ｓｉｍｐｓｏｎ指数分别为４．１９５和０．０２１,均匀度为０．８８０和２．９６２。     

重组酵母鸡γ干扰素的抗病毒活性测定及临床初步应用

为了获得具有天然抗病毒活性的重组酵母鸡γ干扰素,以Con A(刀豆素A)诱导培养4~10h的鸡全血中提取的淋巴细胞总RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出鸡γ干扰素成熟蛋白基因。通过EcoRⅠ和XbaⅠ两个酶切位点把鸡γ干扰素成熟蛋白基因插入到酵母表达载体pPICZa-A上,得到了重组酵母鸡γ干扰素表达载体pPICZa-A-CHIFN-γ,经BstxⅠ线性化后的重组载体被转入酵母菌株X33中,通过PCR的方法来筛选重组酵母菌,在甲醇诱导表达后,SDS-PAGE结果显示有两株重组菌在诱导72h后其表达上清中有大小为16kDa的目的条带。干扰素生物活性测定经典实验(微量病变抑制实验)和临床初步应用结果皆说明重组酵母鸡γ干扰素具有较强的抗病毒的生物活性和较好的临床使用前景。     

木蜂的巢内行为和交配策略

木蜂Xylocopa作为蜜蜂科的一个重要类群, 用来研究昆虫社会进化早期阶段具有重要意义。本文综述了近年来木蜂的营巢习性、 社会性行为和交配策略的研究进展。木蜂巢的建筑与巢内巢室的分布、 巢室的大小、 贮备蜂粮的效率和被寄生的敏感性等均有一定的关系。在筑巢地点, 随着木蜂种群数量的增加, 同种雌蜂之间的资源存在着竞争, 木蜂对巢室的守卫加强, 更多地表现为对同种雌蜂的守卫以及防御其他的天敌入侵。其社会多态性由独栖性向社会性演化, 主要表现为独栖性、 亚社会性、 半社会性、 共生性和准社会性等方式, 甚至同一种群内会出现不同的社会性行为。在交配策略上, 木蜂的雄蜂在外部形态特征上具有适应交配和寻找雌蜂的进化特征, 并且具有复杂的领地行为。这些研究理论对于我们深刻理解木蜂的行为生物学具有重要意义, 同时也有助于进行更深层次的社会性蜂类演化进程的探索。     

麝香石竹玻璃苗与正常苗的生理特性差异

诱导麝香石竹茎段外植体产生不定芽的分化,所得到的正常苗与玻璃苗的生理特性明显有差异。表现在玻璃苗的鲜重、干重、粗纤维和叶绿素含量与正常苗相比显著降低;玻璃苗的可溶性糖含量增加38％,而蔗糖含量下降63%,束缚水含量显著增高,自由水含量明显降低;玻璃苗的淀粉酶总活性也明显升高,碱性和中性区过氧化物酶同工酶活性显著提高而酸性区的同工酶活性有所下降。然而,玻璃苗和正常苗形成时的芽分化频率以及伸长生长量之间无明显区别。结果表明,麝香石竹试管苗的玻璃化可能是在碳水化合物代谢、氮代谢和水分存在状况等发生生理异常的情况下在芽分化启动后的生长过程中发生的,而不是在芽分化启动时已经决定的。     

诱导体外培养的骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化

选用Wistar大鼠分离骨髓间充质干细胞作体外培养及鉴定其表达抗原CD44、CDw90;采用10μmol／L 5-氮胞苷诱导第1代的骨髓间充质干细胞,于诱导后2、4周进行免疫细胞化学反应检测α-横纹肌肌动蛋白、肌钙蛋白T。证实体外培养的第1代骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷诱导可分化为心肌样细胞,为指导体外诱导的心肌细胞应用于。临床提供一定的理论依据和技术手段。