酿酒酵母木糖发酵酒精途径工程的研究进展

途径工程(Pathway engineering),被称为第三代基因工程,改变代谢流向,开辟新的代谢途径是途径工程的主要目的。利用途径工程理念,对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）代谢途径进行理性设计,以拓展这一传统酒精生产菌的底物范围,使其充分利用可再生纤维质水解物中的各种糖分,是酿酒酵母酒精途径工程的研究热点之一。这里介绍了近年来酿酒酵母以木糖为底物的酒精途径工程的研究进展。     

不同脂肪酸组成的油脂对LPS诱导的小鼠肠道炎症的影响

摘要：【目的】：比较观察不同脂肪酸来源的油脂对LPS诱导的小鼠肠道急性炎症的影响,为重症肠道感染提供肠内营养的数据参考。【方法】： 取12周龄雄性C57BL/6J小鼠40只,腹腔注射LPS（3.5mg/kg）24小时后,测量空腹体重,随机分为5组：玉米油组（ω-6脂肪酸）,橄榄油组（ω-9脂肪酸）,紫苏油组（ω-3脂肪酸）,中长链油组（中链脂肪酸）,LPS损伤组（灌胃葡萄糖）。根据组别灌胃小鼠,7日后取小鼠腹主动脉血及小肠组织,测定细胞因子水平和TLR4信号通路中相关分子的mRNA表达,并进行小肠组织病理切片观察。研究期间每日测量小鼠体重。【结果】：研究结束时,各组小鼠体重均升高,以橄榄油组和紫苏油组最高,且与LPS损伤组和玉米油组比较均有显著性差异（P<0.05）;血和小肠中TNF-α,IL-1β,IL-6水平及小肠TLR4、MyD88和TNF-α的mRNA表达以中长链油组最低,与LPS损伤组和玉米油组比较均有显著性差异（P<0.05）,而与橄榄油组和紫苏油组无显著性差异（P>0.05）。小肠组织病理切片结果显示：各组小鼠小肠粘膜均有不同程度的损伤,以LPS损伤组损伤最明显,玉米油组次之,橄榄油组处于中等水平,中长链油组与紫苏油组损伤较轻。【结论】：中链脂肪酸、ω-3脂肪酸和ω-9脂肪酸来源的油脂对LPS诱导的肠道炎症的修复作用均优于ω-6脂肪酸来源的油脂和葡萄糖,机制可能为抑制肠道TLR4信号传导途径相关因子表达,减少促炎细胞因子释放。     

百日咳全细胞菌苗的肾上腺素不应性低血糖活性的测定

<正>发展了一种新的检测方法,用于定量估计百日咳菌苗对肾上腺素诱导的小鼠高血糖的抑制作用。检验的统计学分析,是根据血糖水平的对数转换值估计的。这个方法极为敏感,能检测出0.004ml商品百喉—破伤风—百日咳全细胞菌苗的活性。计算的公共方差能小至0.0034,同时方法具有高度的重复性。在商品菌苗中,其活性具有显著性差异。原百日咳菌苗的活性,用5mM戊二醛于37℃30分钟可灭活,但对40mM甲醛于37℃处理5天却有抵抗力。化学试剂的灭活程度,采用平行线检验法与未处理的对照百日咳菌苗的活性作了计算。     

转hGM-CSF 基因HepG2 细胞疫苗侵袭性和生长活性初步检测

目的:探讨经60Co处理的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗的侵袭性和生长活性变化。方法:体外培养三种肝癌细胞(①野生型HepG2肝癌细胞②转染hGM-CSF基因的HepG2肝癌细胞③60Co射线处理的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗)采用MTT方法检测三种细胞在24h、48h、72h的OD值并绘出生长曲线;利用transwell小室进行体外侵袭实验来观察上述三种细胞侵袭性;用RT-PCR技术检测上述三种细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)在mRNA水平上表达的变化;结果:经60Co照射处理的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗组OD值在相同培养时间点较其他两组明显变小且差异有显著性(P<0.05)。三种细胞(上述①②③种细胞)transwell侵袭试验显示:③组穿过人造基底膜的细胞数量明显少于前两组;PT-PCR示:③组细胞的MMP-2的mRNA的表达明显低于①②。结论:经过60Co处理过的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗的侵袭性和生长活性均明显降低。     

麦冬不同提取物对过氧化氢损伤人血管内皮细胞ICAM-1、VEGF、Bcl-2 表达的影响

目的:观察麦冬不同提取物对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)间黏附分子-1(ICAM-1)和VEGF、Bcl-2表达的影响。方法:体外培养HUVEC,用过氧化氢(H202)制造HUVEC损伤模型。以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活数量,用流式细胞仪检测HUVEC表面ICAM-1的表达量;免疫细胞化学方法检测HUVEC的VEGF、Bcl-2的分布情况。结果:模型组较正常对照组细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。与模型组相比,经麦冬水提物、正丁醇提取物处理组细胞增殖活性明显增加(P<0.05,P<0.01)。流式细胞仪检测显示正丁醇提取物可降低过氧化氢增加的ICAM-1基因的表达。Bcl-2的表达,模型组明显低于正常对照组,而正丁醇组表达明显高于模型组(P<0.01)。VEGF的表达,模型组明显高于正常对照组,麦冬水提物、正丁醇提取物处理组高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:麦冬提取物具有抗凋亡、促增殖、降低细胞间黏附分子-1表达的作用,尤以正丁醇提取物效果更为显著。     

未来的疫苗

<正> 在人类发展的历史中,从来没有产生过一种比免疫更有效、更廉价的方法来预防疾病(G.Edsall,1963)。这项报告反映了疫苗在预防天花、脊髓灰质炎、麻疹、狂犬病、黄热病、白喉和破伤风疾病上的成功;它们在控制这些疾病中起了重要作用。但是,这些成功不应使我们看不清传染病仍然是世界性的主要健康问题。     

甲鱼败血症的研究

海安县某水产养殖场少数池甲鱼发生死亡现象,患病甲鱼以雌性为主,不同程度出现皮肤溃烂、坏死、红斑、口鼻流血、眼睛失明等症状,用抗生素等治疗效果不好。发病率达40％,死亡率在15％以上。经病原体分离鉴定,菌种毒力测定及人工感染试验,确认由嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）感染引起的败血症所致。     

寄生稻纵卷叶螟的长体茧蜂属一新种记述（膜翅目：茧蜂科：长体茧蜂亚科）

本报道寄生稻纵卷叶螟幼虫的长体茧蜂属一新种：纵卷叶螟长体茧蜂Macrocentrus cnapholocrocls,sp.nov。     

吸附精制百日咳菌苗稳定性的研究

本文对新一代吸附精制百日咳菌苗保存于不同温度条件下的安全和效力稳定性进行了实验,结果表明,９批吸附精制百日咳菌苗经贮存于４～８℃条件下半年、１年、２年和３年后,贮存于常温（１８～２２℃）半年后和贮放于３７℃４０天后,其贮存前后的ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ和ＨＳＵ／ｍｌ间的数值变化,均在制检规程要求的标准数值内,无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,说明菌苗的毒性无逆转、菌苗的安全性良好。３批吸附精制百日咳菌苗经贮存于４～８℃条件下７个月和２年后、其贮存前后的效力单位间的数值变化,均在制检规程要求的标准数值内,无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,说明菌苗的效力无下降,菌苗的质量稳定。     

敲低EDAG抑制乳头状甲状腺癌细胞的增殖

为研究EDAG在人乳头状甲状腺癌病人组织中的表达及在乳头状甲状腺癌细胞中的作用,利用免疫组化检测31例乳头状甲状腺癌癌组织及癌旁组织中EDAG蛋白的表达,并进行数据分析.包装EDAG敲低慢病毒颗粒,感染乳头状甲状腺癌细胞系K1,建立EDAG敲低稳定细胞株,检测EDAG敲低对细胞增殖、克隆形成、周期和凋亡的影响. 结果显示,EDAG蛋白在乳头状甲状腺癌癌组织中异常高表达,而在对应癌旁组织极低表达或不表达.建立稳定敲低EDAG的K1细胞株,敲低效果达到约96%,敲低EDAG后细胞增殖变缓,倍增时间由18.49±0.19 h变为19.47±0.11 h,且克隆形成能力下降,G0/G1期比例升高,无血清培养时凋亡增多.本文报道了EDAG在乳头状甲状腺癌病人中高表达,且敲低甲状腺癌细胞系K1中内源EDAG抑制细胞增殖,降低细胞克隆形成能力,G0/G1期增多,凋亡升高,提示EDAG异常高表达可能在甲状腺癌发生发展中具有重要作用.