脂肪酶活性和选择性受溶剂不同物化参数控制

采用假单胞菌脂肪酶在不同溶剂中催化辛酸与外消旋２－辛醇间的不对称酯合成反应时发现,酶的催化活性和对映选择性分别受溶剂不同物化参数的影响。前乾与溶剂疏水性有较发孤相关关系;而后者与介电常数和偶极矩关联较好。通过反动力学研究和由此提出孤脂麦活性中心结构模型对上述现象作了合理的解释。     

酶促拆分丁酸环氧丙酯反应体系的筛选

利用脂肪酶对外消旋丁酸环氧丙酯进行了立体选择性的酯水解反应,考察了水解反应体系对拆分反应的影响。实验结果表明：在该水解反应中添加适量正己烷有利于拆分反应的进行;反应体系中正己烷与缓冲液的最适体积比为1：1;磷酸盐缓冲液(pH7．6)的最适离子强度为0.03mmol／L。在最适反应条件下,当该酶促拆分反应的转化率为60.6％,(R)-丁酸环氧丙酯的光学纯度可以达到93．3％。     

适于非水相催化用细菌脂肪酶基本性质的研究

对假单胞菌产脂肪酶的基本酶学性质进行了研究．该酶水解油脂时的最适作用ｐＨ为９．０,最适作用温度为４５℃;在ｐＨ７．０～１０．０范围内稳定,在６０℃以下热稳定性良好．Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋等金属离子对酶有明显的激活作用,而Ｈｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｓｎ２＋等重金属离子却对酶有较强的抑制作用;几种表面活性剂和胆汁盐均使酶发生不同程度的失活．该酶在水解油脂时表现出１,３－位置专一性,且对不同种类和来源的油脂水解作用速率不同     

不同修饰剂对尿激酶化学修饰的对比研究

近年来为了解除某些酶制剂的抗原性,提高某些酶对环境的稳定性和延长其在体内的半衰期,以充分发挥其临床效果,国内外曾用PEG,Dextran及其硫酸酯,肝素钠等水溶性大分子对某些酶制剂的自由氨基进行共价修饰,取得了较好效果。但是由于各个实验室所修饰的酶不同,所用修饰剂及其活化方法也不同,所以对这些修饰剂或活化方法的修饰效果难以进行比较。因此我们用不同修饰剂采取不同活化方法对同一种酶——尿激酶进行修     

β—葡萄糖苷酶的分离纯化和性质研究

采用分子筛和离子交换层析技术从黑曲霉Ｌ－２２菌株发酵液中分离提纯了一个由两个相同的亚基组成的β葡萄糖苷酶。研究了其酶学性质和底物专一性。     

脂肪酶的底物底特异性及其应用潜力

不同来源的Ｌｉｐａｓｅ对底物油脂中脂肪酸的链长,不饱和度及不饱和脂肪酸的双键位置表现不同的脂肪酸特异性;对甘油酯Ｓｎ－１（３）和Ｓｎ－２位酯键具有不同的位置特异性,对甘渍酯中立体对映结构的１位和３位酯键呈现不同立体特异性,脂肪酶能够催化酯水解和酯合成（酯交换）反应,用于制备渍单酯,多不饱和脂肪酸及其酯和具有光学活性的有机化合物,因此害油酯加工和有机合成中具有很大的应用潜力。     

两亲分子解除乙醇对内切葡聚糖酶的抑制作用

乙醇（１０％Ｖ／Ｖ）对内切葡聚糖酶存在抑制作用,一定浓度的ＢＲＩＪ３５、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｔｗｅｅｎ２０可以部分或基本解除乙醇的抑制,而ＳＤＳ不能解除乙醇对酶的抑制。从荧光光谱可见,乙醇使酶分子的生色团埋藏于分子内部,两亲分子则反之。圆二色谱揭示了酶分子α螺旋结构为活性所必需。两亲分子结构不同,解除乙醇对酶抑制的能力也不同。     

嗜热性古核菌的研究进展

古核菌是有区别于细菌,真菌独特的生理,生化特性。特别是嗜热古核菌的发现,扩大了生物酶资源,使许多高温反应得以实现。但是由于野生菌培养条件苛刻,生长周期长,限制了对其的进一步应用,目前主要采用定向进化的方法进行体外重组来获得大量的目标蛋白。来自于嗜热菌的嗜热酸通常对酸,碱,有机溶剂等有较好的抗性,特别是热稳定性好,其稳定机制与结构密切相关,一级结构中疏水,带电荷及芳香族氨基酸相对较多,二级结构中α螺旋结构更加稳定,从高级结构看,嗜热蛋白质含有大量的盐桥,氢键,离子对等与稳定性相关的因素。