无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用

目的:本文采用N2B27无血清无饲养层的完全已知成份的培养体系,通过机械分离法分离不同阶段的绵羊囊胚,观察不同阶段囊胚对分离绵羊类胚胎干细胞的影响。方法:本实验采用N2B27无血清无饲养层成份完全已知的培养体系,利用机械分离法对不同阶段的绵羊囊胚进行分离,观察其绵羊类胚胎干细胞的原代集落形成率,以及AKP染色,多潜能性候选基因Oct-4和Sox-2免疫荧光检测。结果:分离早期阶段绵羊囊胚获得的绵羊类胚胎干细胞的形成率显著低于扩张(孵化)阶段囊胚(19.6%(11/56)vs 36.9%(31/84))(P0.05),同时早期和扩张(孵化)阶段绵羊囊胚的AKP染色和多潜能性候选基因Oct-4、Sox-2的表达呈阳性。结论:N2B27无血清无饲养层培养体系是一种有效分离绵羊类胚胎干细胞的培养基,同时分离绵羊扩张(孵化)阶段的囊胚可以显著的提高原代类胚胎干细胞的建系率,为提高绵羊类胚胎干细胞的建系奠定了基础。     

黄芪甲苷后处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的作用研究

目的:观察黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,AsⅣ)后处理对缺氧复氧损伤(simulated ischemia reperfusion injury,SI/RI)的SD乳鼠心肌细胞是否具有保护作用。方法:将乳鼠原代心肌细胞平均分为五组,即空白对照组(Control)、缺氧复氧处理组(SI/RI)、黄芪甲苷预处理(5,10、20μM)+SI/RI组(AsIV+SI/RI)。各组细胞经处理后,四氮唑溴盐比色法(MTT)检测各组细胞存活率;TUNEL染色法测定各组细胞凋亡率;SOD测试盒检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)含量,总嘌呤氧化酶(XOD)测试盒检测丙二醛(MDA)含量。Western blot法检测各组细胞抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果:与空白组相比,缺氧复氧损伤组细胞活力显著下降(P0.05),凋亡率显著上升(P0.05),其培养液中SOD水平显著降低(P0.05),MDA水平显著升高。而不同浓度AsⅣ后处理组的心肌细胞存活率显著上升,凋亡率显著下降,培养液中SOD水平显著上升,MDA水平显著下降(P0.05),且呈浓度呈依赖性。Western blot结果显示AsⅣ后处理组细胞中的Bcl-2表达明显上升,Caspase-3明显下降。结论:黄芪甲苷后处理对缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤具有显著的保护作用,能够显著上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,下调促凋亡蛋白Caspase-3的表达。     

Ghrelin,CGRP,NT对胃肠作用的研究进展

胃肠道是人体内最大的激素分泌器官,是调节肽即胃肠激素最丰富的来源。胃肠激素与胃肠功能有很大关系,它们与神经系统一起,共同调节消化器官的运动、分泌和吸收及其他多种功能。促生长素(Ghrelin)、降钙素基因相关肽(CGRP)和神经降压素(NT)是近年来新发现的胃肠激素中的代表。Ghrelin主要由胃组织产生,可以促进胃肠蠕动,还可促进胃酸分泌,这些作用是由迷走神经所介导的,ghrelin还具有对消化道粘膜的保护作用,此作用受多种方式调控。CGRP广泛分布于中枢和外周神经系统,有调节胃肠血流、胃肠分泌及胃肠运动等多种功能,目前学者普遍认为CGRP这些生物学效应的发挥是通过一氧化氮(NO)及前列腺素(PG)介导的。NT广泛分布于脑和胃肠道及其它组织中,由肠道N细胞分泌,能够抑制胃肠运动,对胃肠黏膜细胞具有保护作用,这些作用是迷走神经、调节肽等多种途径介导的。随着对这三种胃肠激素的深入了解,人们将对人体胃肠道疾病产生更加深刻的认识。本文就近年来对Ghrelin、CGRP、NT对胃肠作用的研究作一综述。     

内、外侧肱骨远端解剖钢板手术治疗肱骨髁上及髁间粉碎性骨折

目的:探讨内、外侧远端解剖钢板手术治疗肱骨髁上及髁间粉碎性骨折临床效果及安全性.方法:选取我院骨科2009年3月-2012年5月收肱骨髁上及髁间粉碎性骨折患者80例,采用随机数字表法分为Y型钢板组和双钢板组,每组各40例;分别采用Y型钢板内固定治疗和内外远端解剖钢板内固定治疗;比较两组患者术后临床改善优良率及术后并发症发生情况等.结果:Y型钢板组和双钢板组患者临床改善优良率分别为80.0％,100.0％;双钢板组患者临床改善优良率明显优于Y型钢板组,组间比较差异显著(P＜0.05);同时Y型钢板组和双钢板组患者术后不良并发症发生率分别为22.5％,5.0％;双钢板组患者术后并发症发生率明显低于Y型钢板组,组间比较差异显著(P＜0.05).结论:相较于Y型钢板,内、外侧肱骨远端解剖钢板手术治疗肱骨髁上及髁间粉碎性骨折临床效果确切,能够有效缓解疼痛,改善肘关节活动范围,同时术后并发症风险降低,具有较高临床应用价值.     

木棉基因组DNA提取方法的比较研究

木棉组织细胞含有多酚类、糖类、萜类化合物和其他次生代谢物质,很难得到高质量的基因组DNA。为了获得高质量的木棉基因组DNA,本实验以两个不同地方采集的木棉成熟叶片为材料,采用CTAB法、SDS法、普通试剂盒、磁珠法试剂盒以及对以上4种方法进行改良后的4种方法,提取总的木棉DNA。通过微量紫外-分光光度计、琼脂糖电泳对所提取DNA的纯度、得率,毒害及耗时等方面进行了比较。结果表明:经改良后提取的DNA质量都有所提高,且改良的磁珠法试剂盒效果最佳,可直接用于下游分子生物学实验。     

新体系下茴脑臭氧化反应制取茴香醛(英文)

以茴脑为原料,乙酸乙酯和水为新型混合溶剂,室温下通过臭氧化分解反应制取茴香醛,并对比了该体系下和传统溶剂体系下茴香醛产率的差别。实验考察了溶剂种类、溶剂用量、臭氧气流量、混合溶剂中水含量和反应时间等工艺参数,并通过红外光谱和紫外分光光度计对反应机理进行了探讨验证。该反应在水的存在下实现了室温下一锅法合成茴香醛,产率可达81.7%,避免了茴脑臭氧化物的分离及还原步骤,工艺简单,洁净环保。     

雪灾对古田山常绿阔叶林群落结构的影响

为了解雪灾对亚热带常绿阔叶林群落结构的影响,我们于2008年初对右田山24 ha固定监测样地进行了调查.经统计,约1/3的树木遭受重度损伤,1/3的树木遭受轻度损伤.选择生境类型、胸径、物种的物候犁、生长型4个因子,用多项逻辑斯蒂回归分析了这些因子对个体损伤的影响.结果表明:低海拔山谷受损最严重,树木倒伏、折断的倾向最大,高海拔山脊受损最轻.胸径影响树木的受损程度和类型,大致来说,随着胸径的增大,树木受损的比例增大,折断、断梢相对于压弯的可能性逐渐增大,断枝相对折断、断梢的可能性也逐渐增大.常绿物种较落叶物种受损更重.由于上层乔木的庇护,灌木树种受损较为轻微.采用除趋势对应分析(DCA)比较了雪灾前后群落结构的变化,结果表明:在40 m×40 m尺度上,群落的变化与随机变化的零假设有显著差异,这说明冰雪灾害对个体的损伤不是随机的,而是有物种选择性的,如甜槠(Castanopsis eyrei)、木荷(Schima superba)和马尾松(Pinus massoniana)等物种受灾情况显著低于随机损伤的零假设,而青冈(Cyclobalanopsis glauca)、石栎(Lithocarpus glaber)、马银花(Rhododendron ovatum)等物种显著地高于随机损伤的零假设,群落的物种组成在雪灾后发生了显著的变化.     

亚热带常绿阔叶林群落物种多度分布格局对取样尺度的响应

为揭示物种多度格局随尺度的变化规律,探讨多度格局形成的机理及生态学过程,作者以古田山亚热带常绿阔叶林24 ha固定监测样地为背景.采用断棍模型(broken stick model)、对数正态模型(Iognormal distribution model)、生态位优先占领模型(preemption model)、Zipf模型(Zipf model)、Zipf-Mandelbrot模型(Zipf-Mandelbrot model)及中性理论模型(neutral model),对不同尺度下的物种多度分布格局进行拟合,并采用AIC检验和卡方检验选择最优拟合模型.结果表明,不同尺度上适合的物种一多度曲线模型不同;在取样边长为10 m和20 m时,除中性模型外的5个模型均不能被拒绝,它们均适合小尺度下的格局,这表明存小的尺度上生态位过程对物种一多度曲线的格局贡献较大;在取样边长为40 m时,最适合的模型为对数正态模型;取样边长为60 m和80 m时,Zipf-Mandelbrot模型为最优拟合模型;在取样边长为100 m时,尽管Zipf-Mandelbrot模型有最小的AIC值,但卡方检验拒绝了除中性模型外的5个模型;中性理论模型除了边长为10 m和20 m尺度以外,在其他尺度上均比前面5种模型的预测效果更好.因此在研究物种多度分布规律时必须注意空间尺度的影响.研究结果表明随着尺度的增加,中性过程成为决定物种一多度曲线格局的主要生态过程.     

通过G418 处理离体纯化小鼠胰腺上皮细胞

目的:探索一种能有效去除成纤维细胞,筛选有较强增殖能力上皮细胞的方法。方法:本研究利用成纤维细胞对G418敏感的特性,在成体小鼠胰腺细胞分离后,采用悬浮细胞直接接种到含30μg/mL G418的培养基中,或细胞贴壁生长汇合至50-70%后用30至100μg/mL之间不同浓度G418处理24h、48h或72h两种方案进行上皮细胞的纯化。结果:在直接接种法培养处理中,存活的大部分细胞为成纤维细胞,上皮细胞的生长受到抑制,无法得到纯化的胰腺上皮集落;而在细胞贴壁生长汇合至50-70%后经G418处理,成纤维细胞随着处理浓度的增加死亡率也在逐渐上升,其中50μg/mL G418处理72小时对去除成纤维细胞效果最佳。结论:G418处理能够有效去除成纤维细胞,分离纯化出一群在离体条件下具有强增殖能力、形成大上皮细胞集落的细胞。该分离纯化方法为今后进一步研究成体胰腺干/祖细胞增殖与分化调控机制等问题奠定基础。     

改良Cabrol 分流在主动脉夹层手术后的疗效

目的:探讨改良Cabrol分流在升主动脉人工血管置换中的临床疗效。方法:收集2002年9月至2009年12月升主动脉人工血管置换术共72例,其中行改良Cabrol分流为39例(GroupⅠ)、瘤壁包裹人工血管不分流和完全剔除瘤壁不分流为31例为31例(GroupⅡ)。计算两组术后24h、48h的心包纵隔引流量并进行统计学分析,并对Cabrol分流的病人在术后1周和3月行心脏超声心动图检查了解是否有分流存在。结果:术后24h、48h心包纵隔引流量引流量GroupⅠ相似文献