山羊乳腺生物反应器表达人促红细胞生成素的分离纯化

以离子交换、疏水作用、HPLC和凝胶过滤层析等方法对山羊乳腺生物反应器表达的人促红细胞生成素 (erythropoietin ,EPO)进行了分离纯化 ,初步探讨了其分离工艺 ,结果得到了纯度达到 96%以上的纯品 ,所纯化的EPO分子质量为 32kDa ,糖基化程度根据理论分子质量测算为40 %。Western blot证明所得纯化产品具有天然EPO免疫原性 ,N端氨基酸序列测定与文献报道一致 ,ELISA检测免疫活性为 2 4 0 0 0 0IU mg,表明通过 4步纯化步骤可以得到高纯度的产品 ,为今后工艺放大提供了有力的实验依据。     

食管癌患者口腔脱落上皮细胞微核的观察

自1953年J. D. Watso。和F. H. Crick提出 DNA分子的双织旋结构的模式以来,已经过了38年, 虽然在人类历史的长河中仅是霎那之间,然而在生物 学界却发生了翻天反地的变化,在这期间,遗传学和生 物化学已经在分子水平上阐明了遗传物质的结构,遗 传信息的i0t存和传递的规律。确定了生命活动的中心 法则CDNA--RNA-"+蛋白质,从而促使生物学各学科 迸人分子水平,迎来了分子生物学xL勃发展的黄金时 代．七十年代中期,由于DNA限制性内切酶的使用,又 诞生了造传工程,最近一项投资近30亿美元的,堪与曼 哈顿原予弹计划和阿彼岁登月计划比拟的人类_,}.因组 泌序计划在美国开始实施。所有这一切成就,无一不 足以DNA双螺旋构型为理论基砒的,因此,有关DNA 结为的任何新发现,必将受到生物学界的关注。在八 十年代即将结束时,《中Pq科学报》、《科扶日报》、《人 民口报海外版》以及中[i*'7 q际广播电台等相继报道了 中国科学院化学研究所青年科学家白春礼领导的实验 空对生命科学研元的“新发现”《我国首次利用STM Arn寮到DNA三辫链状结构》以及对该项发现将产生 的生物学=it }1:意义作了种种顶测,引起了我国科学界 的高度ccrf ,."}>f《中1.9科学报,和《科技日报》都把该项 发涎评为1990年我国十大科技新闻之一。最近有机会 续了+I;NA变异结构的扫描隧道显微镜的研究》的原 文（科学通报1990,24; 1841-1842,以下简称白文＼后, 我觉得对待一项新发现,尤其儿讨补象D NA双螺旋 结构那样的研究领域的髓盖iKi极大。并已为科学界公 认的重大自然科学理论持有异议的“新发现”必须十分 郑重421码要进行同行评估,对其实验设计的合理性, 得到结果的可靠性进行必要的审查和论证,否则,万一 设计的实验有疏忽,越宜传它的“重要意义”,越影响科 学工作的严肃性,甚至影响国际声誉,因此本文试从生 物学的几个方面,谈谈对“三辫结构”在生物体内存在 的可能性和它的港在生物学意义,最后对“白文”的实 验设计和结果进行初浅的分析。     

基因枪法获得逆境诱导转录因子DREB1A转基因小麦的研究

以小麦品种H6756和藁城8901作为基因枪转化的靶材料,取其护颖至雌雄蕊原基形成期的幼穗,用含逆境诱导转录因子DREB1A和bar基因的质粒pAHC25轰击胚性愈伤组织,在分别含有5mgL和10mgLBasta溶液的培养基上进行筛选。得到的抗性愈伤组织在不含Basta溶液的培养基上再生培养,获得218棵再生植株。田间涂抹浓度为100mgL的Basta溶液检测后,对抗性植株作PCR检测,获得54棵再生植株。通过对其中20株T1代的PCR和Southern杂交分析,已获得14株含DREB1A和bar基因的转基因小麦植株,其中H675613株,藁城89011株。     

水稻害虫的可持续治理及经济效益评估

以对白背飞虱具有不同抗性的水稻品种嘉花1号（抗白背飞虱粳稻品种）和汕优63（感虫杂交稻）为试材,研究了不同杀虫剂处理对水稻害虫数量及稻米品质和产量的影响,并对其经济效益进行了评估.结果表明,无杀虫剂处理的嘉花1号上白背飞虱的高峰虫量仅为汕优63的1/10,在整个水稻生长季节,嘉花1号上的白背飞虱种群数量始终处于经济危害水平以下,而汕优63却受到白背飞虱的严重危害;无杀虫剂处理的蜘蛛数量比农户管理小区高3～7倍.不施用杀虫剂处理的嘉花1号和汕优63的产量分别下降11.8%和43.4%.与不施杀虫剂处理相比,1次杀虫剂处理的嘉花1号和汕优63的实际经济收入分别下降0.9%～2.6%和2.6%～4.7%,完全不施用杀虫剂时,汕优63的实际经济收入减少32.9%～36.1%,而嘉花1号反而增收2.2%～4.8%.此外,无杀虫剂处理嘉花1号的稻谷收入为9403元·hm^-2,明显高于3种杀虫剂处理的汕优63（8632元·hm^-2）.杀虫剂处理不影响嘉花1号和汕优63的稻米加工、外观和食用品质,却降低了其蛋白质含量.     

我国北方有益瓢虫越冬集群的考察

在毛主席革命路线指引下,我国北方有益瓢虫越冬集群的考察得到了迅速发展。特别是无产阶级文化大革命以来,广大科技人员与群众相结合,深入实际调查研究,发掘了瓢虫越冬集群的资源,为开展害虫的生物防治提供了依据。 一、攀登雪山险峰 为革命考察 我国疆域辽阔,幅员广大,昆虫区系复杂,益虫资源丰富,有益瓢虫就是一种很有前途的资源,它对控制农、林作物的蚜虫、蚧虫等起着重要作用。解放前,一     

猪瘟病毒野毒株持续感染细胞模型的稳定性研究

以本实验室建立的CSFV39-PKl5持续感染细胞模型为实验材料，综合运用免疫荧光、RT-PCR、流式细胞仪，对其稳定性进行研究。实验结果均表明，该细胞模型有着良好的稳定性。即使在连续传至128代的CSFV39-PKl5传代细胞中，CSFV仍持续存在：呈免疫荧光抗体反应阳性和RT-PCR检测阳性。同时，该细胞与正常的PK-15细胞相比，细胞周期无显著差异。通过同段序列的同源性比较，发现CSFV39与CSFV石门株的同源性最高，达99．02％。     

SLC2A9rs1014290位点基因多态性与北方汉族地区男性痛风发病的相关性研究

目的:探讨可溶性载体2家族成员9基因(SLC2A9)rs1014290位点的单核苷酸多态性与北方汉族地区男性原发性痛风的发病的相关性。方法:选取404例原发性痛风男性患者和412名健康体检者,分别检测其血清尿酸、血脂、肾功等生化指标,同时提取外周血DNA,应用连接酶检测反应(LDR)法分析其SLC2A9基因rs1014290位点基因型和等位基因频率。结果:痛风组空腹血糖、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、收缩压、BMI、肌酐(Cr)水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。痛风组SLC2A9基因rs1014290位点各基因型频率(CC:12.8%;CT:53.5%;TT:38.7%)与对照组(CC:16.2%;CT:50.9%;TT:32.9%)相比差异有统计学意义(X2=3.978,P=0.041);两组的等位基因频率相比差异无统计学意义(X2=0.314,P=0.496)。结论:SLC2A9基因rs1014290位点多态性可能与我国北方汉族男性原发性痛风的易感性相关,携带TT基因型的个体更易患痛风。     

NDRG2 通过调控CD24 影响肝癌细胞侵袭能力的研究

目的：阐明NDRG2（N-Myc downstream-regulated gene 2）在肝癌细胞中对CD24 的调控及其对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。 方法：Western blot 检测低转移性的肝癌细胞Huh7、高转移性的肝癌细胞系MHCC97h 及正常人肝细胞系L-02 中NDRG2 和 CD24 的表达;通过腺病毒载体上调MHCC97h 细胞中NDRG2 的水平,或利用siRNA 下调Huh7 细胞中NDRG2 的表达,检测 CD24 的变化以及细胞侵袭能力的改变。结果：MHCC97h 细胞中NDRG2 基因和蛋白的表达水平低于Huh7 细胞,而CD24 的表达 水平高于Huh7 细胞;在MHCC97h 细胞中上调NDRG2 可以抑制CD24 的表达并抑制其侵袭能力,而在Huh7 细胞中下调 NDRG2 的表达可以提高CD24 的水平及细胞的侵袭能力。结论：NDRG2 可能通过影响CD24 参与调控肝癌细胞的侵袭能力。     

无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用

目的:本文采用N2B27无血清无饲养层的完全已知成份的培养体系,通过机械分离法分离不同阶段的绵羊囊胚,观察不同阶段囊胚对分离绵羊类胚胎干细胞的影响。方法:本实验采用N2B27无血清无饲养层成份完全已知的培养体系,利用机械分离法对不同阶段的绵羊囊胚进行分离,观察其绵羊类胚胎干细胞的原代集落形成率,以及AKP染色,多潜能性候选基因Oct-4和Sox-2免疫荧光检测。结果:分离早期阶段绵羊囊胚获得的绵羊类胚胎干细胞的形成率显著低于扩张(孵化)阶段囊胚(19.6%(11/56)vs 36.9%(31/84))(P0.05),同时早期和扩张(孵化)阶段绵羊囊胚的AKP染色和多潜能性候选基因Oct-4、Sox-2的表达呈阳性。结论:N2B27无血清无饲养层培养体系是一种有效分离绵羊类胚胎干细胞的培养基,同时分离绵羊扩张(孵化)阶段的囊胚可以显著的提高原代类胚胎干细胞的建系率,为提高绵羊类胚胎干细胞的建系奠定了基础。     

黄芪甲苷后处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的作用研究

目的:观察黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,AsⅣ)后处理对缺氧复氧损伤(simulated ischemia reperfusion injury,SI/RI)的SD乳鼠心肌细胞是否具有保护作用。方法:将乳鼠原代心肌细胞平均分为五组,即空白对照组(Control)、缺氧复氧处理组(SI/RI)、黄芪甲苷预处理(5,10、20μM)+SI/RI组(AsIV+SI/RI)。各组细胞经处理后,四氮唑溴盐比色法(MTT)检测各组细胞存活率;TUNEL染色法测定各组细胞凋亡率;SOD测试盒检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)含量,总嘌呤氧化酶(XOD)测试盒检测丙二醛(MDA)含量。Western blot法检测各组细胞抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果:与空白组相比,缺氧复氧损伤组细胞活力显著下降(P0.05),凋亡率显著上升(P0.05),其培养液中SOD水平显著降低(P0.05),MDA水平显著升高。而不同浓度AsⅣ后处理组的心肌细胞存活率显著上升,凋亡率显著下降,培养液中SOD水平显著上升,MDA水平显著下降(P0.05),且呈浓度呈依赖性。Western blot结果显示AsⅣ后处理组细胞中的Bcl-2表达明显上升,Caspase-3明显下降。结论:黄芪甲苷后处理对缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤具有显著的保护作用,能够显著上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,下调促凋亡蛋白Caspase-3的表达。