脊髓灰质炎2型病毒样颗粒在毕赤酵母内的表达与鉴定

目的构建可稳定表达脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)的整合型重组毕赤酵母,鉴定PV VLPs在毕赤酵母细胞中的表达及组装情况。方法根据毕赤酵母密码子偏好性优化salk株II型P1和3CD基因并连接到p Pic ZA载体,构建p Pic ZA-P1-3CD表达载体;用Bgl II线性化p Pic ZA-P1-3CD载体,电转至毕赤酵母GS115中。通过Zeocin抗性筛选获得整合型重组毕赤酵母,随后用高浓度Zeocin抗性筛选得到高表达菌株。甲醇诱导后,用Western Blot检测目的蛋白表达;蔗糖密度梯度离心纯化PV VLPs并进行透射电镜观察。结果成功构建p Pic ZA-P1-3CD表达载体,获得PV VLPs重组毕赤酵母。Western Blot在重组毕赤酵母裂解上清中检测到目的蛋白的表达;蔗糖密度梯度离心纯化后,在透射电镜中观察到直径为30 nm左右的VLPs,其形态与天然的PV颗粒相似。结论成功构建PV-2型VLPs的整合型重组酵母系统,并在毕赤酵母中组装形成了VLPs,为酵母表达系统中PV VLPs疫苗的研制奠定了基础。     

与光系统Ⅱ颗粒结合的对DTT敏感的蛋白酶的纯化和性质

菠菜光系统Ⅱ颗粒的１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ抽提液经ｂｕｔｙｌ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ６５０Ｍ疏水层析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析分离得一种对ＤＴＴ敏感的蛋白酶。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｓｕｐｅｒｏｓｅ１２凝胶过滤测得该酶的分子量为３７ｋＤ,其为单体酶。该酶可降解１８ｋＤ和２４ｋＤ水溶性蛋白质,分别产生１３．２ｋＤ、１２ｋＤ、１０．５ｋＤ和２３ｋＤ、２２ｋＤ、２０ｋＤ片段,最适ｐＨ为８．０,对ＮａＣｌ不敏感,对ＤＴＴ和β－Ｍｅ敏感。抑制实验表明该酶不属丝氨酸类蛋白酶。     

我国钩端螺旋体菌苗的成就与展望

本文简要介绍了我国钩端螺旋体菌苗３７年来,从无到有,不断发展完善,从其研制生产与应用等方面所取得的成就和展望。     

国际细菌浊度参考制品的历史与现状

<正>一、概况: 国际细菌浊度参考制品(以下简称国际标准)是国际卫生组织生物标准委员会建立的。它的建立是为了使不同的国家从事细菌工作的实验室,便于交流经验和按照国际生物制品规程生产和检定有关浊度的依据。     

PARP2表达对肝细胞癌模型小鼠肿瘤生长及化疗敏感性影响及其机制研究

摘要 目的：研究聚[ADP-核糖]聚合酶2（Poly[ADP-ribose]polymerase 2, PAPR2）表达对干细胞癌模型小鼠肿瘤生长和对化疗药物敏感性的影响。方法：未转染的（对照组）、空载质粒转染（空载组）和si-PARP2转染（si-PARP2组）的Huh7细胞作为研究对象,比较体外化疗药物对不同Huh7细胞克隆形成数目和凋亡率。通过腋下皮下注射不同Huh7建立肝细胞癌模型小鼠,采用结晶紫染色观察并计数克隆形成数目;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测Huh7细胞凋亡率;排水法测定肿瘤组织体积;免疫印迹法检测PARP2, B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2, Bcl2）和Bcl-2-Associated X蛋白（Bcl-2-Associated X, Bax）蛋白表达。结果：在体内外,转染si-PARP2均显著降低肝癌细胞中PARP2蛋白表达（P<0.05）。在体外,对照组和空载组Huh7细胞形成的细胞克隆数目和化疗药物诱导的凋亡率比较无显著差异（P>0.05）;si-PARP2组Huh7细胞形成的细胞克隆数目显著低于对照组和空载组（P<0.05）,而化疗药物引起的细胞凋亡率显著高于空白组和对照组（P<0.05）。在体内,si-PARP2组小鼠肝癌移植瘤重量和体积均显著低于对照组和空载组（P<0.05）。此外,与对照组和空载组相比,肝癌移植瘤组织内细胞经阿霉素治疗后细胞凋亡率、Bax和cleaved-caspase 3蛋白表达水平显著增加（P<0.05）,而Bcl2蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论：PAPR2基因敲低可以显著抑制肝癌模型肿瘤生长和增强肝癌细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能与PAPR2基因敲低促进肝癌细胞凋亡有关。     

三种蜘蛛两种害虫共存系统水稻损失率数学模型探讨

本文应用二次回归旋转组合设计研究了三种蜘蛛(拟水狼蛛、食虫瘤胸蛛、粽管巢蛛)两种害虫(稻纵卷叶螟幼虫、褐稻虱若虫)共存系统水稻损失率的数学模型。初步的结果分析表明共存系统中天敌通过捕食害虫能明显地减轻水稻损失;在供试的密度范围内,褐稻虱自身密度每增加1倍,水稻损失率大约增加6％左右;稻纵卷叶螟幼虫密度的增加对水稻损失有加重趋势,但损失率的增量较小。     

国产与法国Merieux产伤寒Vi多糖菌苗人体接种反应及血清抗体应答比较

作者对国产伤寒Ｖｉ多糖菌苗和法国Ｍｅｒｉｅｕｘ产伤寒Ｖｉ多糖菌苗人体接种反应及血清抗体应答情况进行比较,接种后６～８小时法国菌苗的体温反应同国产菌苗相比有显著性差异（ｘ２＝５．３４７,０．２５＞Ｐ＞０．０１）,２４小时后反应消失,免后一月国产菌苗和法国菌苗Ｖｉ抗体四倍增长率分别为９１．８０％和８９．６％（ｘ２＝０．１６４,Ｐ＞０．０５）,ＧＭＴ分别为３６．９４和３５．４９（ｔ＝０．６５３,Ｐ＞０．０５）,二者均无显著性差异。     

全球变化下植物物候研究的关键问题

总结了全球变化下植物物候研究的主要进展,针对该领域国内外的几个热点问题进行了讨论。植物物候研究的重心从以前的野外观测和初步统计分析逐步过渡到以揭示物候周期的调控机制和环境效应为主,研究手段从植物物候对环境变化做出反应的表象描述转移到多尺度、多要素耦合关系的综合分析。随着学科交叉研究的不断深入,植物物候研究从植物个体及居群适应性研究转向植物物候变化对生态系统、气候演变、农业生产乃至人类健康等方面影响的系统评估。并且在该转变过程中出现了几个关键性问题,如不同温度带大气温度与光周期对植物物候期贡献力问题、植物物候变化对气候变暖的非线性响应特征、群落水平上植物物候研究的复杂性、以及农业生态系统中作物物候研究的重要性等。对我国植物物候研究现状和管理体系中亟待解决的问题提出了建议。     

田间蜘蛛集团对飞虱的每日捕食量与室内、盆栽水稻的捕食作用比较

采用控制论中的脉冲采样法结合杀死飞虱计数法研究了田间蛛蛛对飞虱的每日捕食量估计并与室内,盆栽罩笼水稻功能反应的捕食作用进行了比较,结果表明田间蜘蛛平均每头每日对飞虱的捕食量为0.669头,这一捕食量比室内和盆栽水稻的捕食量要小得多;田间捕食百分率与飞虱密度呈二次抛物线关系,即飞虱低密度和高密度捕食百分率均低于中等密度,在每穴10头飞虱左右,捕食量和捕食百分率最高,在有一定存量蜘蛛时,捕食量与微蛛,狼蛛数量呈显著的二元线性回归关系,但偏相关系数为负,由此表明随蜘蛛密度的增加捕食量反而下降,这与一些多物种共存系统和田间罩笼的研究结果相一致。     

不同药剂亚致死剂量对褐飞虱不同种群生命表参数的影响

褐飞虱是亚洲地区爆发性再猖獗型害虫.由于吡虫啉等药剂的过度使用导致抗药性显著上升.实验通过室内实验种群生命表的方法,分别在水稻品种协优963和申优1号上研究褐飞虱的吡虫啉抗性种群和敏感种群在溴氰菊酯和三唑磷亚致死剂量作用下适合度的变化.结果表明:抗性种群和敏感种群的生命表参数因水稻品种、杀虫剂类型、杀虫剂浓度的不同而不同.抗性种群的种群增长趋势指数I变化范围为13.1～484.3,敏感种群为5.7～428.2.通过两个种群的比较,在28个处理组合中,抗性种群有6个处理组合的相对适合度显著高于敏感种群,其它处理并不明显低于敏感种群.表明抗性种群在合适的环境条件下有生殖优势.