猪软骨链蛋白的提取及鉴定

目的:提取和鉴定猪肋骨软骨链蛋白(p-CLP),测定p-CLP与透明质酸的亲和力,为软骨链蛋白在肿瘤显影中提供实验依据.方法:亲和层析法从仔猪肋软骨提取软骨链蛋白(p-CLP),SDS-PAGE凝胶电泳、氨基酸分析法分析p-CLP,放射性体外结合分析测定p-CLP与透明质酸(HA)的亲和力.结果:p-CLP的抽提蛋白得率为2.2%,p-CLP氨基酸分析示谷氨酸含量最高(2.26mg/20mg),放射性体外结合实验示p-CLP与HA的结合活性KA为(6.30±1.73)×109M-1.结论:亲和层析法提取p-CLP得率高,p-CLP与HA有较高的结合力,能够为P-CLP在肿瘤、眼科疾病、骨骼疾病的防治中提供实验依据.     

PRRSV受体CD163的原核分段表达

为原核表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)受体CD163,本研究根据CD163基因序列(EU016226),通过生物信息学软件Scanprosite预测了CD163结构特征并进行分段。利用DNAstar软件设计合成3对特异引物,从猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages, PAM)中克隆CD163三个片段,经测序鉴定正确后,分别克隆于原核表达载体pET-28a(+),在IPTG诱导下,进行CD163重组蛋白的截短表达,经Western杂交检测证实表达的三段截短蛋白均具有良好的与抗原反应活性,从而为进一步研究CD163受体在病毒感染过程中的作用以及与其他受体之间的相互作用提供实验依据。     

畜禽粪便堆肥过程中酶活性及微生物数量的变化研究

实验选取鸡粪和猪粪进行好氧堆肥发酵,研究畜禽粪便腐熟过程中酶活性和微生物的变化趋势以及相互联系。结果表明:过氧化氢酶活性和纤维素酶活性在堆肥初期较高,随后迅速降低,最终过氧化氢酶维持在9~12ml/g之间,纤维素酶维持在12.37~15.07mg/(kg·h)之间,而脲酶活性变化趋势为"升高-降低-升高"。细菌数量变化趋势为"低-高-低";放线菌为"高-低";真菌为"高-低-高"。通过相关分析发现,放线菌可能是影响堆肥中过氧化氢酶和纤维素酶的关键因素。鸡粪中放线菌与过氧化氢酶呈极显著正相关;猪粪中放线菌与过氧化氢酶和纤维素酶呈显著正相关;鸡粪+猪粪中放线菌与过氧化氢酶和纤维素酶呈极显著正相关。     

FISH分析栽培高粱×拟高粱、甜高粱×拟高粱的染色体行为

采用荧光原位杂交技术对45S rDNA在栽培高粱×拟高粱、甜高粱×拟高粱F1的有丝分裂和减数分裂染色体进行定位研究。在有丝分裂中期染色体上2个杂种分别检测到2个杂交信号, 在减数分裂粗线期、终变期、中期Ⅰ染色体上45S rDNA位于一个二价体上, 说明这两个杂种携带45S rDNA的染色体为同源染色体。根据45S rDNA位点随细胞减数分裂过程的位置变化, 表明这两个杂种染色体配对行为正常, 平均构型为2n=2x=20(10Ⅱ), 证明45S rDNA可作为染色体的一个识别指标间接地观察细胞减数分裂过程染色体的变化行为。     

应用mAPLP方法分析湖南汉族、苗族和土家族mtDNA编码区多态性

为建立线粒体DNA编码区SNP快速分型方法, 在线粒体DNA编码区选取16个SNP位点(5178A、10398A、14979C、 8020A、 13104G、11959G、10400T、14178C、3970T、5417A、11969A、12811C、10873T、4580A、7028C、12612G), 采用多重扩增产物片段长度多态性分析方法, 对湖南地区汉族、苗族和土家族各100人进行了mtDNA编码区多态性分析。结果显示SNP 3970T在汉族和土家族人群中的分布频率(均为17%)与苗族相比(8%)存在明显差异(P＜0.01), SNP 8020A在汉族人群中的分布频率(6%)与苗族和土家族人群( 分别为2%和0%)相比存在差异( P＜0.05)。在所分析的300名个体中, 共检测到45种单倍型, 3个民族共有的单倍型12种, 两个民族共有的有10种, 有23种单倍型仅在1个民族中出现, 其中汉族特异性的单倍型有8种, 苗族特异性的有6种, 土家族特异性的单倍型有9种。mAPLP是通过设计两条不同的正向或反向引物(使PCR扩增片段长度不同)和1条共用的反向或正向引物, 使两个等位特异扩增片段大小不同, 从而达到SNP分型。     

岷江上游土地利用/覆被变化及其驱动力

岷江上游具有自然环境的复杂性、生态系统的脆弱性、经济发展的边缘性、社会文化的过渡性等特性,其土地利用/土地覆盖变化的特点可以代表我国西南山地土地资源及利用中所存在的普遍问题.林地和草地是岷江上游地区的主要土地利用类型.从1974～2000年间各个土地利用类型均发生了不同程度的变化,林地面积持续减少,其它类型面积均有不同程度的增加.类型间的面积变化均为双向,主要发生在有林地、灌木林地、经济林地、草地、居民用地和耕地之间,且主要在林地和草地两个类型之间.其中1974～1986年的变化大于1986~2000年.人口和经济是该区土地利用变化的主要驱动因素.自实施天然林保护工程和退耕还林还草工程以来,该区土地利用状况有所好转,正在向好的方向发展.     

枇杷冷藏过程中果肉木质化与细胞壁物质变化的关系

“大红袍”和“解放钟”枇杷果实在 1℃下贮藏时 ,细胞壁物质代谢异常 ,果肉硬度持续升高而出汁率逐渐降低 ,果胶酯酶 (PE)和多聚半乳糖醛酸酶 (PG)活性和水溶性果胶含量下降 ,原果胶含量、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及木质素和纤维素含量不断增加。约经 3周贮藏后 ,果实出现果皮难剥、果肉质地变硬、粗糙少汁的异常劣变现象。在 12℃下贮藏的枇杷果实 ,细胞壁物质代谢正常 ,果肉硬度增加少 ,PE和PG活性及水溶性果胶含量较高 ,无原果胶增加现象 ,PAL活性呈下降趋势 ,木质素和纤维素含量变化不大 ,果实不出现木质化败坏。这些结果表明冷藏枇杷的木质化败坏可能是一种低温失调现象     

S02对冷藏枇杷果实品质及活性氧和多胺代谢的影响

以"大红袍"枇杷果实为试材,研究了SO2处理对冷藏枇杷果实活性氧代谢和内源多胺含量变化的影响及与果实木质化败坏的关系。结果表明,SO2可提高超氧物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,抑制过氧化物酶(POD)活性的上升,减少H2O2的积累。经SO2处理的果实,精胺(Spm)和亚精胺(Spd)含量的变化很小,基本维持在贮前水平上,腐胺(Put)的积累则受到极大抑制,贮藏5周后的果实不出现木质化败坏症状。这些结果表明,SO2可能通过维持活性氧代谢的平衡,抑制活性氧的积累,从而防止果实木质化的发生。     

水稻氮饥饿诱导基因的克隆与表达分析

为了解水稻(Oryza sativa L.)对氮饥饿反应的分子与基因背景,利用RaSH策略构建了水稻氮(N)饥饿诱导cDNA文库.通过反向Northern筛选该文库,获得氮饥饿诱导的18个功能已知基因和2个功能未知基因.这些已知基因涉及碳代谢、次生代谢产物合成、蛋白质分解代谢、激素代谢、信号转导、生长调控过程及转录因子.这些基因表现出不同的时空表达模式.研究结果表明了植物对氮饥饿反应涉及互相关联的多种生理与分子机理,提供了相关的一些基因信息.