白介素21及其对肿瘤的抑制作用

白介素21(interleukin-21, IL-21)是新近发现的具有多效免疫调节活性的细胞因子.遗传学和生化分析证实,IL-21是IL-2细胞因子家族的新成员.IL-21受体复合物包含γc-受体亚单位,活化后可引起JAK/STAT信号转导级联放大效应.IL-21由活化的CD4 T细胞合成,调节B细胞、T细胞、NK细胞和树突状细胞的增殖和分化.IL-21通过增强IgG抗体应答反应,抑制IgE合成而调节正常的体液免疫.IL-21也是重要的细胞免疫调节子,通过调节CD8 T细胞和NK细胞的活性清除鼠的肿瘤.     

人hIL-24Δ103重组腺病毒感染诱导A549细胞凋亡

白细胞介素24（interleukin 24,IL-24）是近年来新发现的1个IL-10家族细胞因子,具有明显的抗肿瘤活性．为了研究开发高活性、低分子量的IL-24,并探讨其用于肿瘤靶向治疗的可能性,本研究在前期基础上,进一步构建并制备了缺失N端103个氨基酸残基的IL-24（hIL-24Δ103）重组腺病毒,并观察了其对A549细胞生长增殖和凋亡的影响．首先,采用PCR技术扩增IL-24第104位至第206位氨基酸区域的编码序列,制备hIL-24Δ103重组腺病毒．用Ad-hIL-24Δ103重组腺病毒感染肺癌A549细胞. MTT分析结果表明,Ad-hIL-24Δ103感染显著抑制了A549细胞的生长．Hoechst 33258染色和流式细胞仪分析结果表明,Ad-hIL 24Δ103感染导致细胞凋亡．Western 印迹分析结果表明,Ad-hIL-24Δ103感染导致了PKR和eIF-2α蛋白的表达上调与磷酸化激活,提示PKR和eIF-2α参与了hIL-24Δ103导致的细胞生长抑制和细胞凋亡过程的调节．关键词 人白介素24;腺病毒;细胞增殖;细胞凋亡     

Study on fibroin heavy chain of the silkworm Bombyx mori by fluorescence in situ hybridization (FISH)

The sericulture industry plays a very important role in our national economy. Silkworm (Bombyx mori) is always regarded as a model animal and biological reactor. There have been detailed studies on the structure, expression and control and molecular evolution of silk genes. However, few, if any, reports are available on the localization of structural genes in silkworm by molecular cytogenetics. The present experiment has tentatively localized the Fib-H gene at the distal end of the 25th linkage group, namely at the 25-0.0 position, and verified that Fib-H has only one locus, thus providing a temporary solution to the problem about its localization.     

病理浓度甲醛的累积导致小鼠神经母瘤细胞活力及黏附能力下降

Formaldehyde (FA) plays a role in age-related cognitive impairment. An increase in endogenous FA induced by long-term oral administration of methanol, which triggers Tau hyperphosphorylation in the brain of Macaca mulatta and deteriorates the animal’s working memory. Short-term, high-dose FA treatment induces Tau hyperphosphorylation in the cytoplasm and nucleus of murine neural cells in vivo and in vitro. However, the pathological FA level is lower than that used in those experiments. The long-term effect on neural cells of FA at pathological doses has not yet been investigated. Here, based on the pathological level of endogenous FA in Alzheimer’s disease (AD) patients, we added 10 mmol/l (mM) FA to the medium and incubated murine neuroblastoma (N2a) cells for six days by using a serial passage strategy. FA-induced significant decreases in cell number and viability as well as increased lactate dehydrogenase (LDH) release were observed during the culture. Holographic microscopy showed that cells exposed to FA were thicker and smaller, exhibiting a weakened adhesive morphology. Immunofluorescence staining demonstrated that the pathological dose of FA increases Tau phosphorylation at Threonine (T181) and Serine (S396) epitopes over time. These results indicate that long-term exposure to a pathological concentration of FA causes the cell viability decline and even cell death under the experimental conditions     

《农业与环境生物技术文摘》

《农业与环境生物技术文摘》创刊于 1993年 ,是世界著名的剑桥科学文摘 (ＣＳＡ)近 40个系列检索刊物之一。该刊内容广泛 ,涉及微生物、植物、动物有关的生物技术研究 ,其中农业应用包括动植物病害的诊断与控制 ,生物技术在动植物育种、害虫防治、土壤微生物、废弃物处理、环境污染、能源、矿物和发酵及工艺工程中的应用。该刊把农业与环境生物技术分为 12个一级类目、34个二级类目、4个三级类目 :一般热点与评述专利遗传工程　微生物、植物、动物、克隆载体生物信息学与计算机应用方法　固定、色谱、细胞培养、深低温保藏、新细胞系、免疫…     

转录因子X-box结合蛋白1相互作用蛋白的筛选和鉴定

X-box 结合蛋白 1 是一种重要的转录因子,参与体内多项信号转导过程. 为进一步研究 XBP1 的生物学功能,运用酵母双杂交技术在肝细胞文库中筛选 XBP1 的结合蛋白. 首先运用 PCR 技术扩增获得 XBP1 的编码序列,克隆至 pGEM-T 载体,经测序鉴定后,亚克隆至诱饵载体 pGBKT7 中,转化酵母 AH109(a type). 免疫印迹检测诱饵质粒 pGBKT7-XBP1 在AH109 酵母中的表达之后,含有诱饵质粒的酵母 AH109 与含有肝细胞 cDNA 文库质粒 pACT2 的酵母 Y187(αtype)配合,配合后的二倍体酵母生长在含有 X-α-gal 的营养缺陷型培养基上 (SD/-Trp-Leu-His-Ade) 进行选择和筛选,经测序和序列比对确定阳性克隆的开放读码框 ORF,得到 7 种不同的蛋白质. 为了进一步验证这些筛选蛋白质与 XBP1 的相互作用,克隆其中一种蛋白质 MT1E,并运用 GST pulldown 和免疫共沉淀技术成功检测了 MT1E 和 XBP1 的相互作用(体外 / 体内),结果提示,MT1E 可能是 XBP1 的一个新的调节蛋白. 通过酵母双杂交技术筛选得到的 7 种蛋白质分别与肝细胞基础代谢、蛋白质的合成与运输、细胞的增殖与凋亡密切相关. 上述结果有助于揭示 XBP1 的生物学功能,为进一步探讨 XBP1 的表达和调控机制提供新线索.