Ghrelin,内脂素和护骨素在Ⅱ型糖尿病发病机制中的作用研究

目的:探讨护骨素(osteoprotegerin)、内脂素(visfatin)和生长激素释放肽(ghrelin)在2型糖尿病(T2DM)代谢综合症发病机制中的作用。方法:采集受试者血清血样116例(39例2型糖尿病代谢综合症较轻组;48例2型糖尿病代谢综合症较重组;29例正常对照组)。采用酶催法检测血糖和血脂。采用ELISA法测定护骨素、内脂素、生长激素释放肽和胰岛素水平。结果:与对照组相比,糖尿病代谢综合症较轻组患者护骨素和内脂素水平显著增高,生长激素释放肽水平显著降低(P0.05)。此外,2型糖尿病兼代谢综合症较重组患者体内护骨素和内脂素水平明显高于较轻组患者(P0.05)。采用ROC曲线研究标记物最佳剂量值。2型糖尿病兼代谢综合症较重组患者护骨素(1.06 ng/m L)、内脂素(32.27 ng/m L)和生长激素释放肽(33.65 pg/m L)可分别表现出76%、92%和39.1%灵敏性及41%、69.2%和62.9%特异性。在研究的这些参数中,内脂素是预测糖尿病患者兼代谢综合症的有效指标(P0.05)。结论:护骨素、内脂素和生长激素释放肽可能作用于糖尿病患者的发病过程。内脂素是预测糖尿病患者兼代谢综合症的有效指标。     

蓝斑核Orexin-A对肥胖抵抗大鼠自发活动的影响及机制研究

目的:探讨蓝斑核(LC)orexin-A对肥胖抵抗(OR)大鼠自发活动的影响及机制并进一步探究LC的orexin调控是否与肥胖抵抗相关。方法:雄性SD大鼠和选择性培育的OR大鼠,一侧蓝斑核置管,缓慢均匀注射0.5μL药物(orexin-A或人工合成脑脊液),用大鼠自发活动检测装置SPA箱红外线活动传感器测定测大鼠自发活动(SPA),间接测热法测定其能量消耗,定量磁共振身体组成分析器检测大鼠脂体重和瘦体重。大鼠肥胖程度用体脂百分比表示。结果:与SD大鼠相比,OR大鼠的总体重,脂体重和去脂体重显著降低(P0.05)。OR大鼠肥胖程度明显小于SD大鼠(P0.05)。OR大鼠在3月龄是主要表现为水平活动,6月龄时垂直活动增加,故OR大鼠随年龄增长活动量显著增多(P0.05)。OR大鼠注射orexin A增加SPA的作用比SD大鼠更强,其主要原因是OR大鼠水平活动时间明显高于垂直活动时间。与SD大鼠相比,OR大鼠SPA水平高、体重轻,日间能量消耗和SD大鼠无明显差异,夜间活动消耗更多能量。在OR大鼠的LC注射orexin-A后,两组高剂量orexin-A可显著增加SPA(P0.05),并呈现剂量依赖性。对于SD大鼠,只有最高剂量的OXA才能引起SPA显著高于对照组(P0.05)。最高剂量的两组orexin-A注射后,OR大鼠SPA改变比SD大鼠更显著(250 pmol:P0.05;500 pmol:P0.05)。结论:蓝斑核(LC)orexin-A对肥胖大鼠自发活动有重要影响,其orexin调控与肥胖抵抗相关。     

果糖暴食对大鼠下丘脑外侧核与伏隔核Orexin 神经元的影响

目的:探讨给予间歇性摄食大鼠模型(Intermittent Access Model[IAM])果糖是否可使IAM大鼠对果糖产生暴食行为,以及下丘脑外侧核(LHA)和伏隔核Orexin(ORX)神经元对果糖暴食行为的影响。方法:给予IAM大鼠4%、8%或12%的果糖溶液及生理盐水,观察和记录大鼠果糖摄入量及能否产生果糖暴食行为;测定果糖凝集反应大鼠伏隔核壳(NAc shell)、伏隔核核(NAc core)和背侧纹状体(Dorsal striatum)多巴胺受体(D1R、D2R)数目(Bmax)和受体亲和力(Kd);分别监测长期和短期IAM大鼠室旁核(PVN)、杏仁核(CeA)、伏隔核(NAc)等相关核团的C-Fos神经元活性(Fos-IR);给予长期IAM大鼠OX1R拮抗剂SB334867,记录大鼠摄食量。结果:长期IAM大鼠表现出果糖暴食行为,但相应的多巴胺受体数目并未改变。与对照组相比,果糖暴食组大鼠伏隔核c-Fos蛋白减少,神经元活性降低。短期IAM大鼠可产生果糖暴食但Fos-IR未改变。给予长期IAM大鼠OX1R拮抗剂SB-334867(30 mg/kg),大鼠果糖暴食量和食物摄入量均减少。结论:长短期IAM大鼠均可产生果糖暴食行为;仅长期果糖暴食可致Orexin释放增加,减少伏隔核Orexin神经元激活,增强外侧核Orexin神经元激活。     

几种物质对苯噻草胺在水中光降解的影响

高压汞灯下不同物质对水中的苯噻草胺光化学降解的影响研究表明,NO₂^-和NO₃^-对苯噻草胺的光解有猝灭作用,其中NO₃^-在10∶1的添加浓度(质量浓度)下猝灭作用最明显,照光15 min猝灭率达53.3%;卤素离子对苯噻草胺光解有重原子猝灭效应,作用最强的是添加10∶1的I^-(质量浓度),照光15 min 猝灭率达76.9%;4种表面活性剂随添加浓度的增大对苯噻草胺光解的阻滞作用增强,除农乳404在较低添加浓度下(质量浓度比1∶5和1∶1)对苯噻草胺的光解表现出微弱的敏化效应外,其余均表现为猝灭作用;4种除草剂(杀草丹、苄嘧磺隆、甲草胺和绿磺隆)中,只有苄嘧磺隆在低添加浓度(质量浓度比1∶10)时对苯噻草胺有光敏化作用,照光25 min光敏率为18.2%,其余除草剂各添加浓度下均对苯噻草胺表现出光猝灭作用;充氮气10 min,苯噻草胺的光解半衰期由不充氮气的7.14 min缩短为6.70 min.     

静电纺丝纳米纤维体外释放与蛋白活性的研究

目的:通过选择不同的模型蛋白,探讨准确的研究静电纺丝纳米纤维支架的体外释放和快速的测定蛋白活性的方法.方法:通过O/W乳液法静电纺丝制备纳米纤维,并用扫描电镜对纳米纤维表面进行了表征.以GM-CSF为模型蛋白,采用ELISA双抗体夹心法考察纤维的体外释放行为;以BSA为模型蛋白,用SEC-H-PLC比较纤维制备前后蛋白的聚集情况;以β-半乳糖苷酶为模型蛋白,用ONPG法比较纤维制备前后酶的催化活性.结果:纤维表面平滑,直径均一,呈现互相连通的三维网状结构.纤维在5天内释放90％以上;纤维中回收的BSA单体比例为66.53％;β-半乳糖苷酶在纤维中的催化活性保持原活性的3.37％.结论:通过选择不同的模型蛋白,能够准确的测定静电纺丝纤维的体外释放,快速的考察纤维中的蛋白活性,对于更好的研究蛋白药物纳米纤维支架具有重要的参考价值.     

代谢调衡饮对代谢综合征胰岛素抵抗的影响

目的:初步探讨代谢调衡饮对代谢综合征胰岛素抵抗的影响。方法:将60例代谢综合征患者随机分为试验组和对照组,对照组口服卡托普利和二甲双胍,试验组在此基础上加服代谢调衡饮,疗程3个月。结果:两组各个时间点的血糖和HbA1c与治疗前相比,均有显著下降(P<0.01);显著降低空腹、糖负荷后0.5h、1h、2h、3h胰岛素水平(P<0.01),与对照组相比,试验组降低糖负荷后0.5h胰岛素水平更具优势(P<0.01);明显降低HOMA-IR,升高ISI。结论:代谢调衡饮对于改善代谢综合征患者的胰岛素抵抗具有一定疗效。     

侧脑室注射Orexin-A对大鼠胃运动的影响

目的:观察侧脑室注射食欲素A(OXA)对大鼠胃运动的作用及作用途径。方法:选取成年雄性大鼠50只,随机分为5组,即生理盐水(NS)组、1μg组、5μg组、10μg组和20μg组。在胃窦和十二指肠植入应力传感器,记录大鼠胃肠自发性运动。通过侧脑室注射OXA,观察胃肠环形肌运动波形的变化和持续时间。选取10只大鼠随机分为2组,一组皮下注射NS+10μg OXA,另一组皮下注射阿托品+10μg OXA,观察OXA对胃肠运动的影响。同理选取10只大鼠分为假手术组+10μg OXA组,迷走神经切断组+10μg OXA组,观察OXA调控大鼠胃肠运动的作用途径。再选取10只大鼠,先注射NS再注射OXA拮抗剂SB334867,观察内源性OXA对胃肠运动的影响。结果:侧脑室注射OXA(1-20μg),大鼠消化间期胃和十二指肠III期收缩波消失,继而出现胃和十二指肠餐后不规则的收缩波。OXA对餐后胃肠运动的影响可被阿托品或切断迷走神经干所阻断(P0.05)。中枢注射选择性OXA受体拮抗剂SB-334867(16μg),可增强胃消化间期III相收缩(P0.05)。结论:中枢注射OXA可能经迷走神经胆碱能通路调控大鼠消化间期的胃肠运动,内源性OXA可能对大鼠消化间期胃肠运动具有抑制作用。     

不同生长年限唐古特大黄根部土壤中微生物量及酶活性变化规律研究

目的：明晰种植唐古特大黄对土壤微生态的影响。方法：利用常规测定方法研究不同生长年限唐古特大黄根部土壤中微生物量和酶活性的变化规律。结果：土壤微生物量碳（MBC）、微生物量氮（MBN）和微生物量磷（MBP）含量随着唐古特大黄生长年限的增加而表现出“马鞍型”变化趋势,同一生长年限的唐古特大黄根部土壤微生物量与土壤深度呈极显著负相关（P <0.01）;MBC/MBN值在8.85%～18.94%之间,说明唐古特大黄根部土壤已向“真菌型”转变。MBC/SOC、MBN/TN和MBP/TP值均低于植被覆盖良好区域。同一生长年限的唐古特大黄根部土壤酶活性随土壤深度增加而降低;在不同生长年限的唐古特大黄间,纤维素酶活性随着唐古特大黄生长年限的增加而降低;蛋白酶和硝酸还原酶活性随唐古特大黄生长年限增加也呈“马鞍型”变化趋势;过氧化氢酶活性随唐古特大黄生长年份增加而增高。结论：连续种植唐古特大黄能够对土壤微生物群落结构产生影响,一方面增加了根部土壤真菌数量,另一方面根部土壤积累过氧化氢类物质,可能导致唐古特大黄根系易发生病害或损伤。因此,研究认为唐古特大黄在青藏高原东北缘最适生长年限为4年。     

葡萄糖3-脱氢酶产生菌的筛选和产酶培养

从土壤中筛选分离得到1株葡萄糖3-脱氢酶产生菌,经生理生化初步鉴定为产酸克雷伯菌(Klebsiella oxyto-ca)。将菌株D8进行产酶优化培养,经过单因素法确定优化培养条件:乳糖为C源,酵母膏为N源,250 mL摇瓶装液量为50 mL,培养基的初始pH为7,33℃培养时G3DH酶比活力最高,达到1.45 U。     

不同生长年限唐古特大黄根部土壤中细菌群落结构及多样性

目的：明晰种植唐古特大黄对土壤微生物群落结构的影响。方法：采用高通量测序技术,分析不同生长年限（1～4年）唐古特大黄根部不同深度（1～20 cm、21～40 cm和41～60 cm）土壤中细菌群落结构特征。结果：在不同生长年限唐古特大黄根部土壤中共获得2 080个细菌操作分类单元（OTU）,隶属于28门84纲172目263科441属480种。变形杆菌门（Proteobacteria）、酸杆菌门（Acidobacteria）、放线菌门（Actinobacteria）、绿弯菌门（Chloroflexi）和芽单胞菌门（Gemmatimonadetes）是唐古特大黄根部土壤中相对丰度排名前5的优势类群,相对丰度之和达到0.80以上;Mantel检验结果表明,土壤碱解氮、土壤微生物量氮（MBN）和土壤微生物量磷（MBP）含量及硝酸还原酶、纤维素酶和蔗糖酶活性对细菌群落结构影响极显著（P <0.01）;土壤全磷、速效钾含量和过氧化氢酶活性对细菌群落结构影响显著（P <0.05）。受土壤理化因子、微生物量和酶活性的影响,细菌数量和多样性指数随唐古特大黄生长年限的增加呈现出先减少后增加的“...