化学修饰抗体增加模拟酶的GPX活性

将丝氨酸共价偶联到兔抗人ＩｇＭ（Ｆｃμ）抗体上,以增加抗体结合部位丝氨酸残基含量．在中性条件下,丝氨酸被对苯甲基磺酰氟活化,再经ＮａＨＳｅ亲核取代,将丝氨酸诱变为硒代半胱氨酸（ＳｅＣｙｓ）．其谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）活性由未增加丝氨酸前的诱变抗体的７０Ｕ／μｍｏｌ提高到２１８Ｕ／μｍｏｌ,其活性为模拟物ＰＺ５１的２００多倍．     

白喉毒素越膜机理研究进展

白喉毒素与细胞膜上的受体结合后,在受体个导的内吞作用下进入胞内体。综述了20世纪90年代后期至今,有关白喉毒素在胞内体的酸性环境中的特性研究。在酸性环境下,白喉毒素发生变构,T区疏水基团暴露并插入膜中,形成粘性孔道。T区形成的粘性孔道与白喉毒素结合,象分子伴侣一样,保持C区的线性结构,并使C区进入细胞膜。由于对白喉毒素作用机理的理解深入,逐渐产生一些新的应用前景。     

金黄色葡萄球菌肠毒素B用于肿瘤治疗的研究现状

自从 195 4年发现肠毒素B(SEB)以来 ,人们对它的研究就一直没有停止。随着对治疗恶性肿瘤药物研究的进展 ,肠毒素B逐渐成为人们注意的焦点。肠毒素B作为超抗原 ,激活T淋巴细胞 ,致使其释放细胞因子 ,从而达到杀伤肿瘤细胞的目的。不同细胞周期的T细胞对作为超抗原的肠毒素B的反应不同。AtsuoOchi等将肠毒素B和一功能蛋白Id通过化学方法连接在一起 ,在小鼠体内建立淋巴瘤系 38C13模型中应用 ,达到了很好的治疗效果。SEB 抗 Id结合物能够活化体内Vβ 8+T细胞、阻止体内Id +B淋巴瘤的过度增殖。LewisE等用黑色素瘤细胞在小鼠体内建立肿瘤模型 ,并用SEB和双特异性抗体bsAb研究了抗活体肿瘤的效果。BethA .Pulaski建立了缺少免疫原性鼠 4T1乳腺癌术后动物模型 ,研究了SEB和MHCⅡ ,CD80联合细胞免疫对乳腺癌的治疗。KyojiOka da等同时将SEB和西法安生应用于抗鼠骨肉瘤研究 ,发现抑瘤效果良好 ,而且会在转移病灶处引发细胞凋亡。     

杀伤血管内皮生长因子受体 1 阳性细胞的靶向毒素

白喉毒素 (diphtheria toxin DT) 是棒状白喉杆菌被β噬菌体感染后分泌的一种外毒素. 它可以阻断真核细胞的蛋白质合成,杀死细胞. 血管内皮生长因子 (VEGF) 的 R82A, K84A, H86A 突变体可以和肿瘤血管上高表达的 VEGF 受体 1 (VEGFR-1) 特异性结合. 首先从白喉杆菌中提取基因组 DNA,扩增出白喉毒素 C 区、 T 区基因. 并运用点突变技术,制成 VEGF 的 R82A, K84A, H86A 突变体. 利用这个可以和肿瘤血管上特异性受体相结合的 VEGF 的突变体,代替白喉毒素上的受体结合区,制成了针对 VEGFR-1 的靶向融合毒素——— DT391-mVEGF. 以去除了受体结合区的 DT391 为阴性对照,细胞实验表明,融合毒素对 VEGFR-1 阳性的肿瘤细胞有特异性杀伤作用.     

棕色固氮菌不固氮变种UW45与固氮酶钼铁蛋白铁钼辅因子重组的某些特性

以UW45抽提液的DEAE-纤维素柱层析的0.15M NaCl或0.25M NaCl洗出液与Smith法或Shah法制备的铁铝辅因子重组,则0.25 M NaCl洗出液的重组对乙炔还原的活性远较0.15 M NaGl的为高。0.15 M NaGl的洗出液较0.25 M NaCl洗出液的组分明显不纯。不全钼铁蛋白与铁钼辅因子和铁蛋白重组后能还原基质氰化钾,但对分子氮或迭氮化钠的还原却较微弱甚至不还原。铁钼辅因子按Smith和Shah法制备,其分子量范围分别为低于1000D和接近1500D。由于Smith和Shah法两种铁钼辅因子还原乙炔和氰化钾的比活不同,电泳图谱有差异、分子量又有大小,因此这两种铁钼辅因子的分子结构可能不尽相同。     

啤酒酵母代谢产物——双乙酰的液上气相色谱法测定

本文报导了采用电子捕获检测器(ECD)的气相色谱法与液上分析(HA)技术相结合的方法,测定啤酒酵母代谢产物中双乙酰的含量。所建立的方法简单、快速、准确。本实验对影响方法灵敏度、准确度的诸因素进行了考察,并选择了最佳条件。     

啤酒酵母产子囊抱子及获得单倍体细胞条件的研究

啤酒酵母在不同产孢培养基上表现出不同的产孢率,随菌株不同各有其最适的产孢培养基。试验表明,4号培养基对供试菌株均表现出较高的产孢率,其次是1号培养基,用2％蜗牛酶于37℃水浴酶解3小时即可除去子囊壁;将酶解液置于58℃水浴保持8分钟,可杀死营养体细胞;用1％胰蛋白酶或超声波(150W,3分钟)处理,可使50％以上的孢子分散开。