西沙群岛琛科二井中新世和更新世的珊瑚一些化石*

Sphenothallus Hall, 1847是刺胞动物中以细长锥管状为特征, 底栖固着的一个属, 始现于寒武纪延伸至二叠纪。之前该属在贵州寒武纪的牛蹄塘生物群、剑河生物群和凯里生物群中均有报道。位于寒武纪第4阶的杷榔生物群也发现该属的化石, 杷榔生物群的Sphenothallus由S. kozaki和S. kozaki? 2个种组成。杷榔生物群的时代位于牛蹄塘生物群和剑河生物群之间, S. kozaki之前仅出现在捷克Jince组和中国湖北石牌组。杷榔生物群Sphenothallus的发现增加了该属在寒武纪第4期刺胞动物的多样性古生态、古地理分布及演化信息, 丰富了杷榔生物群底栖固着类群的组合面貌。     

微水相脂肪酶催化乙酸甲基苯甲酯立体选择性氨解反应*

从 4种不同来源的脂肪酶 ,2种不同来源的蛋白酶中筛选出了具有较高活性和对映体选择性的能催化乙酸甲基苯甲酯氨解反应的脂肪酶Novozym 43 5。进一步探讨了氨源、酶浓度、底物浓度等因素对该酶反应的影响。结果表明 ,在优化条件下 ,氨解反应 6h ,转化率为51.6 %,残留底物中 ( ) 乙酸甲基苯甲酯对映体过剩值可达 99%以上。     

通络救脑注射液对大鼠脑微血管内皮细胞活性 及其条件培养液影响的初步研究

目的：观察通络救脑注射液对正常及拟缺血大鼠脑微血管内皮细胞的活性影响,并初步探讨细胞条件培养液内蛋白分泌的时效特征、奠定可溶性蛋白深入分析的技术基础。方法：通络救脑注射液作用于正常夏拟缺血脑微血管内皮细胞之后,用MTS／PMS比色分析法测定细胞的活性,Bradford法测定细胞培养液总蛋白含量,比色分析法测定细胞培养液乳酸脱氢酶（LDH）漏出值,同步观察了5个时间点的细胞活性及条件培养液总蛋白量及LDH释放量。结果：通络救脑注射液能够提高拟缺血细胞的活性,且抑制LDH释放量;正常组分泌总蛋白量3h达到高峰,此时细胞活性最佳,LDH释放量亦少。拟缺血组分泌总蛋白量是6h达到高峰,此时LDH释放量最少,但细胞活性与3h比较有所下降。结论：通络救脑注射液对拟缺血细胞损伤具有保护作用：以3h至6h的细胞条件培养液做为收集目标是研究条件培养液的最佳时间段。     

芍药苷通过IL-10-STAT3信号通路抑制脂多糖诱导BV2细胞炎症与吞噬作用

小胶质细胞是中枢神经系统中重要免疫细胞,也是炎症反应中的主要效应细胞。芍药苷被证实能有效抑制炎症反应,在调节免疫方面具有巨大药用价值。本文旨在阐明BV2细胞炎症反应中芍药苷对细胞炎症及吞噬的抑制作用,并探索其中潜在机制。体外实验利用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导BV2细胞发生炎症反应,芍药苷能有效抑制BV2细胞TNF-α和NO的产生以及BV2细胞异常增加的吞噬功能,并且在此过程中IL-10-STAT3信号通路被激活;芍药苷的抑制作用在我们使用STAT3抑制剂JSI-124后显著降低,TNF-α和NO的表达量增加、BV2细胞的吞噬功能增强。上述结果表明,芍药苷能有效抑制BV2细胞炎症作用及吞噬作用,这一过程中依赖IL-10-STAT3信号通路的激活。这将加深我们对芍药苷抑制小胶质细胞炎症作用机制的认识。     

东北阔叶红松林地表葬甲群落多样性及其空间变异特征

为了探明我国东北阔叶红松(Pinus koraiensis)林地表葬甲多样性及其空间变异特征,在胜山、丰林、凉水和长白山的4个大型森林动态监测样地内,通过布置900个陷阱调查了36 hm²范围内的地表葬甲群落基本特征。基于群落物种数量、个体数量和总体长,分析了地表葬甲多样性及其空间变异性。结果表明：(1)东北阔叶红松林区域物种库包含12个葬甲物种,密度为0.018只/m²,总平均体长达0.32 mm/m²。北方花葬甲(Nicrophorus tenuipes)是东北阔叶红松林内的广布物种,黑葬甲(Nicrophorus concolor)等五个物种具有明显的生境偏好,仅存在于单个局域物种库内。(2)物种数量、个体数量和总体长在胜山、丰林、凉水和长白山样地存在明显差异,其中纬度较低的局域物种库(凉水、长白山)可维持更高的物种多样性,纬度最高的局域物种库(胜山)维持较低的物种多样性。(3)地表葬甲群落在胜山和丰林样地存在显著的空间自相关性,在凉水和长白山样地则不显著。(4)葬甲群落具有较明显的空间异质性,长白山样地的空间变异...     

露天矿排土场平台-边坡系统侵蚀形态及径流产沙特征

露天矿排土场平台径流汇集量大且急促,常导致边坡发生强烈沟蚀。排土场平台-边坡系统集中来水条件下的侵蚀过程研究仍十分薄弱。本研究以平台-边坡系统为对象,采用野外放水冲刷试验方法,研究不同放水流量(48、60、72、84 L·min^-1)下系统径流、产沙及侵蚀形态演变规律。结果表明: 48 L·min^-1流量时,平台-边坡系统以细沟侵蚀为主,60～84 L·min^-1流量下系统发育形成切沟。平台、边坡流速随放水历时呈突变-波动-稳定变化趋势,平台流速小于边坡径流流速,减幅为8.3%～67.1%,边坡流速为边坡上/下部最大,较中部增加18.5%～44.6%。平台和边坡产沙率随放水历时呈现突变-波动-稳定3个阶段,边坡产沙率高达平台的17.4倍;平台上细沟侵蚀产沙量占比高达86.6%～95.1%,60～84 L·min^-1流量下边坡切沟侵蚀产沙量占比高达69.2%～86.6%。平台侵蚀沟宽深比大于边坡,边坡宽深比为边坡上部最小,边坡中/下部最大,是边坡上部的1.36～1.93倍,侵蚀沟沿平台至坡脚总体上呈“宽浅-窄深-宽浅”式发展;48 L·min^-1流量下侵蚀主要集中在平台与边坡中部,侵蚀体积占比分别为29.9%、26.8%;60～84 L·min^-1流量时,侵蚀集中在边坡上部,占总侵蚀体积的36.1%～44.7%。结果可为陕北露天矿排土场平台-边坡系统沟蚀防治及侵蚀产沙模型的建立和修正提供参考。     

CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用

【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridization-compatible tissue-hYdrogel, CLARITY)在昆虫组织上的应用,确定CLARITY与荧光原位杂交(FISH)相结合在昆虫肠道组织透明化中的适用性。【方法】依照CLARITY技术操作程序,用水凝胶固定西方蜜蜂肠道,并以被动方式透明化,再用靶向东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae 16S rRNA带异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记和靶向真核细胞18S rRNA带Texas RED标记的寡核苷酸荧光探针进行肠道组织的荧光原位杂交,然后用DAPI(蓝色)进行细胞核复染,通过激光共聚焦显微镜观察透明化的染色组织。【结果】首次成功将西方蜜蜂肠道组织透明化。在激光共聚焦显微镜下,观察到马氏管的原始分布形态,以及东方蜜蜂微孢子虫在中肠末端分布更密集的空间分布特征,并实现了对肠道组织的3D重构。【结论】CLARITY能应用于蜜蜂肠道组织透明化,透明化组织能进行原位杂交和激光共聚焦观察。CLARITY和FISH相结合免除抗体制备和石蜡切片的麻烦,直观展示肠道内部的真实状态,为昆虫生理病理研究提供了一种可靠特异的标记方法。     

基于磁蛋白标签的黄曲霉毒素氧化酶的分离及应用

建立了以家鸽磁蛋白(clMagR)分离标签为基础的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)分离纯化策略及黄曲霉毒素B1(AFB1)清除体系.将具有AFB1降解活性的AFO与clMagR基因共编码,采用pET-28a(+)载体构建了 pET-28a(+)-AFO-clMagR重组质粒,转入E.coli BL21(DE3)宿主异源表达融...     

成骨细胞特异性转录因子Cbfa1重组腺病毒质粒的构建与鉴定

目的:构建成骨细胞特异性转录因子——核心结合因子α1(Cbfa1)重组腺病毒载体,为后期应用Cbfa1基因治疗股骨头坏死、骨折和骨缺损等疾病奠定基础。方法:以目的基因Cbfa1全长cDNA为模板进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pShuttle-CMV载体的相应酶切位点,获得目的基因载体pShuttle-CMV-Cbfa1,在大肠杆菌BJ5183中和pAdEasy-1同源重组,筛选阳性克隆,经酶切、PCR及测序鉴定,线性化后用脂质体法转染HEK293细胞进行包装、扩增,用报告基因GFP对病毒滴度和感染效率进行监测,酚氯仿抽提纯化病毒,AdEasy1/Cbfa1感染间充质干细胞(MSC)后检测Cbfa1的表达。结果:测序、酶切及PCR证实Cbfa1基因重组腺病毒载体构建成功,AdEasy1/Cbfa1感染MSC后Cbfa1的表达显著升高。结论:构建了含Cbfa1基因的重组腺病毒载体,该基因能促进MSC向成骨细胞分化,预示其可作为治疗基因应用于股骨头坏死、骨折和骨缺损的治疗。     

人FAM33A基因启动子的克隆与鉴定

目的鉴定人FAM33A基因的启动子,为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法采用5’RACE技术（5’端cDNA快速扩增）鉴定FAM33A的转录起始位点。采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略,构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因。采用Lipofeetamine^TM2000转染H1299细胞,并通过Dual-Lu-ciferase@ Reporter Assay System进行荧光素酶报告基因活性检测。结果确定了FAM33A的转录起始位点,构建了覆盖FAM33A 5’端ATG附近约2kb区域的一系列FAM33A启动子荧光素酶报告基因。启动子活性分析表明,这些重组体均具有较高的启动子活性,同时含有典型的GC盒以及Sp1、E2F和GATA-1等潜在的转录因子结合位点。结论FAM33A启动子区域主要定位于转录起始位点附近约590bp的区域内。