长江春大豆核心种质构建及分析

利用长江春大豆初选核心种质SSR(simple sequence repeat）标记和农艺性状表型等基础数据,对用不同个体取样方法以及不同数据类型建立的核心种质进行评价,目的是确定中国大豆（Glycine max）核心种质的最佳取样策略提供依据,结果表明,根据SSR分子数据聚类,采用类内随机取样,类内以遗传相似性系数取样以及仅依据遗传相似性系数取样都可用于大豆核心种质构建,但是综合不同评价参数发现,以类内随机取样最佳,类内按遗传相似性系数取样次之,单独以遗传相似性系数取样较差。分析不同SSR等位变异保留比例的遗传多样性指数发现,当保留90%和80%的SSR等位变异时,核心种质具有更高的遗传多样性,由于与SSR分子数据种质遗传关系评价的不一致性,农艺性状等基础数据虽然可用来构建核心种质,但其SSR分子水平代表性相对较低,本研究结果还表明,用不同方法或同一方法不同重复次数取样建立的核心种质具有异质性,且这种异质性随核心种质取样比例的降低而增大,因此,虽然可依据不同数据类型确定相应的方法建立核心种质,但综合表型和分子数据建立的核心种质更具有代表性。     

杭白菊茎尖组织培养及试管苗繁殖技术研究

采用茎尖组织培养技术,建立了杭白菊中大洋菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的无菌试管苗体系.通过基本培养基和激素配比实验,筛选出杭白菊试管苗快速繁殖的最佳培养基组成.结果表明:最适宜的外植体为直径0.3 mm的茎尖;诱导丛生芽的最适培养基为:MS 6-BA 0.1 mg*L-1 IAA 0.02 mg*L-1;诱导试管苗生根的最适培养基为:1/2MS IAA 0.7 mg*L-1.用电子显微镜进行病毒检测后,筛选出2个脱病毒株系,脱病毒试管苗可作为今后提供优质种苗的种源.     

凝结芽胞杆菌对大鼠降糖作用的实验研究

目的：考察凝结芽胞杆菌（简称TQ33）对糖尿病大鼠病理模型的降血糖作用及糖耐量的影响,方法：以四氧嘧啶制备糖尿病大鼠病理模型后,灌服TQ33口服液,以氧化酶法测定大鼠血清中血糖含量。结果：TQ33对正常大鼠的空腹血糖基本无影响,对糖耐量的Cmax有明显的降低作用,并促进血糖水平迅速恢复;TQ33可降低实验性糖尿病大鼠的血糖水平,对糖耐量的Cmax有明显的降低作用,使糖耐量减低现象好转,结论：TQ33对由于四氧嘧\啶造成的糖尿病大鼠模型有一定的治疗作用。     

学龄前儿童的营养教育效果分析与评价

目的：在幼儿园开展一系列儿童营养教育,通过膳食调查的方式,对此营养教育效果进行分析和评价,为改善幼儿的营养教育和膳食管理提供借鉴和参考,促使家长和幼儿园共同配合幼儿的健康饮食。方法：根据《中国学龄前幼儿膳食指南（2016）》,针对幼儿饮食行为习惯及幼儿膳食摄入基本情况设计调查问卷,并将得到的幼儿膳食调查问卷中的食谱录入营养计算器中计算出各营养素的摄入量,对食育前后期的统计数据进行对比分析。结果：营养教育后学龄前儿童通过膳食摄入的维生素B1含量有了显著提高,维生素B6、叶酸、维生素D的摄入也趋于合理。结论：通过开展蒙台梭利教学法系列活动,促进了学龄前儿童膳食摄入的合理化。     

PEG模拟干旱条件下红花种子萌发特性的比较研究

为探讨研究红花芽期抗旱性的最佳模拟条件,并筛选鉴定红花芽期抗旱指标,以2份红花材料PI305192和PI401472种子为供试材料,采用6种不同浓度聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫处理,运用主成分分析法对多指标予以鉴定筛选。结果表明,对红花12个指标进行测定分析,发现浓度20%的PEG-6000可作为研究红花芽期抗旱性的最佳模拟条件,且在5%~25%PEG处理下,红花种子发芽率、发芽势、发芽指数、根长、芽长、总长、芽鲜重、根鲜重和总鲜重等均随着胁迫强度的增加呈明显的下降趋势;而脯氨酸和可溶性蛋白含量随着浓度增加呈增加趋势。主成分分析结果表明,发芽率、发芽势、丙二醛含量、总长和总鲜重等5个指标可作为红花芽期抗旱鉴定筛选的主要指标。     

miR-let-7b慢病毒载体促进大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化

微小RNA在生命体生长、衰老的过程中起着重要的作用,参与骨髓间充质干细胞(MSCs)重要的生物学进程,包括增殖、分化、信号转导和死亡等。该文探讨了miR-let-7b对MSCs来源神经细胞的调控作用。体外分离、扩增大鼠MSCs,通过细胞形态学观察、表面标志物的流式细胞仪检测进行鉴定。将MSCs分为miR-let-7b+组、miR-let-7b-组和对照组,分别转染miR-let-7b慢病毒载体、Anti-rno-miR-let-7b Inhibitor载体及不进行任何转染操作,实时荧光定量PCR(RTq PCR)检测各组细胞miR-let-7b的表达水平,确认转染情况。多因子联合法诱导各组MSCs向神经细胞分化,RT-q PCR检测神经细胞标志物MAP-2的表达,免疫细胞化学染色检测神经原特异性烯醇化酶(NSE)的表达和各组MSCs的神经细胞分化率。分离培养的MSCs在镜下呈长梭形或成纤维细胞样,CD90、CD44阳性表达率均大于90%,CD45的表达不足2%,证实得到的细胞即为MSCs。RTq PCR结果显示,与对照组相比,miR-let-7b+组的miR-let-7b表达水平升高,miR-let-7b-组几乎未检测到miR-let-7,提示miR-let-7b载体及miR-let-7b Inhibitor载体均成功转染了MSCs。经诱导分化后,与对照组相比,miR-let-7b+组神经细胞标志蛋白SIM312、Gap43、MBP和NSE与对照组相比表达水平显著升高(P0.05);miR-let-7b-组SIM312、Gap43、MBP和NSE表达水平与miR-let-7b+组相比具有明显差异(P0.05)。结果提示,miR-let-7b可以促进MSCs向神经细胞分化,通过控制miR-let-7b的水平可以调控MSCs的神经细胞分化率。     

对乙酰氨基酚耐受肝细胞株的建立及其作用机制研究

对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)是引起急性肝衰竭最主要的原因,但其确切的作用机制仍不明了。该研究建立了不同浓度的APAP耐药肝细胞,并对其耐药机制进行初步研究。克隆状密度培养的AML-12小鼠肝细胞浓度递增诱导建立APAP耐药细胞系;细胞计数检测细胞增殖能力;Mito Tracker和H_2DCF-DA分别检测线粒体膜电位和氧自由基水平;GSH/GSSH检测细胞抗氧化能力;q PCR检测细胞基因表达水平;Western blot检测蛋白质水平。成功建立了增殖和耐药稳定的1.25和2.50 mmol/L APAP耐药AML-12肝细胞。在相应浓度APAP处理后,与对照组相比,耐药组细胞增殖能力强,氧自由基水平低,线粒体膜电位水平高,GSH/GSSH值高。进一步研究结果显示,耐受组细胞抗氧化通路Nrf2及其靶基因表达活性提高,而凋亡相关信号通路JNK及其相关基因活性下降。肝细胞表型特征分析显示,耐药组细胞肝功能相关基因表达水平并未发生显著变化,但与染色体重塑相关的转录因子Foxa1和Foxa2 m RNA和蛋白质水平显著升高。该研究建立了增殖和耐药性状稳定的APAP耐药肝细胞,耐药性状的获得与抗氧化能力和抗凋亡能力的提高相关,并提示染色体重塑相关转录因子也可能参与这一过程,为深入研究耐药机制奠定了基础。     

金鱼草脂氧合酶基因AmLOX1的克隆及表达分析

脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是茉莉酸信号途径的关键酶。该研究克隆了金鱼草的LOX基因,命名为AmLOX1。AmLOX1基因的开放阅读框为2 649 bp,编码883个氨基酸。AmLOX1蛋白质的理论等电点为p H6.06,相对分子质量为100.52 k Da。AmLOX1与其他植物的LOX基因均有较高的同源性。实时荧光定量PCR表达分析发现,AmLOX1在金鱼草花中表达量显著高于根茎叶;在花器官中,下瓣的相对表达量最高;在花不同发育阶段中,衰败期的花AmLOX1的相对表达量最高。     

DC-SIGN与mCEACAM1a分子相互作用调控鼠冠状病毒复制

树突细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素分子(dendritic cell-specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing non-integrin,DC-SIGN)和肝/淋巴结特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素分子(liver/lymph node-specific intercellular adhesion molecules-3-grabbing non-integrin,L-SIGN)是钙离子依赖的C型凝集素受体,通过识别病毒粒子表面含甘露聚糖或果糖寡聚糖的分子介导病毒进入细胞,但其在调节病毒复制中的作用较少被关注。本研究通过建立稳定表达DC-SIGN和L-SIGN及其功能域嵌合体的细胞系,分析两者过表达对鼠冠状病毒复制的影响。结果显示,L-SIGN比DC-SIGN更能显著抑制病毒复制,这种差异与两者胞内区序列和基序组成不同有关;鼠冠状病毒感染导致细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路分子磷酸化下调,过表达DC-SIGN和L-SIGN可抑制这种下调趋势。在没有鼠癌胚抗原相关细胞黏附分子1(mouse carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1,mCEACAM1)存在时,DC-SIGN不能介导病毒感染。这些结果提示,DC-SIGN通过与mCEACAM1a分子相互作用和调节细胞信号通路分子功能以调控鼠冠状病毒复制。     

Quox—1基因同源序列在人胚早期发育中的表达

以Ｑｕｏｘ－１基因的特异性片段ｂ２为探针与人基因ＤＮＡ作Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,结果显示,人基因组中存在Ｑｕｏｘ－１基因的同源序列。结果表明其表达有明显的时间和空间特异性。胚龄３０天以前,Ｑｕｏｘ－１基因的同源序列在人胚包神经管等许多部位表达,３０天以后表达部位局限于脊索、心肌细胞、生机节、消化道上皮及周皮等处。