纤维素降解菌青霉T24-2的分离及产酶特性

从稻田腐烂秸秆中分离到一批纤维素分解菌株。通过滤纸崩解测试、刚果红纤维素平板识别,以及产酶鉴定,筛选得到一株分解纤维素能力较强的真菌。经形态观察和18S r DNA基因片断分析,鉴定该菌株为青霉。对菌株的液态发酵条件进行研究,该菌株培养基含3%稻草粉、0.25%尿素和无机盐营养液,最佳产酶条件为:自然pH,30℃,130r/min发酵4d。该菌株的CMC酶活和滤纸酶活最高分别达到45.01I U/mL和6.89I U/mL。随后对该菌酶解稻草粉进行研究,糖化率达到40.17%。研究表明,青霉T24-2菌株在秸秆综合利用上具有良好的应用前景。     

一种简易快速高效提取麻疯树营养器官中RNA的方法

以麻疯树根、茎、叶为材料,用4种方法提取麻疯树中总RNA.琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析结果表明,改良的张年辉法提取的RNA比张年辉法提取的完整性更好,时间更短,条件更粗放;试剂盒A提取的RNA多数降解;试剂盒B几乎不能提取其RNA.RT-PCR分析表明,以改良的张年辉法提取的根、茎、叶中RNA作模板也可成功地进行RT-PCR扩增.据此,我们认为用简易、快速、高效的改良张年辉法提取麻疯树根、茎、叶中RNA为最佳选择.     

甘草抗肿瘤活性成分的研究

为了研究甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch中的抗肿瘤活性成分.本文利用正相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、制备薄层层析、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过1H NMR 13C NMR等波谱技术进行结构鉴定.采用MTT法对从甘草分离到的化合物作小鼠肺腺癌LA795细胞株抗肿瘤活性筛选.从甘草中分离鉴定了甘草西定(1)、β-谷甾醇(2)、桦木酸甲酯(3)、6,8-异戊烯基金雀异黄素(4)、Glisoflavanone(5)五个化合物.化合物3为首次从该种植物中分离得到,化合物1、2、4对小鼠肺腺癌LA795细胞的增殖有一定的抑制作用.     

副干酪乳杆菌N1115对肝硬化患者肠黏膜屏障功能的研究

目的 研究不同剂量副干酪乳杆菌对肝硬化患者肠黏膜屏障的影响。方法 选择我院肝硬化失代偿期患者42例,随机分为对照组和副干酪乳杆菌4 g、8 g、16 g组。各组均给予常规对症治疗。在此基础上,除对照组外,其余各组按相应剂量每日口服补充副干酪乳杆菌,连续2周。所有患者均于治疗前后测血清二胺氧化酶、脂多糖。结果 给予不同剂量副干酪乳杆菌治疗后,各组患者的二胺氧化酶和脂多糖均有所下降,但只有给予16 g副干酪乳杆菌治疗的患者二胺氧化酶和脂多糖与对照组相比差异有统计学意义（t=9.517、10.836,P＜0.05）,同时该组患者疗前后相比差异亦有统计学意义（t=9.445、7.701,P＜0.05）。结论 补充16 g/d副干酪乳杆菌能帮助改善肝硬化患者肠黏膜屏障功能。     

布鲁氏菌对RAW264.7细胞内质网应激与细胞因子分泌的影响

【目的】布鲁氏菌与宿主相互作用的分子机制是目前的研究热点之一,布鲁氏菌通过形成来自于内质网的布氏小体而在巨噬细胞内生存和增殖,其机制目前尚不清楚,宿主细胞内质网应激反应对病原感染和炎症的调控密切相关。揭示内质网应激反应在布鲁氏菌感染巨噬细胞中的作用以及布鲁氏菌感染对巨噬细胞分泌免疫因子的影响。【方法】构建布鲁氏菌感染RAW264.7模型,在感染后不同时间收集细胞,通过实时荧光定量PCR检测细胞内质网应激反应标志分子GRP78和CHOP,以及TNF-α、IL-1β和IL-6在m RNA水平的变化;通过Western blot和ELISA分别检测其蛋白水平的变化。【结果】布鲁氏菌感染RAW264.7细胞的最佳感染复数MOI为100?1;证明在布鲁氏菌感染4-6 h,巨噬细胞可杀伤侵入的布鲁氏菌,之后存活的细菌可在细胞内增殖;感染后24 h出现细胞凋亡,48 h出现大量细胞坏死。布鲁氏菌感染可激活RAW264.7细胞的内质网应激反应,促进GRP78的表达,同时,抑制免疫因子的分泌。【结论】内质网应激反应参与了RAW264.7对布鲁氏菌感染的调节。     

精子胞浆小滴的发现及研究进展

精子成熟是一个复杂的过程,精子从睾丸向附睾运行过程当中,精子表面的胞浆逐渐脱落,最终精子成熟。各种原因引起的精子表面胞浆滞留最终形成胞浆小滴。胞浆小滴在多种物种中均有发现,与男性不育相关。     

诱导表达p27对HEK293细胞生长代谢的影响

目的:研究诱导表达p27对HEK293细胞生长和代谢的影响。方法:将pTet-on载体和响应于Dox的p27诱导表达载体共转染HEK293细胞,随机挑选单克隆细胞株。以细胞周期分布和活细胞密度为主要观察指标,考察稳定转染的细胞在Dox诱导下的细胞生长;以Qglc、Qlac和Qgln为主要观察指标,考察转染细胞在Dox诱导下的细胞代谢。结果:p27基因的表达使HEK293细胞的增殖速度显著降低,G1期细胞比例显著升高,葡萄糖消耗和乳酸生产减少。结论:诱导表达p27基因是对HEK293细胞进行G1期阻滞的一种有效策略。     

多药耐药基因分型芯片的制备及优化

目的:建立多药耐药基因(mdr1)分型芯片,以检测患者的单核苷酸多态性(SNPs)。方法:设计并合成探针和引物,制备芯片;构建野生型和突变型质粒,以其为模板经PCR仪扩增后,与芯片上的探针杂交,并用扫描仪分析结果。结果:构建了野生型和突变型质粒,与芯片杂交能很好地区分基因型;优化了制备条件,建立了分型标准。结论:该基因芯片是一种快速特异的基因分型方法。     

气管哮喘患者血清趋化因子CXCL12水平的表达及其与炎症因子和肺功能的相关性研究

摘要 目的：探讨支气管哮喘患者血清趋化因子CXCL12水平与炎症因子和肺功能的关系。方法：选择2017年10月至2019年10月我院收治的支气管哮喘患者共106例,其中急性发作期67例（急性发作组）、慢性持续期39例（慢性持续组）,另选择50例体检的健康志愿者为对照组,均进行血清CXCL12检测,分析CXCL12与炎症因子、肺功能、嗜酸性粒细胞（EOS）、免疫球蛋白E（IgE）、呼出气一氧化氮（FeNo）的相关性。结果：急性发作期组血清CXCL12、白介素-4（IL-4）、白介素-17A（IL-17A）、白介素-13（IL-13）、EOS、IgE、FeNO水平高于慢性持续期组和对照组（P＜0.05）,慢性持续期组血清CXCL12、IL-4、IL-17A、IL-13、EOS、IgE、FeNO水平高于对照组（P＜0.05）;急性发作期组第1秒用力呼气容积（FEV1）、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值（FEV1/FVC）、第1秒用力呼气容积占预计值百分数(FEV₁ %pred)低于慢性持续期组和对照组（P＜0.05）,慢性持续期组FEV FEV₁、FEV FEV₁/FVC、FEV FEV₁%pred低于对照组（P＜0.05）。多元线性回归分析结果显示血清CXCL12与支气管哮喘患者FEV FEV₁、FEV FEV₁/FVC呈负相关（P＜0.05）,与EOS、IgE、IL-4、IL-17A、IL-13呈正相关（P＜0.05）。结论：CXCL12在支气管哮喘进程中可能发挥促炎作用,血清CXCL12水平可反映患者病情严重程度和肺通气功能。     

软枣猕猴桃总黄酮对V79细胞的辐射防护作用

目的:研究软枣猕猴桃总黄酮的辐射防护活性。方法:以V79细胞辐射损伤模型为体外验证模型,利用回流醇提法提取的软枣猕猴桃总黄酮于辐射前处理细胞,细胞经8 Gy60Coγ射线辐射后,用多功能酶标仪检测细胞的存活率,用流式细胞仪检测细胞内活性氧及细胞凋亡率的变化。结果:用50～200μg/mL的软枣猕猴桃总黄酮于辐射前给药细胞,进行24 h培育,能抑制细胞内因辐射引起的活性氧上升,从而提高细胞存活率。结论:软枣猕猴桃总黄酮能清除细胞内由辐射产生的活性氧,降低细胞凋亡率,达到保护V79细胞的效果。