大鼠大麻素Ⅰ型受体绿色荧光融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定

目的:构建大鼠大麻素型Ⅰ受体绿色荧光融合蛋白真核表达载体并观察其在细胞中的表达。方法:大鼠CB1基因序列设计引物,以大鼠脑组织为模板扩增CB1基因编码区片段,克隆至增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N3中,构建重组融合蛋白表达载体pCB1-EGFP。将pCB1-EGFP质粒转染HeLa细胞,通过观察EGFP报告基因的表达以及免疫荧光,Western Blot方法鉴定CB1可在真核细胞中过表达情况。结果:构建重组融合蛋白表达载体pCB1-EGFP,单双酶切和测序验证正确。将pCB1-EGFP质粒转染HeLa细胞,荧光显微镜下观察到融合表达的绿色荧光蛋白,且呈胞膜表达。免疫荧光试验也证明重组载体转染后,CB1基因和GFP共同定位于胞膜部分。Western Blot实验证明表达CB1蛋白。结论:成功构建了高表达的CB1-EGFP融合蛋白真核表达载体。     

农村留守儿童教育问题浅析

随着我国新农村建设的步伐进一步加快,大量农村富余劳动力越来越多的走出家门外出打工。他们在给新农村建设做出巨大贡献的同时,也给我们农村学校教育带来了一个新的困难问题。但是作为教师的我们,有责任更有义务来教育好这些学生,为他们接受良好教育和健康成长创造一个良好的环境环境。做好留守儿童的教育工作,是我们应尽之责,而且责无旁贷。     

肺癌肿瘤标志物的临床意义及研究进展

肺癌血清肿瘤标志物在肺癌的早期筛查、诊断、疗效评价、复发及预后预测等方面有重要的指导意义。本研究对目前临床常用的癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角蛋白19片段抗原（CYFRA21—1）、鳞状细胞癌相关抗原（SCC—Ag）、乳酸脱氢酶（LDH）5种肺癌相关血清肿瘤标志物的临床意义及研究进展进行综述。     

PNKP在DNA损伤修复中的作用

多聚核苷酸激酶/磷酸酶(polynucleotide kinase/phosphatase,PNKP)是一种DNA末端修复酶,同时具有激酶和磷酸酶活性,在DNA单链断裂修复途径、碱基切除修复途径以及DNA双链断裂修复中的非同源末端连接途径中发挥着至关重要的作用。近年来,由于一种与PNKP相关的常染色体隐性遗传病——MCSZ综合征的发现,使得人们对PNKP的关注度进一步增加。笔者从与PNKP相互作用的X射线交叉互补修复基因1(X-ray repair cross-complementing group 1,XRCC1)、X射线交叉互补修复基因4(X-ray repair cross-complementing group 4,XRCC4)和毛细血管扩张性共济失调突变基因(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)入手,对PNKP在DNA损伤修复中的作用进行概述。     

人源抗HBsAg单链抗体在巴氏毕赤酵母中的表达

在P.pastoris中分泌表达非融合抗HBsAg单链抗体（HBscFv）。设计引物从pGEMHBscFv上扩增目的基因,亚克隆至P.pastoris表达载体pPICZαA中,线性化后转化P. pastorisGS115;转化子经菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定后,甲醇诱导目的蛋白表达。结果发现,重组HBscFv可以在α因子的引导下,分泌至培养基中,产量为80mg/L;分泌至培养基中的HBscFv具有结合HBsAg活性,活性总量在诱导培养72h后达最高峰,在诱导培养后期,HBscFv活性下降;PAS糖显色结果表明,酵母表达HBscFv是一种低糖基化蛋白或非糖基化蛋白。     

粒毛盘菌YM-223胞外黑色素总酚含量及其抗氧化活性

<正>酚类化合物是具有抗氧化活性的天然化合物,在预防人类某些疾病方面有重要作用(Cai et al.2004)。黑色素是一类通过多羟基酚氧化而成的构     

暗盘孢属YM421黑色素稳定性及其抗氧化活性

对暗盘菌Plectania sp.YM421菌株所产黑色素的稳定性及其抗氧化活性进行了研究。结果表明:该黑色素易溶于氢氧化钠溶液和二甲亚砜,微溶于蒸馏水,不溶于盐酸、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿、二甲苯、丙酮和乙醚;该黑色素在pH≥6时稳定,pH≤5时产生沉淀;对室光、日光、紫外光、亚硫酸钠、Na+和K+稳定;添加苯甲酸钠、柠檬酸钠、蔗糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖对黑色素有增色或护色作用;而双氧水、柠檬酸、VitC、Mg2+、Cu2+、Zn2+、Ca2+、Fe3+、Al3+降低其稳定性;该黑色素与VitC还原能力的EC50值(吸光度为0.5时的浓度)分别为169.6μg/mL和31.88μg/mL,对羟基清除作用的IC50值(清除率为50%时的浓度)分别为360.4μg/mL和183μg/mL。作为一种新型的天然色素,YM421黑色素有望应用于食品、化妆品以及医药等行业。     

杨树无性系光合特征的研究

对新培育的金科系列的4个杨树无性系（3^#、6^#、8^#、9^#）的光合特征及净光合速率、水分利用效率与主要影响因子的关系进行了研究。结果表明：不同月份4个无性系的净光合速率的日进程一般在10:00左右达到峰值,然后逐渐降低;蒸腾速率日进程不尽一致;气孔导度在7:00～9:00出现峰值后,缓慢下降。在6～8月,4个无性系的净光合速率的总平均值(μmol CO₂·m^-2·s^-1)排序为：无性系9^#（8.53）>6^#>（7.21）3^#（6.47）>8^#（4.98）;蒸腾速率的总平均值(mmol H₂O·m^-2·s^-1)排序为：无性系9^#（3.74）>3^#（2.76）>6^#（1.76）>8^#（1.47）;水分利用效率的总平均值(mmol CO₂·mol^-1 H₂O)排序为：无性系8^#（4.77）>6^#（4.35）>3^#（2.99）>9^#（2.40）。4个无性系的净光合速率与水分利用效率的排序并不一致。9^#属于高光合、高蒸腾、低水分利用效率类型,8^#属低光合、低蒸腾、高水分利用效率类型。在6月份6^#无性系的净光合速率和水分利用效率与温度、湿度显著相关,3^#、8^#、9^#无性系与光合有效辐射和气孔导度密切相关。     

初中生物学素养多元评价的研究

初中生物学素养多元评价的课题研究从2000学年上学期开始进行,历时将近5年,着重从改革评价内容、评价方式、评价主体、评价目标入手,研究制定黄埔区初中生物学素养多元评价方案(试行),通过试点学校实施和修改完善,推广到全区各类中学,经过