靶向NBS1基因的 microRNA真核表达载体的构建及其活性鉴定

目的:构建靶向NBS1基因的 microRNA真核表达载体,鉴定其转染宫颈癌细胞株Hela后的生物活性?方法:根据NBS1mRNA序列设计合成四对pre- microRNA片段,定向克隆到pcDNA 6.2- GW/ EmGFP-miR真核表达载体上,并将其转染至Hela细胞株中?采用菌落PCR和测序分析鉴定插入序列的完整性;采用实时定量PCR分析鉴定重组体对NBS1mRNA表达的干扰效果以确定其生物活性? 结果:构建的四组重组体插入片段的碱基序列完全正确?重组体能干扰Hela细胞NBS1基因的表达,四组重组体NBS1 mRNA表达量分别为: 0.24±0.17 (NBS1mi-1组)?0.12±0.12 (NBS1mi-2组)?0.41±0.97 (NBS1mi-3组)?0.48±0.93 (NBS1mi-4组),其中NBS1mi-2组表达最低? 结论: 构建的四组NBS1 microRNA重组体在Hela细胞株中都具有生物活性, 且NBS1mi-2组的干扰作用最强? 载体构建成功,为应用microRNA靶向NBS1的肿瘤基因治疗的研究奠定了基础。     

中华鳖肠道益生菌的筛选、鉴定与生长特性研究

通过点种法初筛和牛津杯法复筛, 从中华鳖肠道筛选到1株对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(A. sobria)以及豚鼠气单胞菌(A. caviae)具有拮抗作用的益生菌株Dec-43。对该菌株进行形态、生理生化特征分析, 结果与《常见细菌系统鉴定手册》中屎肠球菌(Enterococcus faecium)的生理生化特征一致。提取细菌基因组DNA, 通过16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增, 从该菌株的16S rRNA基因中克隆到了一个长度1448 bp的片段, 经测序和序列比对, 该片段与Genbank中屎肠球菌的序列相似性达99%, 因此, 该菌株确定为屎肠球菌。通过单因素试验确定了该菌株的最佳生长温度、盐度、初始pH、接种量等参数分别为: 36℃、盐度0.6%、培养基初始pH 7、接种量10%; 通过正交试验, 确定了该菌株培养基中碳源(葡萄糖)、氮源(蛋白胨)最适含量分别为15和10 g/L。研究发现了一株中华鳖肠道潜在益生菌, 并研究了其生长特性, 为中华鳖养殖行业益生菌的应用提供了基础。       

油菜素内酯生物合成途径的研究进展

油菜素内酯(BRs)在植物的生长发育过程中具有重要作用。该文首先综述了油菜素甾醇的结构及其生物合成途径的研究方法。之后, 介绍了其化学及生物活性的检测方法。最后, 详细介绍了BR生物合成的早期和晚期C-6氧化途径及早期C-22和C-23羟化与合成途径的调控, 并阐述了近年来植物油菜素内酯生物合成缺失突变体及其合成酶等方面的研究进 展。     

中阳县农田鼠害现状及防治

农田鼠害是农业生产的主要障碍。本文对农田鼠害发生及防治进行了初步研究。结果表明,农田害鼠种类分布主要随地形貌不同而有区域分布,中华鼢鼠,达乌尔黄鼠是丘陵,旱作区的优势鼠种。用灭鼢鼠管消灭中华鼢鼠,烟雾炮消灭达尔黄鼠效果在９５％以上,且不受季节限制,不破坏庄稼,不污染环境。     

云南秋海棠属叶表皮及毛被的扫描电镜观察

首次报道滇产秋海棠属46种3变种叶表皮及毛被的扫描电镜特征。研究表明所有种的特征组合均有明显区别,因而这些微形态特征可作为分种和变种的依据。在每个组内难以找到一致的特征,因而在组的划分上意义不大,但秋海棠组内毛被和表皮特征的分化却为探讨一些组间的关系提供了某些线索。另外,通过探讨各组内毛被的发生和生态环境的关系,似可看出侧膜组应为较原始的类型,从而推断各组间的关系。     

Construction of novel tumor necrosis factor-alpha mutants with reduced toxicity and higher cytotoxicity on human tumor cells

Two tumor necrosis factor-α mutants MT1 (32Trp157Phe) and MT2 (2Lys30Ser-32Trp 157Phe) were constructed by site-directed mutagenesis. These mutants were soluble and over-expressed inE. coli. The purity of purified mutants was above 95% by serial chromatography. The results of Western blot indicated that these mutants could be cross-reactive with monoclonal antibody against native hTNF-α. Compared to parent hTNF-α, the cytotoxicity of these mutants on murine fibrosarcoma L929 cell lines reduced 4–5 orders of magnitude but was equivalent to that of native hTNF-α on human tumor cell lines. The LD50 of mutant MT1 was reduced to 0.34% of wild type and the dose of MT2 that resulted in 30% death of mice reduced to less than 1/700 that of parent hTNF-α.     

高血压手术患者对不同麻醉诱导的反应研究

目的:比较高血压手术患者在不同麻醉诱导过程中,分别使用异丙酚、七氟醚及两种联合下的麻醉诱导对病人血压、心率及麻醉深度指数(CSI)的影响,以寻求最理想的针对高血压手术患者的麻醉方法.方法:本研究选择临床确诊ASA Ⅱ级,高血压Ⅰ～Ⅱ级择期全麻手术患者90例,随机分为三组(A、B、C组),每组30例,分别对应异丙酚、七氟醚及异丙酚联合七氟醚麻醉诱导组.分别观察三组患者麻醉诱导前(T0)、诱导后(T1)、插管后(T2)的心率(HR)、血压(SBP/DBP)及麻醉深度指数(CSI)的变化.其中所有结果均经统计学t检验,P＜0.05有统计学差异.结果:组内比较,三组患者T1和T0比较,SBP和DBP均呈显著性下降(P＜0.05),而T1和T2比较,SBP和DBP均呈显著性上升(P＜0.05),T2和T0比较,A组无明显差异(P＞0.05),B组和C组差异明显(P＜0.05);组间比较,诱导后的血压下降,A组较B下降幅度明显,差异有统计学意义(P＜0.05).A组与C组相比血压下降,差异有统计学意义(P＜0.05).插管后血压上升,B组较A组血压上升,差异有统计学意义(P＜0.05).A组较C组血压上升幅度明显,差异有统计学意义(P＜0.05).B组较C组血压上升幅度明显,差异有统计学意义(P＜0.05).三组患者T1的CSI均无差异性(P＞0.05).A组T2比B组CSI较低,有统计学差异(P＜0.05),C组比B组CSI也较低,有统计学差异(P＜0.05).结论:异丙酚,七氟醚,异丙酚联合七氟醚三种方法均可用于高血压患者的术前麻醉.但相比较而言,异丙酚联合七氟醚对插管后高血压患者的平稳作用优于异丙酚组和七氟醚组.     

重症显微镜下多血管炎1例报告并文献复习

目的:显微镜下多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)通常易侵犯肾脏,很少累及神经系统,而同时累及肺及中枢神经系统的重症病例较少见。本文旨在探讨重症显微镜下多血管炎(MPA)的临床表现、诊断与治疗,为临床提供借鉴。方法:回顾性分析重症显微镜下多血管炎(MPA)的文献资料,结合本中心病例,54岁女性,尿检异常6年,咳血3年因肾功能衰竭合并心衰入院。结合实验室检查及影像学改变,诊断为重症AASV,考虑MPA可能性大。结果:入院后即给予激素联合环磷酰胺冲击治疗,病情明显好转;3周后出现病情反复,再次激素冲击治疗,效果不如前。继而出现脑出血,病情进一步恶化,最终因肾、肺、脑等多器官功能衰竭于入院5周后死亡。结论:对MPA患者关键在于早发现早治疗;而对缓解重症MPA患者病情,激素联合环磷酰胺冲击治疗在初始阶段有效。     

瑞舒伐他汀和阿托伐他汀在急性冠脉综合症中对氯吡格雷抗血 小板活性的对比研究

目的：在急性冠脉综合征( acute coronary syndromes, ACS )的治疗中,抗血小板治疗及调脂治疗是最基础的治疗方案。近来 有学者提出,氯吡格雷和他汀类药物都经过细胞色素CYP 3A4 途径代谢,二者因存在竞争性抑制,有可能降低氯吡格雷抗血小板 的活性。本试验将针对阿托伐他汀及瑞舒伐他汀进行研究。方法：选择急性冠脉综合症的患者42 例,所有患者均接受氯吡格雷治 疗（负荷剂量300 mg,维持剂量75 mg/d）。随机分配为A、B 两组,A 组（n=20）服用阿托伐他汀治疗（20 mg/d）,B 组（n=22 服用瑞 舒伐他汀治疗（10 mg/d）。分别于氯吡格雷服用前、服药治疗后3 天、服药治疗后7 天后采静脉血送检,测定ADP（10 滋mol/L）诱导 的血小板聚集率。结果：阿托伐他汀组（A 组）及瑞舒伐他汀组（B 组）相比,服用氯吡格雷前ADP 诱导的血小板聚集率基线值无 统计学差异。服用氯吡格雷3 日及7 日后,ADP诱导的血小板聚集率明显降低,(3.85± 2.58)vs(3.09± 2.27),(0.65± 0.88)vs(1.05± 0.95),P>0.05,无明显统计学差异。结论：氯吡格雷的确可以降低血小板的活性。同时,短期之内氯吡格雷的抗血小板活性未受到 他汀类的影响,包括经过CPY3A4途径的他汀,如阿托伐他汀。     

代谢组学在中药研究中的应用进展

代谢组学是功能基因组学和系统生物学研究不可或缺的重要组成部分,是通过考察生物体系受刺激或扰动前后代谢产物的动态变化,研究生物体系的代谢网络的一种技术。应用代谢组学高通量、整体性的研究思路来理解中药的作用过程,与中医药的整体、辩证观点是一致的。代谢组学已成为中药研发的一个重要途径和手段,为中药现代化在技术上提供巨大支持,有助于为中药现代化研究寻找更多有效的突破口。本文在前人综述的基础上,着重概括了中药代谢组学研究方法近3年来在中药有效物质基础和作用机制、药物作用模型的鉴别和确证、毒性研究和中药安全性评价等方面的应用情况,同时展望了代谢组学方法所面临的机遇和挑战。