芯片杂交中荧光标记样品定量与非定量的比较研究

比较在芯片杂交中,荧光标记样品定量与非定量对杂交结果的影响。其方法是,提取经As2O3作用K562细胞前后的总RNA,逆转录成cDNA第一链,并分别用Cy3／Cy5标记。标记后的样品再次定量或不定量,但均取相同体积上样与K562芯片杂交,用扫描仪扫描并分析。其结果,标记后样品定量与不定量杂交的结果都与理论推测一致,但以样品定量进行杂交的效果更好,标记样品杂交前再次定量的,分析发现2个基因表达下调;杂交前不定量仅取相同体积进行杂交的,发现6个基因片段表达下调,其中只有2个基因与细胞凋亡通路密切相关。认为在芯片的杂交检测中,对荧光标记样品杂交前再次定量可大大提高杂交结果的可靠性。     

用限制性cDNA文库制作K562细胞基因表达谱芯片探针

以人红白血病K562细胞为材料,应用限制性显示PCR（RD-PCR）技术构建cDNA文库,该文库通过PCR引物3′端延伸两个不同碱基形成136对引物对cDNA进行限制性扩增,得到136组不同的PCR扩增产物,纯化后与载体连接并转化细菌,即为限制性cDNA文库,根据不同的分组进行克隆的鉴定和分离。并进行大量扩增制备cDNA芯片探针,该方法构建的文库因经过了限制性分组扩增,每组均含有特定的cDNA,因而大大加快了随后克隆的分离 和鉴定的速度,为基因芯片探针制备提供了一个新方法。     

失血性休克引起大鼠肠系膜动脉平滑肌依钙K~ 通道活动改变

在由股动脉放血制备的失血性休克大鼠模型急性分离的肠系膜动脉平滑肌细胞上 ,利用膜片箝单通道记录技术观察了血管平滑肌依钙K 通道 (BKCa)的活动。发现在对去甲肾上腺素 (NE)反应性增高的休克代偿期 ,BKCa的开放概率 (Po)和单位电导都显著较正常动物的低 ,Po 的改变主要是由通道的慢关闭时间常数 (τcs)增大引起关闭时间延长所致 ;而处于对NE反应性降低的休克失代偿期 ,BKCa的Po 和单位电导都高于正常动物 ,Po的变化也主要是τcs减小所致。     

泥鳅多糖清除活性氧和保护DNA链的作用

采用化学发光法和分光光度法在多种化学模拟体系中研究了泥鳅多糖清除活性氧的作用 ,并用化学发光法观察了泥鳅多糖对·OH导致DNA链损伤的抑制作用。结果表明 ,泥鳅多糖能够有效地清除O·-2 、·OH、H2 O2 等活性氧 ,对DNA链具有良好的保护作用     

极端晚播对小麦籽粒产量、氮素吸收利用和籽粒蛋白质含量的影响

为探索小麦高产高效优质生产技术途径,指导小麦晚播生产实践,2012年10月—2014年6月,以弱春性小麦偃展4110和半冬性小麦矮抗58为材料进行连续2年的田间定位试验,设置了常规适播(10月中旬、240万株·hm^-2)和极端晚播(11月中旬、600万株·hm^-2)两种栽培模式,研究了极端晚播对0～40 cm土层土壤硝态氮含量、小麦氮素吸收利用、产量、籽粒蛋白质含量和氮素吸收效率的影响.结果表明: 与常规适播处理相比,两个生长季极端晚播处理均使拔节和开花期0～40 cm土壤硝态氮含量显著提高,从而促进拔节后小麦植株氮素吸收积累,成熟期穗部氮素的分配比例也得到提高,最终显著提高小麦籽粒蛋白质含量和偃展4110的蛋白质产量、氮素吸收效率,但对籽粒产量的影响因品种而异.其中,极端晚播处理使偃展4110的籽粒产量显著提高,而矮抗58的籽粒产量却显著降低.因此,极端晚播栽培模式可维持小麦拔节后的土壤氮供应,有利于提高小麦氮素吸收效率,从而提高小麦籽粒产量和蛋白质含量,是灌区小麦高产优质的有效途径之一.     

组织学与胚胎学中“形”的意会

组织学与胚胎学是一门重要的微观形态学课程,教师利用教学机智地使人体抽象的微细结构形象化,意境化,开发形态命名蕴含的深层意义,展现形态结构的内涵意会,制定特定的教学策略和意境,应用多变灵活的课程教学模式与教学方法,提高学生的专业学习技能和自主学习能力,促进被动记忆向知识形成递进,将能力培养融入课堂教学,人文教育渗透教学过程,提升职业综合素质,达到知识、能力、素质全面发展的教育教学目标。     

蝗卵的研究 Ⅲ.东亚飞蝗卵的失水和耐干能力

一、引言 在上文中作者等曾报告东亚飞蝗卵在孵育期间的吸水现象和卵包膜在构造上所起的变化,初步指出在这一种类中水分对于胚胎发育的重要性,以及卵包膜中初生和次生的保护构造对于防止失水的作用。本文继续报告在本实验室中所进行的另一部分工作的结果,目的在于明确:第一,不同发育期的蝗卵和胚胎的耐干能力有何不同,被摄取的水分对于胚胎发育究竟有何重要性;第二,不同发育期蝗卵失水的难易有何区别,系由何种因素所决定。     

粘虫营养的研究——食物中和环境中水分对于幼虫生长的影响

粘虫在幼虫的不同发育阶段中,身体的含水量常有明显的变动。这种变化显然可受食物含水量的影响。初孵化幼虫的含水量约在83%左右,到2龄盛食期增高到约为89%,以后变动于90%上下,到末龄成熟时剧烈下降,在化蛹前到达73%左右。在每一龄期中,刚蜕皮而尚未取食时含水量最低,盛食期最高,在蜕皮前又行下降。在试验室条件下以玉米叶饲养的粘虫全幼虫期取食叶片共约3克左右,合干重0.6克;对食物的利用率以鲜重计算为20%左右,以干重计算为24%左右。但不同龄期的食物利用率不同:幼龄的比老龄的高。与此类似的,是不同龄期幼虫对食物中水分的吸收率不同:在一、二龄幼虫中,所吸收的水分占食物鲜重74.9%,相当于食物所含水分的98.9%:而在最后两龄幼虫中,相应数值分别为10.7%和13.6%。故食物中水分对于幼虫的营养作用在幼龄时似乎更为重要。当以其它成分大致相等而含水量不同的玉米叶饲养幼虫时,含水量即使相差不远,也可明显地影响幼虫的生长;此效应在幼龄幼虫中更为显著。随食物所吃下水分的多寡略能影响幼虫对水分的吸收,但差异不显著;此因素虽可影响虫体的含水量,但并不影响幼虫对食物的利用率。食物含水量对幼虫生长的影响,主要是因取食量不同而产生的:幼虫对含水较多的叶片取食量较大,因此生长较快。幼虫在干燥的环境中逗留较久后能饮液态水和取食潮润物体,但环境中的水分似乎并不能透过表皮而进入虫体。幼虫对空气温度反应灵敏,当湿度过低时生长延缓。高龄幼虫在干燥环境中绝食时能调节体内的含水量,而低龄幼虫却不能。这可能与前者已积累起较多的脂肪,能产生代谢水;以及表皮能更有效地阻止体内水分蒸发等特点有关。     

医院核心价值观的构建与思考

近年来,群众反映强烈的“看病难、看病贵”、收取红包、开大处方及乱收费等问题日益突显,引起医患关系日趋紧张。虽然存在着种种原因,但医院核心价值观缺失、医学科学人文精神弱化便是其中之一,如何构建起医院核心价值观成了当下一个重要话题。从医院、医院管理层和广大职工三个层面去凝炼医院的核心价值观,阐释构建医院核心价值观的重要意义和途径。