全文获取类型
收费全文 | 460篇 |
免费 | 78篇 |
国内免费 | 233篇 |
出版年
2023年 | 7篇 |
2022年 | 7篇 |
2021年 | 8篇 |
2020年 | 8篇 |
2019年 | 15篇 |
2018年 | 12篇 |
2017年 | 6篇 |
2016年 | 12篇 |
2015年 | 16篇 |
2014年 | 28篇 |
2013年 | 14篇 |
2012年 | 46篇 |
2011年 | 22篇 |
2010年 | 15篇 |
2009年 | 27篇 |
2008年 | 32篇 |
2007年 | 28篇 |
2006年 | 36篇 |
2005年 | 25篇 |
2004年 | 24篇 |
2003年 | 23篇 |
2002年 | 9篇 |
2001年 | 25篇 |
2000年 | 29篇 |
1999年 | 17篇 |
1998年 | 20篇 |
1997年 | 22篇 |
1996年 | 25篇 |
1995年 | 30篇 |
1994年 | 13篇 |
1993年 | 8篇 |
1992年 | 23篇 |
1991年 | 25篇 |
1990年 | 12篇 |
1989年 | 12篇 |
1988年 | 8篇 |
1987年 | 5篇 |
1986年 | 6篇 |
1985年 | 14篇 |
1984年 | 6篇 |
1983年 | 11篇 |
1982年 | 6篇 |
1981年 | 4篇 |
1980年 | 4篇 |
1979年 | 3篇 |
1974年 | 3篇 |
1965年 | 3篇 |
1959年 | 2篇 |
1958年 | 4篇 |
1956年 | 2篇 |
排序方式: 共有771条查询结果,搜索用时 15 毫秒
61.
鄱阳湖黄鳝的生长特征 总被引:1,自引:0,他引:1
以基舌骨和脊椎骨作为年龄鉴定的材料,研究了鄱阳湖黄鳝(Monopterus albus)种群的生长特征.结果表明,种群的年龄结构分别为:雌性1~5龄,雄性2~6龄,2~5龄为黄鳝性别的过渡期(间性).2~4龄为优势年龄组,占渔获物的89.75%,相对应的体长为30~50 cm,体重为30~120 g.体长(L)与体重(W)的关系为:W=0.000 4L3.2601(♀);W=0.001 4L2.9008(∮).按生长指标值分析,阶段生长可以明显地划分为两个时期,即2龄前的生长迅速期和2龄后的生长稳定期.拟合的Von Bertalanffy生长参数分别为雌性L∞=78.5 Cm,k=0.174 02/y,t0=-1.203 2 Y,W∞:602.01 g;雄性L∞=102.3 cm,k=0.118 45/y,t0=-1.310 1 Y,W-=947.32 g;生长特征参数分别为ψ=3.030 3(♀)和ψ=3.093 4(∮);雌雄个体生长差异显著. 相似文献
62.
目的 探讨大肠癌术后复发的原因,以期达到早期诊断提高术后复发的治疗效果。方法 回倾性分析从1999~2004年25例大肠癌术后复发患者的临床资料。结果 吻合口复发12例,腹腔、盆腔种植复发8例,局部复发3例,复壁切口复发3例。非手术治疗2例,手术治疗23例。根治性切除10例,姑息性切除8例。根治性切除和非根治性切除患者的中位生存时间分别为28个月和10个月。结论 大肠癌术后复发的预防重在术中无瘤操作,定期随访是早期诊断的关键。应积极手术治疗,以延长生存期,提高生活质量。 相似文献
63.
通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传代4次时,4h采集的血清细胞生长状态良好,8h采集的血清细胞出现明显的衰老,12h采集的血清细胞大面积死亡;②在细胞维持换液方面,4h采集的血清可维持细胞换液25次以上,8h采集的血清可勉强维持20次,12h采集的血清维持细胞换液10次时已大部分死亡;③乙肝表面抗原(HBsAg)表达量的检测结果,同批培养上清,4h采集的血清培养细胞表达量最高。可见,小牛出生后采集血清时间越早越好。 相似文献
64.
一株能降解有机磷农药甲胺磷的光合细菌HP-1的分离及生物学特性的研究 总被引:17,自引:0,他引:17
从湖南农药厂甲胺磷废水和污泥中分离到光合细菌菌株18株,经过初步筛选得到1株可降解甲胺磷(metham idophos)的菌株HP-1,红色圆形菌落,边缘整齐光滑,中间稍稍突起,菌落直径0.64~2.60mm,菌革兰氏染色阴性G-,细菌单个细胞短杆形或弯曲杆形,(0.40~0.70)μm×(1.2~2.0)μm,不对称出芽分裂,细胞具有极生鞭毛或亚极生鞭毛,片层状光合内膜位于细胞膜下并与之平行,初步鉴定为沼泽红假单胞菌(Rhodopesudomonas plaustris).培养7d后,能够降解甲胺磷(65.20%,500m g/L和49.60%,1000m g/L),且在外加碳源时能提高其降解性能,还能降解乐果、毒死蜱、三唑磷和辛硫磷.该菌株发酵液能够促进萝卜种子萌发,提前发芽时间,具有促生生物学活性. 相似文献
65.
人DNA 拓扑异构酶Ⅰ在毕赤酵母中的表达及发酵条件优化 总被引:1,自引:0,他引:1
为了在体外以人DNA拓扑异构酶Ⅰ(hTopoⅠ)为靶位进行抗肿瘤化合物的快速筛选,用RT-PCR法从Hela细胞中克隆了hTopoⅠ基因ORF并在毕赤酵母中首次成功表达,表达产物可分泌到发酵上清,易于制备。蛋白酶A缺陷的重组酵母(SMD-hTopoⅠ)分泌重组酶的能力比具有蛋白酶A活性的重组酵母(X33-hTopoⅠ和KM-hTopoⅠ)更高。通过发酵条件的优化,使用BMMY(pH7.25),于20℃,每隔24h补加0.5%(V/V)的甲醇和3%(V/V)的营养液,SMD-hTopoⅠ诱导72h后可表达最高的酶活力(43000u/mL),发酵上清中hTopoⅠ可达11mg/L,约占总蛋白的10%。SDS-PAGE和Westem blot分析显示,表达的hTopoⅠ为91kD蛋白,无糖基化修饰。 相似文献
66.
分离克隆了腾冲嗜热杆菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)海藻糖磷酸化酶(TreP)的编码基因(treP), 该酶可催化以葡萄糖和α-1-磷酸葡萄糖为底物的海藻糖合成反应及其逆向的分解反应. 反向mRNA点杂交实验表明, 腾冲嗜热杆菌中treP基因在高盐胁迫条件下表达量增加, 而在海藻糖诱导条件下表达量降低. 将该基因导入不含TreP的大肠杆菌中进行诱导表达, SDS-PAGE表明, 异源表达的TreP分子量约为90 kD, 与预期值相同. 通过葡萄糖氧化酶法测定分解产物葡萄糖的产率表明: TreP催化海藻糖分解反应的最适温度是70℃, 最适pH值为7.0; 通过HPLC检测合成产物海藻糖的产率表明: TreP催化合成反应的最适温度为70℃, 最适pH值为6.0. 在最适反应条件下, 50 μg的TreP粗酶可催化25 mmol/L α-1-磷酸葡萄糖与葡萄糖在30 min合成11.6 mmol/L海藻糖; 而同量的酶在同样时间内仅能将250 mmol/L海藻糖分解生成1.5 mmol/L葡萄糖. 以上体内胁迫和诱导表达分析及体外酶学性质分析均证明该酶的主要功能是催化海藻糖的合成反应. 热稳定性实验表明, 该酶性质比较稳定, 在50℃下温育7 h还能保持77%以上的活性, 是一个有潜在工业用途的新的热稳定海藻糖合成酶. 相似文献
67.
玉米种质资源抗弯孢菌叶斑病特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
针对近年弯孢菌叶斑病日益严重的发生趋势,对1698份玉米种质(自交系、群体、杂交种以及特殊材料)进行了抗弯孢菌叶斑病鉴定。结果表明,中国玉米种质抗性较引进种质抗性好;不同省份所供种质抗性存在差异,北京、四川、广西种质总体抗性较好;在新选育的自交系中,鉴定出12份高抗材料;在当前培育的杂交种中,有22份高抗或抗弯孢菌叶斑病;玉米对弯孢菌叶斑病抗性在相同核基因、不同细胞质种质间无差异;玉米抗大斑病基因对抗弯孢菌叶斑病无效。 相似文献
68.
云南地方稻种持久抗瘟性的研究 总被引:4,自引:1,他引:3
1996~1999年,在不同纬度、不同海拔和不同稻作生态类型的重病区设立5个持久抗性稻瘟病鉴定圃。试验材料为云南的74份地方稻种资源,其中粳稻56份,籼稻18份(含野生稻3份)。通过多个抗性组分进行了系统研究,初步表明大白谷(粳、墨江县)、毫弄早(籼、勐海县)、毫玉浪(籼、勐海县)、疣粒野生稻(野、西双版纳自治州)等具有持久抗瘟性能;其中疣粒野生稻高抗细菌性条斑病,对白叶枯病抗性为0级,接近免疫,中抗稻瘟病。通过对品种多抗性组分分析和品种抗性系统聚类分析,提出在不同生态类型时、空动态的病叶片上的产孢量和病斑表型可作为简易、快速鉴定持久抗瘟性指标。 相似文献
69.
中药大黄的综合研究XXXI.大黄蒽醌衍生物系统分离的改进方法 总被引:15,自引:1,他引:14
西宁大黄小碎片加到20%硫酸溶液和氯仿的混合液中,在水浴中回流以水解,提取,氯仿提取液相继以5%碳酸氢钾溶液,5%氢氧化钾溶液振荡提取,提取液分别以盐酸酸化,即分离得大黄酸,大黄素,芦荟大黄素及大黄酚和大黄素甲醚混合物等黄色沉淀物,后者再以硅胶柱层析分离,可得大黄酚和大黄素甲醚单体,上述五种蒽醌衍生物再经结晶即得纯品。 相似文献
70.
根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的核苷酸序列设计引物,运用聚合酶链式反应(PCR)扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒pRSET A的BamHI和EcoRI位点,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得高效表达,SDS-PAGE蛋白电泳表明在39.9kD处出现超强特异带,占总蛋白的51%。以 Ni-NTA-Conjugate抗体进行Western blot分析证明该399kD的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Western blot检测结果显示,该抗体与表达的融合蛋白和从嗜水气单胞菌中提取的36.9 kD外膜蛋白均呈阳性反应,表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性,为此融合蛋白作为疫苗的候选成份提供理论基础。 相似文献