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81.
目的运用CRISR/Cas9技术敲除小鼠基因组中Bmp9基因片段,构建Bmp9基因敲除小鼠。方法根据Bmp9基因的外显子序列,设计一段sgRNA并合成。sgRNA体外转录后和Cas9mRNA混合后显微注射受精卵细胞,注射后的受精卵细胞移植至受体动物获得子代小鼠。提取子代小鼠基因组DNA测序鉴定其基因型。基因型鉴定正确的小鼠与野生型交配后筛选纯合子小鼠。同时取纯合子小鼠心脏、肝、脾、肺、肾,匀浆后提取总RNA和总蛋白,通过qPCR、WB和免疫组化检测BMP9在各组织中的表达。结果设计并合成20bp的sgRNA并进行体外转录,显微注射并回植后得到基因突变小鼠,连续交配后得F2代纯合子。测序结果显示,突变小鼠存在两种基因型,一种为5bp缺失突变,另一种为13bp缺失并伴有1bp插入突变。与野生型C57BL/6相比,qPCR、WB和免疫组化结果均表明基因敲除小鼠肝中BMP9表达显著降低。结论利用CRISPR/Cas9技术成功构建出了BMP9基因敲除小鼠。 相似文献
82.
目的:取肾癌病人标本建立一株新的人肾癌细胞系,初步对该细胞系进行鉴定,为进一步的肾癌基础研究提供实验模型.方法:2008-2009年间共采集20例肾癌新鲜手术标本,于手术后1 h内将每例标本切取四块0.5cm× 0.5 cm× 0.5 cm组织块,分别包埋于2只裸鼠的右后肢皮下及背部皮下,连续传代3次,取移植瘤体外培养,记录细胞株的生长曲线,测定细胞集落形成率,对细胞进行DNA含量测定,进行染色体分析及病理学检查.结果:其中1只裸鼠皮下移植瘤生长,继续传代,肿瘤生长速度明显加快.取移植瘤标本体外培养得到肾癌细胞系XJG-9201.形态结构,分化程度与原发瘤一致,染色体众数为65.细胞群体倍增时间为38.2h,细胞周期分析G1期62.7%,G2期11.2%,S1期25.3%,集落形成率为70%.结论:肾癌细胞系XJG-9201与原发癌保持相同的生物学特性,体外连续传代1年以上传115代.细胞形态不变,生长周期恒定,已成为一个稳定的细胞系. 相似文献
83.
84.
师长宏 《中国实验动物学报》2010,18(6):538-541
目前对于结核分枝杆菌进入潜伏期的机制以及再激化的原因知之甚少,一个重要的原因是缺乏潜伏感染(LTBI)动物模型,完整的LTBI模型应包括两种类型,一是低剂量荷菌的持续性感染模型,另一种为潜伏感染模型,即Cornell模型的改进型。综合使用柯氏量表评分、脾肺荷菌数、诱导的IFN-γ和TNF-α水平、组织中IL-10和IL-4的表达、脏器中特异性抗原负荷以及激素诱导TB复发的时间、潜伏感染相关基因的表达水平等指标可以比较准确、客观、特异性的评价小鼠LTBI模型的反应性。 相似文献
85.
摘要 目的:探讨桥本甲状腺炎(HT)患者血清微小核糖核酸(miR)-326、miR-155与甲状腺相关抗体和辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子失衡的相关性。方法:选择2021年1月至2022年10月空军军医大学唐都医院收治的HT患者82例作为研究组,同期接受体检的健康人80例作为对照组,比较两组血清miR-326、miR-155、甲状腺功能参数[促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)]、甲状腺相关抗体[甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)]、Th17、Treg水平及其细胞因子水平,并分析HT患者血清miR-326、miR-155与甲状腺相关抗体和Th17/Treg细胞因子失衡的相关性。结果:研究组TSH、TPOAb、TGAb显著高于对照组,FT3、FT4显著低于对照组(P<0.05)。研究组血清miR-326、miR-155表达水平显著高于对照组(P<0.05)。研究组Th17、Th17/Treg、白细胞介素-17(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)显著高于对照组,Treg、白细胞介素-10(IL-10)水平显著低于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,HT患者血清miR-326、miR-155分别与TSH、TPOAb、TGAb、Th17、Th17/Treg、IL-17、IFN-γ呈正相关,与FT3、FT4、Treg、IL-10呈负相关(P<0.05)。结论:HT患者血清miR-326、miR-155水平异常升高,其水平与TPOAb、TGAb自身抗体及Th17/Treg失衡相关,血清miR-326、miR-155可能通过影响Th17/Treg免疫平衡,促进HT的发生和发展。 相似文献
86.
87.
同源异型基因在花发育和进化中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
该文对植物发育和进化中同源异型基因的调控作用进行了综述,并介绍了金鱼草和拟南芥菜中几个同源异型基因对花器官变异的调控。 相似文献
88.
89.
本文用低压舱模拟不同海拔高度,测定横断脊髓大鼠脊髓反射兴奋性恢复曲线。断脊髓组和对照组自海拔2000m以后脊髓反射兴奋性逐渐增高,但两组出现差异有显著性的海拔高度不同,断脊髓组为海拔4000m,对照组为海拔3000m。对照组与断脊髓组在同一海拔高度上比较,除海拔3000m时差别有显著性(P<0.05)外,在其它各海拔高度上两组间差异无显著性(P>0.05)。结果表明,低氧时脊髓以上中枢和脊髓都参与脊髓反射兴奋性升高的调节 相似文献
90.
精氨酸对烧伤大鼠免疫功能的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
旨在观察烧伤后补充Arg对大鼠血清免疫球蛋白、TNF、吞噬细胞功能的影响。用Wistar大鼠,180±10g,Ⅲ°烧伤后1,3,7,10天取血测定免疫球蛋白A、G、M,及TNF水平,并于烧伤后第3天取腹腔吞噬细胞观察其功能,计算其吞噬指数、吞噬率。结果烧伤大鼠血清IgA、IgG、IgM水平降低,TNF水平明显升高,吞噬细胞功能下降;饲喂补充Arg的饲料后,血清免疫球蛋白水平、吞噬细胞功能均有所改善,TNF水平降低。说明烧伤后补充Arg可以改善机体免疫状态。 相似文献