蛋白质的化学修饰

蛋白质种类繁多,结构各异,各有不同的功能,是生命活动不可缺少的重要角色,在疾病的治疗上有着广泛的应用。天然蛋白质在有其重要功能的同时,也有一些人们不希望有的缺点,如有抗原性,功能单一,半衰期太短等。为寻找理想的药用蛋白,人们试图对现有的蛋白质进行改造,这种改造主要有两种方式:一是通过基因工程的手段,改变蛋白质的编码基因,使蛋白质的氨基酸序列乃至空间结构发生改变,从而达到改变蛋白质性质和功能的目的;另一种方法是通过化学修饰来改变蛋白质的性质和生物学特性。虽然DNA技术     

优化mRNA翻译起始区提高人粒－巨噬细胞集落刺激因子在E．coli中的表达

人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）是一种重要的造血生长因子．利用基因重组技术构建两个ｈＧＭ－ＣＳＦ的Ｅ．ｃｏｌｉ表达菌株,一个为在不改变氨基酸顺序的前提下,对ｍＲＮＡ翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ））,另一个为未突变的对照（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ））．经酶切电泳、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ等分析鉴定,证明两者均能表达特异性的１４．６ｋＤｈＧＭ－ＣＳＦ,但ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ）的表达水平较ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ）提高了１．２６倍,占菌体总蛋白的１６．９％．ｍＲＮＡ翻译起始区二级结构预测分析表明,优化突变后生成自由能ΔＧ从原来的－１０．２提高至－９．４Ｋｃａｌ,ＡＵＧ从部分配对状态变为非配对状态．     

大鼠血,肝匀浆及亚细胞组分生化参数值的报告

本文报道正常成年大鼠血、肝匀浆及亚细胞组分的部分生化参数值,包括血液中谷胱甘肽过氧化物活性,红细胞超微化歧化酶活性,血清铜兰蛋白及丙二醛含量;     

全反式维甲酸对HL-60细胞中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶II,IV活力的影响

本文研究全反式视黄酸（ＡＴＲＡ）对ＨＬ－６０细胞中乙酰氨基葡萄糖转移酶ＩＩ和ＩＶ（ＧｎＴ－ＩＩ,ＩＶ）的调控作用,结果发现０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＡＴＲＡ即可使ＧｎＴ－ＩＩ和ＩＶ的活力明显降低至５０％左右,但ＡＴＲＡ浓度增至１．０或１０μｍｏｌ／Ｌ时,酶活力不再显著下降。在未经ＡＴＲＡ处理的对照细胞中,培养不同时间两酶活力均有较大的变动,未经同步化和同步化的细胞分别在２４ｈ及至４８ｈ达到高峰。ＡＴＲＡ处理后,未经同步化细胞的酶活力高峰也在２４ｈ,但不论同步化与否,在２４ｈ之前均未见两酶活力的下降,２４ｈ后,酶活力逐步降低。对以上结果作了讨论。     

凝血酶对荧光标记的人单个血小板游离[Ca^2＋]和膜电位的动态影响

本文将ｆｌｕｏ－３和ｄ_ｉ－ＢＡ－Ｃ４（３）荧光标记的血小板固定于纤维蛋白原表面,以５７０型粘附式细胞仪（ＡＣＡＳ５７０）动态观察了凝血酶激活的人单个血小板细胞内游离［Ｃａ~（２＋）］（钙离子浓度）和膜电位的变化。静息状态时细胞游离［Ｃａ~（２＋）］和膜电位荧光较低,波动不明显。当加入０．１Ｕ／ｍｌ凝血酶激活时,［Ｃａ~（２＋）］（细胞内游离钙离子浓度）与膜电位迅速升高,随后［Ｃａ~（２＋）］出现反复振荡,幅度达约５００荧光单位,而膜电位基本上保持峰值水平。［Ｃａ~（２＋）］_ｉ升高与膜电位变化在时间和程度上不一致。本文结果提示,凝血酶引起血小板［Ｃａ~（２＋）］振荡和膜去极化,后者不是Ｃａ~（２＋）内流引起的。     

玉米sk-A7110突变体的鉴定与基因定位

柱头是玉米的主要性器官,其正常发育与形态建成对种子的繁殖和产量具有决定作用。本实验室发现一个雌穗发育异常的自然突变体sk-A7110,该突变体雌穗的柱头完全缺失,无法授粉结实。遗传分析表明,sk-A7110突变体的柱头缺失性状属于隐性性状,受1对隐性核基因控制。利用集团分离分析法将控制对应野生型性状的SKA7110基因定位在2号染色体短臂上,位于物理距离约255kb的SAG21与IDP1453标记之间,研究工作为SKA7110基因的克隆与功能分析奠定了基础。     

NMDA受体介导脑缺血/再灌注诱导GluR6 巯基亚硝基化的研究

目的:研究脑缺血再灌注以及联合给予脑缺血和NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体抑制剂MK801对大鼠海马CA1区Glu R6巯基亚硝基化以及海马CA1区锥体细胞凋亡的影响。方法:采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血再灌注模型,给予SD大鼠腹腔注射NMDA受体特异性抑制剂MK801(3 mg/kg)。主要运用'生物素转化法'(Biotin-Switch method)、SDS-PAGE、免疫印迹、焦油紫染色等方法对Glu R6的巯基亚硝基化(S-亚硝基化)、蛋白表达水平以及海马CA1区锥体细胞的凋亡水平进行研究。结果:脑缺血/再灌注显著促进Glu R6的巯基亚硝基化以及海马CA1区锥体细胞的凋亡,给予NMDA受体特异性抑制剂MK801能够显著抑制脑缺血/复灌诱导增加的Glu R6的S-亚硝基化以及海马CA1区锥体细胞的凋亡。结论:脑缺血/再灌注早期NMDA受体介导了Glu R6的巯基亚硝基化以及海马CA1区锥体细胞的凋亡,从而为临床治疗缺血再灌注脑损伤提供了理论依据。     

为什么突变多是有害的?

答:自然突变和利用物理(X射线、紫外线、电子束、激光照射)及化学因素(秋水仙素、硫酸二乙酯、羟胺等)处理生物所产生的诱发突变,一般是有害的。这是基因突变的一个特点。出现这种现象是不难理解的,因为现存任何生物的遗传基础——基因型,都是长期自然选择的结果,所以从外部形态到内部结构,包括生理生化状态及其与环境条件的关系等各个方面都有一定的适应性,都已达到相对平衡和协调状态。而突变则打破了原有的协调     

番茄凝集素的分离纯化及某些性质的研究

番茄成熟果实经抽提上鸡卵类粘蛋白(OM)-Sepharose 4B亲和层析柱分离纯化制得番茄凝集素。制品在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈一条带,表观分子量为205,000。Sephadex G200凝胶过滤行为呈单一吸收峰,分子量为180,000。等电聚焦测得等电点为7.6和9.4。它能使人和多种动物红细胞,以及某些培养细胞凝集,但效价不同。N—乙酰葡萄糖胺寡聚糖是其专一性结合糖。     

L—精氨酸的制备

本文报道了运用国产732、717阴阳离子交换树脂从批量900kg毛发酸水解提取CYS后的母液中,分离提取Arg的全过程。每柱产量达到了Arg9.3kg以上。本文提出了以自来水代替部分无离子水的方法;还指出了用乙醇和活性炭作脱色剂,比单用活性炭脱色的效果好。产品质量达到了日本味之素公司同类产品的标准。本方法经过试生产,产量和质量稳定。