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61.
目的:探讨K-ras基因突变及蛋白表达对胰腺癌的诊断价值。方法:采用突变等位基因特异性扩增(PCR-MASA)检测31例胰腺癌和22例非胰腺癌石蜡包埋组织中K-ras基因12密码子点突变情况,并通过免疫组化法检测其K-ras蛋白的表达。结果:胰腺癌患者K-ras基因12密码子点突变率为80.6%(25/31),K-ras蛋白表达阳性率为87.1%(27/31);而非胰腺癌患者K-ras基因12密码子点突变率为27.3%(6/22),K-ras蛋白表达阳性率31.8%(7/22)。胰腺癌患者K-ras基因突变率及K-ras蛋白表达阳性率均明显高于非胰腺癌患者(P均0.05)。K-ras基因突变与其蛋白表达呈正相关(r=0.542,P0.05),而与胰腺癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、临床分期及分化程度等临床病理特征均无显著相关性(P均0.05)。结论:胰腺癌K-ras基因突变的发生率升高,且K-ras蛋白表达异常上调,二者可能有助于胰腺癌的诊断。 相似文献
62.
目的研究丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)编码蛋白E1的生物学功能。方法分别构建编码HCV重要蛋白E1、E2、NS3、NS5a、NS5b的腺病毒载体Ad—E1、Ad—E2、Ad—NS3、Ad—NS5a、Ad—NS5b;将重组并包装的腺病毒分别感染SMMC-7721细胞,测定感染滴度,通过RT—PCR方法在转录水平鉴定HCVE1、E2、NS3、NS5a、NSSb的表达,用Western印迹在蛋白水平鉴定E1蛋白的表达。腺病毒感染SMMC-7721细胞后,通过细胞增殖实验筛选生物学功能最明显的蛋白。将筛选到的Ad—E1感染SMMC-7721细胞,用MTS、结晶紫、细胞周期实验观察体外过表达E1蛋白对感染细胞增殖的影响;Western印迹检测p-ERK、ERK的表达;RT—PCR检测c—Myc、cyclinD1、c—Jun、c.Fos基因的表达。结果成功扩增了能够编码HCV重要蛋白E1、E2、NS3、NS5a、NS5b的高滴度腺病毒Ad—E1、Ad—E2、Ad—NS3、Ad—NS5a、Ad—NS5b,并且通过RT—PCR方法在转录水平鉴定了目的基因的表达,Western印迹方法在蛋白水平鉴定了E1蚩白的表达。通过细胞计数、MTS、结晶紫实验证实Ad—E1感染组细胞较对照组增殖速度加快,细胞周期显示Ad-E1感染组细胞34.38%处于S期,明显高于Ad—GFP(27.32%)(P〈0.05)对照组;Ad-E1感染绢p-ERK蛋白表达量增高,同时与细胞增殖相关的MAPK/ERK下游基因转录水平上凋。结论体外过表达HCVE1蛋白可以明显促进SMMC-7721细胞的增殖,其促增殖作用可能与MAPK/ERK信号通路的活化相关。 相似文献
63.
雌雄栝楼的组织培养研究 总被引:2,自引:0,他引:2
对雌雄栝楼(Trlctmsanthes kirilowii Maxim)分别进行组织培养的研究结果表明:在雌雄栝楼组织培养过程中,愈伤组织的诱导和分化适宜的培养基均存在性别差异。愈伤组织诱导的适宜培养基分别是,雌性栝楼培养基为MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L;雄性栝楼培养基为MS+NAA0.1mg/L+IBA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L和MS+NAA0.1mg/L+IBA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L。愈伤组织分化的适宜培养基分别是,雌性栝楼培养基为MS+NAA0.1mg/L+IBA0.4mg/L+6-BA1.2mg/L;雄性栝楼培养基为MS+NAA0.3ms/L+IBA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L;雌雄栝楼无根苗生根的适宜培养基均为MS+NAA0.1mg/L。 相似文献
64.
本研究首次发现Monodictyx asperospera(Cooke&Massee)Ellis具有较好的产漆酶能力.粗酶液经硫酸铵盐析、DEAE-纤维素层析及丙烯葡聚糖凝胶S-300层析纯化,纯化倍数为8.1,回收率为5.7%.漆酶分子量约为77kD,最适反应温度为55℃,最适反应pH6.0,以丁香醛连氮为底物时Km为0.163mm0l/L,Vmax为0.194 mmol(L·min),含糖量为18.14%,Cu2+对漆酶有明显抑制作用. 相似文献
65.
66.
棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒(HaSNPV)是我国第一个商品病毒杀虫剂,具有使用安全、害虫不产生抗药性等优点,是一种很有发展潜力的生物农药。幼虫虫体受病毒感染后,HaSNPV几丁质酶在其液化过程中起了很大的作用,因此可以作为增效剂以显著提高细菌、病毒、真菌等微生物杀虫剂的毒力,并具有更高的安全性。将HaSNPV几丁质酶基因构建到原核表达载体pET28a中,经测序检验后转化至大肠杆菌Rosetta,然后以IPTG作为诱导剂,目标蛋白以包涵体的形式得以成功表达。在变性条件下,包涵体经镍 次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱层析纯化,并以两种不同的方法进行复性,均可获得具有活性的HaSNPV几丁质酶。 相似文献
67.
ACC氧化酶和ACC合成酶反义RNA融合基因导入番茄和乙烯合成的抑制 总被引:7,自引:0,他引:7
从番茄品种强力米寿的总DNA中克隆番茄果实特异启动子2A11,以番茄成熟果实的RNA为模板,进行RT-PCR扩增,克隆番茄全长的ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因片段。完成两个基因的克隆和测序后,将888bp的番茄ACC氧化酶基因和943bp的ACC合成酶基因片段串联,构成全长1837bp的融合基因。将该融合基因以反义的方向插入植物双元载体pYPX145中番茄果实表达特异启动子下游,获得ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因融合的植物双元载体pOSACC。该载体外源基因表达单元的两端含两个烟草SAR序列,利于转基因的稳定遗传。以番茄栽培品种合作903子叶和下胚轴为外植体,利用根癌农杆菌进行基因转化,通过200mg/L卡那霉素选择和GUS检测,获得了105株番茄GUS阳性植株,转基因番茄果实在当代表现明显耐贮特点。经过4代的耐贮和果实农艺性状的综合选择,获得了两个表现良好的株系DR-1和DR-2,两株系果实乙烯释放量显著下降,是未转基因材料的9.5%,番茄的贮存期在50天以上。 相似文献
68.
福建畲族的红细胞血型分布 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道了父母双方上溯三代均为畲族的123名健康人的9个红细胞血型系统的分布.其表型分布如下:ABO血型系统:A型34人,B型26人,O型57人,AB型6人.MNSs血型系统:MNSs型5人,MMSs型5人,NNSs型1入,MMss型32人,MNss型62人,NNss型18人.未发现SS型.Rh血型系统:CCDee型44人,CcDee型9人,CCDEe型5人CcDEe型55人,ccDEe型2人,ccDEE型8人,未发现ccDee、CCDEE型及CcDEE型.Duffy血型系统:Fy(a+b-)型115人,Fy(a+b-)型8人,未发现Fy(a-b+)及Fy(a-B-)型.Kidd血型系统:Jk(a+b-)型49人,Jk(a+b+)型43人,Jk(a-b+)型31人,未发现Jk(a-b-)型.Luthcran血型系统:Lu(a-b+)型123人,未发现Lu(a+b-)及Lu(a+b+)型.Diego血型系统:Di(a+)型13人,Di(a-)型110人.P血型系统:Pl(+)型38人,Pl(-)型85人.Lewis血型系统:Le(a+b-)型16人,Le(a+b+)型9人,Le(a-b+)型91人,Le(a-b-)型7人. 相似文献
69.
棉田捕食性天敌种群动态及其对害虫的控制功能 总被引:1,自引:0,他引:1
棉田中捕食性天敌群落以蜘蛛类为主,天敌优势种因季节和害虫的不同而异,捕食性天敌混合种群的数量在棉花生长季节主要有两个高峰,分别在六月中,下旬和九月上旬后,一个低谷在七、八月间,它和棉田害虫的消长情况相对应。从天敌和害虫功能虫态的数量关系上分析。Y(百株害虫)=324041X(百株天敌)^-2.165%(r=0.928^**);天敌和棉花蕾铃受害关系,其相关式为:Y′(百株蕾铃受害数)=4.8028e^(179.9619/x)(r=0.8467^**)。 相似文献
70.